構(gòu)建金納米比色法和免疫分析法檢測(cè)環(huán)境和食品中的農(nóng)藥殘留.pdf

1、在農(nóng)作物的生長(zhǎng)過(guò)程中，農(nóng)藥經(jīng)常被用作預(yù)防及控制蟲(chóng)害和雜草。農(nóng)藥的使用極大地提高了農(nóng)作物的產(chǎn)量，然而過(guò)量或者其他不恰當(dāng)?shù)氖褂棉r(nóng)藥，導(dǎo)致殘留的農(nóng)藥最終會(huì)流入水中、土壤中、甚至揮發(fā)到大氣中經(jīng)呼吸道進(jìn)入人體，這將會(huì)嚴(yán)重影響人類(lèi)和其他生物的生命健康。目前大部分的檢測(cè)技術(shù)都依賴(lài)于大型儀器，儀器價(jià)格昂貴，樣品前處理繁瑣，樣品分析時(shí)間長(zhǎng)并且需要專(zhuān)業(yè)人士操作。因此，發(fā)展不依賴(lài)于大型儀器的農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)新技術(shù)，具有重大意義。本論文采用比色法和免疫分析法

2、，研究并建立了環(huán)境和食品中的農(nóng)藥殘留的快速檢測(cè)新技術(shù)，取得了較為滿(mǎn)意的結(jié)果。具體研究?jī)?nèi)容如下：
　　1.利用對(duì)氨基苯甲酸（PABA）修飾的金納米粒子對(duì)殺螟丹進(jìn)行了比色法檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，由于修飾于金納米表面的對(duì)氨基苯甲酸中的羧基基團(tuán)能與殺螟丹中的氨基基團(tuán)形成氫鍵，誘導(dǎo)金納米粒子聚集，引起其光譜變化并伴隨溶液顏色變化，據(jù)此建立了檢測(cè)殺螟丹的紫外-可見(jiàn)分光光度法及比色法。殺螟丹裸眼檢測(cè)限為0.15 mg/L，利用紫外可見(jiàn)光譜進(jìn)行定量分析

3、，殺螟丹在0.08~0.7 mg/L范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，檢測(cè)限為0.02 mg/L。對(duì)環(huán)境水樣中的殺螟丹進(jìn)行檢測(cè)，加標(biāo)回收率為101％~107%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.1%~4.7%之間。
　　2.利用對(duì)氨基苯甲酰胺（P-AMIDE）修飾的金納米粒子對(duì)殺草強(qiáng)進(jìn)行了比色法檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，由于金納米粒子表面的配位劑對(duì)氨基苯甲酰胺通過(guò)氨基基團(tuán)與殺草強(qiáng)中的氨基形成氫鍵，誘導(dǎo)金納米子粒子發(fā)生聚集，使得溶液由酒紅色變成藍(lán)色，從而建立了可視

4、化檢測(cè)殺草強(qiáng)的方法。AuNPs的聚集程度與殺草強(qiáng)濃度呈正相關(guān)。本方法對(duì)環(huán)境水樣中的殺草強(qiáng)進(jìn)行檢測(cè)，裸眼檢測(cè)限為0.10 mg/L，儀器檢測(cè)限為0.023 mg/L，殺草強(qiáng)濃度在0.10~0.95 mg/L范圍內(nèi)呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。
　　3.采用傅克反應(yīng)對(duì)氯吡脲（CPPU）小分子進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，合成氯吡脲半抗原。再采用碳二亞胺（EDC）法將半抗原分別與牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）進(jìn)行偶聯(lián)，獲得氯吡脲免疫抗原（CPPU-BS

5、A)和檢測(cè)抗原（CPPU-OVA）。采用質(zhì)譜、元素分析和核磁共振氫譜對(duì)氯吡脲半抗原的結(jié)構(gòu)式和分子式進(jìn)行鑒定；采用紫外光譜和高性能基質(zhì)輔助激光解吸電離-飛行時(shí)間質(zhì)譜對(duì)偶聯(lián)物的結(jié)構(gòu)和相對(duì)分子質(zhì)量進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示成功合成出氯吡脲人工抗原，用氯吡脲免疫抗原來(lái)免疫新西蘭大白兔，結(jié)果表明氯吡脲免疫抗原能夠刺激大白兔產(chǎn)生特異性較好的抗氯吡脲多克隆抗體，因而建立了基于多克隆抗體的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法檢測(cè)臍橙中的氯吡脲。該法IC50為48 ng/mL，