13764.擬南芥ringfingere3基因sinat1調(diào)控花粉萌發(fā)的初步研究

1、◎妻妊未更多碩士研究生學(xué)位論文題目：塑直薟世盥g：魚墜g皇!壁壘基國(guó)!塑型旦調(diào)控壟趨盟筮數(shù)墊生嬰究姓名j王劍嶠學(xué)號(hào)：10811079院系：生全盟堂堂瞳專業(yè)：生塹堂!生塹墊盔)研究方向：蕉塹盟絲基固塑堂導(dǎo)師姓名：星主k矗整撞亟壘壁整握二O一三年六月北京大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文中文摘要配子體的發(fā)育是植物有性生殖世代交替的關(guān)鍵過(guò)程之一。在被子植物中，雄配子體的形成是一個(gè)有序而復(fù)雜的過(guò)程。以擬南芥為例，小孢子母細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂，形成四個(gè)有功能的小

2、孢子；小孢子經(jīng)過(guò)兩次細(xì)胞分裂形成了包含兩個(gè)精細(xì)胞和一個(gè)營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞的成熟花粉粒。花粉落到柱頭上后，經(jīng)過(guò)吸水、萌發(fā)、并產(chǎn)生花粉管，花粉管以一種極性生長(zhǎng)的方式將精細(xì)胞送入胚珠中?；ǚ勖劝l(fā)和花粉管的快速伸長(zhǎng)需要植物體大量的能量和物質(zhì)來(lái)保證，并受到多種因素的復(fù)雜調(diào)控，機(jī)制還不十分清楚。本課題的研究對(duì)象黝w“屬于擬南芥肋蜘瑾因家族的一個(gè)成員，編碼一個(gè)RING—fiIlger蛋白，該蛋白家族在多種植物及動(dòng)物中均有同源蛋白。我分別從公共數(shù)據(jù)庫(kù)ABRc和N

3、Asc中獲得兩個(gè)獨(dú)立的T—DNA插入突變體，分別命名為5伽口“一J(CS833840)和s砌口fJ一2(CS907083)。對(duì)這兩個(gè)突變體雜合體后代進(jìn)行基因型鑒定，發(fā)現(xiàn)其后代中均沒(méi)有純合體，且野生型和雜合體比例均為接近1：1?；ソ粚?shí)驗(yàn)表明，對(duì)于Jf療日f(shuō)』突變體，TDNA不能通過(guò)雄配于體傳遞。進(jìn)一步的生化染色分析及花粉管萌發(fā)實(shí)驗(yàn)表明，5加口fJ『雄配子體不育的表型很可能是由花粉不能正常萌發(fā)而引起的。實(shí)驗(yàn)表明，齜刪刀基因主要在幼苗階段和成

4、株的花藥中表達(dá)；該基因所編：碼的蛋白主要定位于核內(nèi)。生物信息學(xué)分析結(jié)果顯示，sINATl蛋白序列含有一個(gè)保守的sINA結(jié)構(gòu)域和一個(gè)RINGfinger結(jié)構(gòu)域。體外泛素化實(shí)驗(yàn)證明，sINATl是一個(gè)在體外能行使E3連接酶功能的蛋白，很可能通過(guò)泛素一26s蛋白酶體依賴的蛋白降解途徑參與調(diào)節(jié)花粉萌發(fā)過(guò)程。為了進(jìn)一步研究肼M盯基因調(diào)控花粉管萌發(fā)的可能機(jī)制，本論文使用了酵母雙雜交系統(tǒng)在擬南芥花序組織基因文庫(kù)中進(jìn)行篩選。初步篩選結(jié)果及后續(xù)驗(yàn)證表明，