N-(氮雜環(huán))去甲基斑蝥素酰胺酸及其稀土配合物的合成、與DNA作用研究及體外抗增殖活性.pdf

1、斑蝥素(cantharidin，CA)是南方節(jié)肢動物大斑蝥和黃黑小斑蝥死后的干燥蟲體，在中國使用已經(jīng)超過2000年。研究表明，斑蝥素除了具有抗癌活性外，尚有抗病毒、壯陽、升高白細胞等多種活性。但因毒性大，對心腎器官有實質(zhì)性損傷，限制了它的使用。因此設計并合成一些選擇性抑制腫瘤細胞、毒性小且對機體免疫反應沒有影響的斑蝥素衍生物具有重要意義。與斑蝥素相比，去甲基斑蝥素(norcantharidin，NCTD)中僅少了2，3位的兩個甲基，但立

2、體結構相同。它不僅保持了較強的抗腫瘤活性和獨特的升高白細胞作用，而且毒性大大降低，基本上消除了斑蝥素對泌尿系統(tǒng)的刺激副作用。大量斑蝥素和去甲基斑蝥素衍生物被合成并對其進行了抗腫瘤活性篩選，其中大部分衍生物顯示了較強的生物活性。稀土離子及配合物作為核酸斷裂試劑能以水解方式斷裂核酸的磷酸二脂鍵，且斷裂效率高，關于它們的研究越來越受到重視。本論文設計并合成了新型的N-(氮雜環(huán))去甲基斑蝥素酰胺酸及其稀土配合物，利用多種方法研究了它們與小牛胸腺

3、DNA(ct-DNA)的作用模式，并利用噻唑藍(MTT)比色法研究了它們對人體癌細胞的體外抗增殖活性。 本論文合成了兩種新型的N-(氮雜環(huán)).去甲基斑蝥素酰胺酸化合物：N-嘧啶去甲基斑蝥素酰胺酸(HL1)和N-吡啶去甲基斑蝥素酰胺酸(HL2)。用元素分析、紫外光譜、紅外光譜、核磁共振等方法確定了化合物的結構。用熒光光譜法，粘度法和瓊脂糖凝膠電泳法研究了HL1、HL2及HL3(N-苯基去甲基斑蝥素酰胺酸)與DNA作用的方式和強度。

4、結果顯示三種化合物都可以與DNA發(fā)生部分插入作用，其中芳香環(huán)可以插入到DNA的堿基對中。三種化合物作用的強度按照如下的順序遞減：HL1，HL2和HL3。這可能是由于HL1，HL2的芳香環(huán)中含有更多的氮雜原子，可以與DNA的堿基對之間形成氫鍵，增強了化合物與DNA堿基對的堆積作用，從而使化合物能更深入的插入到DNA的雙螺旋堿基對之間。用MTT法研究了三種化合物對人肝癌細胞SMMC7721、人肺癌細胞A549的體外抗增殖活性，結果顯示含有氮

5、原子越多的芳香環(huán)化合物具有更強的活性，這與DNA結合強度的結果相一致。 合成了七種HL1的配合物[RE(L1)(NO3)(H2O)2]NO3·2H2O(RE=Y，Nd，Sm，Eu，Gd，Dy，Er，)，六種HL2的配合物[RE(L2)(NO3)(H2O)2]NO3·2H2O(RE=La，Nd，Gd，Dy，Er，Yb)和十種HL3的配合物[RE(L3)(NO3)(H2O)2]NO3·2H2O(RE=Y，La，Nd，Sm，Eu，Gd

6、，Dy，Ho，Er，Yb)，用元素分析、摩爾電導、紅外光譜和熱重分析等手段確定了它們的組成；用熒光光譜法、粘度法和瓊脂糖凝膠電泳法研究了上述配合物與DNA作用的模式和強度。結果表明，形成配合物后，配體HL中的芳香環(huán)更容易插入DNA雙螺旋堿基對之間，其中以HL1的系列配合物與DNA的作用最強，可能是由于與稀土RE(III)配位后，配體的平面性增強，π體系得到擴展，導致配位后的配體能更深的插入DNA分子的雙螺旋堿基對之間。利用MTT法研究了

7、部分配合物對人體癌細胞的體外抗增殖活性，其中大部分配合物的活性顯著增強。 合成并表征了三種去甲基斑蝥素和鄰菲咯啉與稀土形成的配合物。經(jīng)元素分析、摩爾電導、紅外光譜、熱重分析等手段確定其組成為：[RE2(NCTD)2(phen)2](NO3)2·6H2O(RE=Sm，Er,Yb)。用紫外可見光譜，熒光光譜，粘度法和瓊脂糖凝膠電泳法等研究了它們與DNA的作用情況。結果表明，合成的配合物與DNA之間可以發(fā)生強烈的部分插入作用并可對超螺