平臥菊三七中酚類化合物的提取分離與體外抗氧化和抗炎功效研究.pdf

1、平臥菊三七含有豐富的酚類化合物，具有消炎、抗病毒、降壓、降糖、降脂、抗氧化、促愈合等功效。在2012年5月，平臥菊三七被國家衛(wèi)生部指定為新資源食品。為了更好的研究和推廣平臥菊三七這種藥食兩用的蔬菜，本文以平臥菊三七為原料研究了平臥菊三七酚類化合物的提取工藝和分離純化方法，及其提取物的體外抗氧化和抗炎功效。
　　(1)通過比較平臥菊三七不同極性溶劑、不同原料部位提取液的功效成分含量，溶劑中酚類化合物成分含量:水＞甲醇＞乙醇＞丙酮＞乙

2、酸乙酯＞正丁醇＞三氯甲烷，根部＞葉部＞莖部。冷凍干燥和60℃熱風(fēng)干燥方式獲得的提取液具有更強的抗氧化活性和更高的酚類化合物提取得率。選用乙醇水溶液作為提取溶劑，在50℃條件下，按1∶25(m/V)加入一定體積比的60％（體積比）乙醇水溶液混合，并用21KHz的超聲波輔助提取50min作為最佳提取方法?？寡趸钚裕‵RAP法、DPPH法和ABTS法）與總酚、總黃酮和綠原酸含量顯著相關(guān)，與總酚相關(guān)系數(shù)R分別為0.919，0.848，0.90

3、7，與總黃酮含量相關(guān)系數(shù)R分別為0.915，0.793，0.823，與綠原酸含量相關(guān)系數(shù)R分別為0.887，0.927，0.900，與VC含量相關(guān)性較低。
　　(2)通過對平臥菊三七多酚提取物進行分離純化，為平臥菊三七的進一步推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。采用超聲波輔助浸提法提取多酚提取液為原料，利用大孔樹脂柱層析對粗多酚進行純化。結(jié)果表明，NKA-9大孔樹脂最適合純化平臥菊三七多酚;較適宜的條件為:將3.0mg/mL的多酚提取液以2BV

4、/h的進樣流速上樣;洗脫時用70％的乙醇做洗脫液進行動態(tài)洗脫，洗脫劑用量為2BV。用此方法純化后的平臥菊三七多酚的純度從24.83％提高到78.43％;經(jīng)HPLC分析和鑒定，NKA-9分離純化平臥菊三七酚類物質(zhì)不會造成單體酚組成變化和明顯損失，且主要由綠原酸組成。平臥菊三七提取液經(jīng)純化后的抗氧化活性有所增強。
　　(3)探討平臥菊三七不同極性萃取部位的體外抗炎和抗癌作用。采用極性由低到高分離得到平臥菊三七三氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃

5、取物、正丁醇萃取物、萃余相4個部位，建立LPS誘導(dǎo)的RAW264.7巨噬細胞炎癥模型，檢測平臥菊三七四個部位萃取物對炎癥因子NO分泌的影響。并采用HPLC-ESI-MS檢測四種萃取物中的有效成分。通過RAW264.7炎癥模型的篩選，平臥菊三七乙酸乙酯部位(100μg/mL)可顯著抑制模型細胞NO的分泌，且不抑制RAW264.7細胞增殖。三氯甲烷部位(100、200μg/mL)可顯著抑制Hela細胞的生長，可能與平臥菊三七中的沒食子酸和萜