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文檔簡介
1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文擬南芥AtPLC14參與調(diào)節(jié)花粉萌發(fā)和生長的功能研究姓名:趙婧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:潘延云20090605FunctionanalysisofAtPLC14regulationpollengerminationdevelopmentinArabidopsisAuth:ZhaoJingMaj:biochemistrymolecularbiologyAdvisi:PanYanyunAb
2、stractThephospholipasesCareacterizedbyhydrolyzingphospholipids.Itisasuperfamilythatcontainsmuchsubtype.AccrodingtothedifferentsubstratesitcanbedevidedintoPhosphoinositidespecificphospholipaseC(PIPLC)Phosphatidylcholinesp
3、ecificphospholipaseC(PC–PLC)soon.PIPLCuniversallyconsistsinmammalplantwhichplaysakeyroleinthephosphoinositidesignalingtransductionpathwaywhichhasbeenproposedtobeimptantinregulatingmanyphysiologicalprocesses.PIPLCsomesign
4、almoleculessuchasPhosphatidylinositolbisphosphate(PIP2)Inositol145trisphosphate(IP3)Diacylglycerol(DAG)Ca2werefoundinvovedinthepollengerminationpollentublegrowthprocessesinplants.AnovelphospholipaseCthatcanhydrolyzephosp
5、hatidylcholinehasbeenfoundinplantnowdays.IthasbeenreptedthatPC–PLChadrelativelyhighexpressionlevelsinnonphotosyntheticganslikeflalgansroots.TheexpressionofPC–PLCinrootsisrelatedtophosphatesupplementationthereplacementofp
6、olarlipidsduringphosphatedeprivation.AftertheaccomplishmentofArabidopsisgenomesequencingwehaveknownthatthereareabout17classesofPLCsubtypeinArabidopsisallofthemmighthavetheirownfunctionsindifferentphysiologicalprocess.Her
7、eweuseonesubtypeofArabidopsisPLClikegene(AtPLC14)TDNAionmutantsanastatesoverexpressionasmaterialweusedwidetypeArabidopsisascomparisonprovidingmolecularevidencesofthisgeneinvivoduringthepollengerminationdevelopment.Wefoun
8、dthatAtPLC14ishighlyexpressedinmaturepollenbyRTPCRGUSstaining.ThenwedetectedthephenotypegerminantacterofmutantpollenusingwidetypeArabidopsisascomparison.TheresultsshowedthatthedefectofAtPLC14couldcausethedecreaseinthepol
9、lengerminationpollentubegrowth.ThroughthetransientexpressionresultsofthegeneAtPLC14eYFPfusiongeneinonionepidermalcellwefoundthatthesubcellularexpressionsiteofthegeneAtPLC14locatedonoutsidetheplasmamembrane.Wetestedthepro
10、karyoticexpressionproductofthegeneAtPLC14byhighefficiencyliquidchromatographywefoundthefunctionoftheexpressionproductishydrolyzingthephosphatidylcholine(PC).TheserusultssuggestedthattheproductofAtPLC14isakindofhydrolaset
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