甲醛對(duì)小鼠胚胎腫瘤干細(xì)胞自我更新調(diào)控的初步研究.pdf

1、中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文甲醛對(duì)小鼠胚胎腫瘤干細(xì)胞自我更新調(diào)控的初步研究姓名：屈祎申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：動(dòng)物學(xué)指導(dǎo)教師：劉云波20070501中國(guó)協(xié)和醫(yī)科丈學(xué)碩士學(xué)位論文可能是CSCs致瘤的重要原因。CSCs的發(fā)現(xiàn)極大豐富了人們對(duì)腫瘤發(fā)生的理解，為腫瘤的臨床研究和治療開(kāi)辟了新的方向?；谝陨纤?，本課題提出以下假說(shuō)：甲醛能夠?qū)е戮哂凶晕腋履芰Φ腃SCs發(fā)生自我更新異常，從而刺激CSCs從失調(diào)控的擴(kuò)增形成腫瘤。通過(guò)這種致瘤機(jī)制，可以

2、使甲醛致瘤模型中腫瘤發(fā)生的部位與細(xì)胞損傷的部位不必一致。本課題選用P19細(xì)胞系作為研究模型。P19細(xì)胞具有與CSCs相似的特性，其中包括多方向分化潛能和自我更新能力。首先用甲醛處理P19細(xì)胞，通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征觀察來(lái)分析細(xì)胞表型的改變，然后通過(guò)eDNA表達(dá)芯片技術(shù)來(lái)高通量檢測(cè)有細(xì)胞表型改變的細(xì)胞在甲醛處理前后基因表達(dá)譜，篩選出表達(dá)水平改變?cè)?倍以上的基因，通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR在mRNA水平對(duì)部分改變基因進(jìn)行驗(yàn)證。運(yùn)用生物信息學(xué)技術(shù)，對(duì)甲醛

3、處理前后表達(dá)明顯改變的基因根據(jù)功能進(jìn)行歸類(lèi)，并對(duì)與細(xì)胞自我更新相關(guān)的基因進(jìn)行調(diào)控通路分析。我們的結(jié)果表明：甲醛的加入，導(dǎo)致了干細(xì)胞多條自我更新調(diào)控通路的異常，其中包括細(xì)胞周期中關(guān)鍵的GI／S調(diào)控點(diǎn)、TGF13信號(hào)通路、Wnt信號(hào)通路等。干細(xì)胞自我更新調(diào)控通路中的關(guān)鍵基因：NOG(noggin)、Nanog、Id、Sfrp2以及幾種重要的細(xì)胞周期蛋白等。實(shí)驗(yàn)為甲醛對(duì)細(xì)胞自我更新調(diào)控提出可能的理論依據(jù)。來(lái)探討甲醛通過(guò)CSCs途徑誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生