適配體傳感器的制備、應用及其電化學發(fā)光研究.pdf

1、本論文共分為三章,包括緒論、DNA修飾電極的制備及電化學行為研究、高靈敏度適配體傳感器的制備和應用。
　　 緒論部分對化學修飾電極的發(fā)展、基本知識、現(xiàn)狀以及在分析化學中的應用進行了詳細的綜述；介紹了DNA修飾電極、適配體修飾電極的發(fā)展,基本知識；論述了電化學發(fā)光基礎理論知識和典型電化學發(fā)光體系的發(fā)光原理。
　　 第二章是DNA修飾電極的制備及電化學行為研究。制備了一種簡單有效的親水性電極-DNA復合膜電極。巰基化的DNA

2、通過形成Au-S的過程中被固定在金電極的表面,研究了Ru(bpy)32+-三丙胺(TPA)發(fā)光體系在DNA修飾電極電化學、電化學發(fā)光行為。結果表明:質(zhì)子化的TPA與DNA鏈上的磷酸鹽基團通過靜電作用實現(xiàn)對TPA的富集作用；而且DNA電極上面的磷酸鹽基團利于TPA的去質(zhì)子化,提高TPA的氧化和電化學發(fā)光效率從而降低了TPA的檢測限。此DNA修飾電極對TPA的檢測限達到了0.7 nM,而裸電極對TPA的檢測限是3.2 nM。由于DNA修飾電

3、極對TPA氧化的改善,在pH7.5的條件下,觀察到TPA-Ru(bpy)32+體系在0.9 v左右處的低電位電化學發(fā)光。低電位發(fā)光可用于降低對有機分子的氧化損傷,提高修飾電極的重復使用次數(shù),低電位發(fā)光的出現(xiàn)可進一步拓展DNA修飾電極的應用范圍。
　　 第三章是制備了具有attomole質(zhì)量檢測限的適配體傳感器并將其應用在凝血酶的測定領域。通過自組裝方法將巰基化凝血酶適配體修飾到金電極表面,然后與其互補鏈形成雙鏈DNA(ds-DN

4、A),利用釕配合物嵌入ds-DNA的特性引入探針分子構筑適配體傳感器。目標物凝血酶與其適配體結合導致雙鏈的破壞及釕探針的釋放,從而產(chǎn)生電化學發(fā)光信號的降低。與傳統(tǒng)方法比,本方法不僅省略了繁瑣的標記步驟,而且一個ds-DNA分子可以插入多個鄰菲咯啉釕[Ru(phen)32+]分子,因此極大提高了檢測靈敏度,對凝血酶的檢測,達到了attomole的質(zhì)量檢測限和0.02皮摩爾(pM)的濃度檢測限,優(yōu)于其它方法。同時利用溶菌酶適配體及對溶菌酶的