紫娟茶中花青素提取方法及花青素生物學(xué)作用的研究.pdf

1、花青素的抗腫瘤、防衰老、防輻射等作用已得到國(guó)內(nèi)外相關(guān)研究證實(shí)?，F(xiàn)在，人們普遍關(guān)注花青素的提取分離及其生物學(xué)作用。本文對(duì)紫娟茶中花青素的分離純化方法進(jìn)行了研究，對(duì)聚酰胺柱層析中的各梯度洗脫組分的抗自由基活性進(jìn)行了測(cè)定；用光譜法分別研究了天竺葵素、矢車菊-3-葡萄糖苷與HSA的結(jié)合機(jī)理；利用紫外吸收光譜研究了天竺葵素、矢車菊-3-葡萄糖苷與DNA的相互作用。
　　 1.采用“溶劑提取、萃取、柱層析（薄板層析）、重結(jié)晶或鉛鹽沉淀”相結(jié)

2、合的分離純化方案對(duì)紫娟茶中的花青素進(jìn)行了分離純化，對(duì)花青素粗品及各梯度洗脫組分進(jìn)行了抗羥自由基及抗超氧陰離子自由基活性測(cè)定，結(jié)果表明花青素粗品及各梯度洗脫成分均有良好的抗羥自由基、抗超氧陰離子自由基能力，所得五個(gè)組分對(duì)兩種自由基的平均清除率分別為兒茶素1.4倍和4.5倍，在超氧自由基的抑制方面，花青素提取物顯示了更強(qiáng)的抑制能力。得到了兩種純度較高的花青素，經(jīng)初步鑒定，分別為飛燕草-3-半乳糖苷、矢車菊-3-半乳糖苷。
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3、在模擬人體生理?xiàng)l件下，用紫外、熒光和同步熒光光譜法研究了天竺葵素與人血清白蛋白的相互結(jié)合的分子機(jī)理。結(jié)果表明：天竺葵素能使HSA發(fā)生內(nèi)源熒光猝滅，屬靜態(tài)猝滅機(jī)理。25,30和37℃下，天竺葵素與HSA的靜態(tài)猝滅速率常數(shù)分別為3.36×104,4.29×104和4.86×104 L·mol－1，結(jié)合常數(shù)分別為3.24×104,4.02×104和4.89×104 L·mol－1，結(jié)合位點(diǎn)數(shù)為1。根據(jù)F?rster非輻射能量轉(zhuǎn)移機(jī)理，天竺葵素

4、與HSA之間的作用距離約為3.44nm，能量轉(zhuǎn)移效率為0.0955。熱力學(xué)分析表明天竺葵素與HSA存在疏水相互作用，天竺葵素對(duì)HSA構(gòu)象影響較小。
　　 3.對(duì)矢車菊-3-葡萄糖苷的研究表明：矢車菊-3-葡萄糖苷能使HSA發(fā)生內(nèi)源熒光猝滅，屬靜態(tài)猝滅機(jī)理。25,30℃下，矢車菊-3-葡萄糖苷與HSA的靜態(tài)猝滅速率常數(shù)分別為3.74×104,4.06×104 L·mol－1，結(jié)合常數(shù)分別為1.07×105，1.52×105 L·m

5、ol－1，結(jié)合位點(diǎn)數(shù)為1。矢車菊-3-葡萄糖苷與HSA之間的作用距離約為5.62nm，能量轉(zhuǎn)移效率為0.0851。熱力學(xué)分析表明矢車菊-3-葡萄糖苷與HSA存在疏水相互作用，矢車菊-3-葡萄糖苷對(duì)HSA構(gòu)象影響較小。
　　 4.通過紫外光譜法研究了天竺葵素、矢車菊-3-葡萄糖苷與DNA的相互作用，得到了模擬人體生理?xiàng)l件下天竺葵素、矢車菊-3-葡萄糖苷兩種花青素與DNA的結(jié)合常數(shù)為1.54×106，1.16×106 L·mol－1