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1、本論文以青錢(qián)柳葉片為原料提取精制青錢(qián)柳多糖,命名為CP。對(duì)CP進(jìn)行硫酸化修飾,得青錢(qián)柳多糖的硫酸化衍生物S-CP1-4。然后對(duì)這兩種多糖組分的主要理化性質(zhì)、單糖組成、分子量、紅外光譜、紫外吸收光譜及掃描電鏡圖譜進(jìn)行分析;在 DPPH自由基體系下,評(píng)價(jià)其體外抗氧化活性,并建立H2O2誘導(dǎo)的氧化損傷模型,評(píng)價(jià)其氧化損傷抑制活性;同時(shí)研究了硫酸化修飾前后青錢(qián)柳多糖對(duì)LPS誘導(dǎo)的小鼠炎癥的抑制作用。結(jié)合理化性質(zhì)和活性測(cè)定的結(jié)果,綜合評(píng)價(jià)硫酸化修
2、飾對(duì)多糖抗氧化和抗炎活性的影響。主要結(jié)果如下:
(1)硫酸化修飾可改變青錢(qián)柳多糖的基本理化性質(zhì)、單糖組成和分子量。紅外光譜圖可證實(shí)硫酸根基團(tuán)被成功的結(jié)合到青錢(qián)柳多糖的結(jié)構(gòu)中。青錢(qián)柳多糖CP是一種含有63.77±1.55%中性糖、11.03±0.17%糖醛酸和8.23±0.78%蛋白質(zhì)的雜多糖,硫酸化青錢(qián)柳多糖S-CP1-4則含有42.41±2.55%的中性糖、13.41±0.69%的糖醛酸和1.95±0.09%的蛋白質(zhì)。CP中
3、未檢出硫酸化基團(tuán),S-CP1-4的取代度為0.42。HPGPC色譜表明經(jīng)硫酸化修飾后,多糖的分子量增加,這是硫酸化基團(tuán)取代羥基的結(jié)果。HPACE結(jié)果進(jìn)一步證明硫酸化修飾對(duì)多糖的結(jié)構(gòu)造成一定影響,改變了其單糖組成。同時(shí) SEM掃描電鏡結(jié)果表明,CP和S-CP1-4粉末在掃面電鏡中均成片狀。
?。?)硫酸化修飾可提高青錢(qián)柳多糖的抗氧化活性。使用H2O2建立RAW264.7氧化損傷模型,結(jié)果表明青錢(qián)柳多糖CP及其硫酸化衍生物S-CP1
4、-4可以提高小鼠巨噬細(xì)胞在 H2O2損傷下的存活率,硫酸化修飾可能通過(guò)增加超氧化物歧化酶活性和抑制脂質(zhì)過(guò)氧化來(lái)減少AW264.7細(xì)胞的氧化應(yīng)激反應(yīng)。體外自由基清除活性結(jié)果表明硫酸化青錢(qián)柳多糖具有較高的總還原能力和一定的DPPH自由基清除活性。
(3)硫酸化修飾可提高青錢(qián)柳多糖的抗炎活性。使用 LPS建立小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7炎癥模型,硫酸化青錢(qián)柳多糖可以通過(guò)抑制NO釋放、減弱吞噬活性、抑制促炎因子的釋放起到抑制炎癥反應(yīng)的
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