蒜氨酸降解產(chǎn)物的成分分析和抑菌機(jī)理研究.pdf

1、大蒜是一種重要的藥食兩用植物，具有多種生物活性，現(xiàn)代科學(xué)研究表明蒜氨酸及其類似物是大蒜生物活性功能因子的前體物質(zhì)。本文主要研究了蒜氨酸的酶解和堿熱降解產(chǎn)物的抑菌活性，探討了其抑菌機(jī)理，分析了化合物的組成和結(jié)構(gòu)，并研究了蒜氨酸降解產(chǎn)物抑菌活性的構(gòu)效關(guān)系，目的在于找出蒜氨酸降解產(chǎn)物中的功能因子，為蒜氨酸抑菌制品的開發(fā)提供理論和技術(shù)支持，為大蒜精深加工的開展做出貢獻(xiàn)。具體內(nèi)容如下:
　　在蒜氨酸降解產(chǎn)物的抑菌試驗(yàn)中，蒜氨酸與蒜酶反應(yīng)1m

2、in后加三氯乙酸終止，所得即酶降解產(chǎn)物;蒜氨酸的氫氧化鈉溶液放入高壓滅菌鍋中處理15min，即得堿熱處理產(chǎn)物。利用瓊脂擴(kuò)散法表明，降解產(chǎn)物的抑菌活性隨蒜氨酸濃度增加而變大，蒜氨酸酶降解產(chǎn)物的抑菌活性優(yōu)于堿熱處理產(chǎn)物。酶降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)菌、霉菌、放線菌均有較好的抑菌活性;堿熱處理產(chǎn)物對(duì)細(xì)菌比霉菌作用強(qiáng)烈，對(duì)放線菌無活性。二倍肉湯稀釋法測(cè)得酶降解產(chǎn)物對(duì)大腸桿菌(E.col)的最低抑菌濃度(MIC)為7.81μg·ml-1，堿熱產(chǎn)物的MIC為31

3、2.5μg·ml-1。
　　蒜氨酸降解產(chǎn)物抑菌機(jī)理研究，蒜氨酸酶降解產(chǎn)物和堿熱處理產(chǎn)物的E.col菌液電導(dǎo)率分別增加了11％和10％，紫外分光法測(cè)得大分子紫外吸收物質(zhì)也有所增加，表明降解產(chǎn)物可以改變E.col細(xì)胞膜的通透性，損害細(xì)胞膜的完整性;掃描電子顯微鏡觀察到菌體表面出現(xiàn)坍塌和孔洞，原生質(zhì)外漏;Hochest33342/PI雙染法判斷出降解產(chǎn)物可使細(xì)胞凋亡和壞死;考馬斯亮藍(lán)法測(cè)出菌體內(nèi)蛋白利用率下降了70％，表明降解產(chǎn)物抑制細(xì)

4、菌對(duì)蛋白質(zhì)的利用;菌體對(duì)菌液中磷的吸收結(jié)果看出降解產(chǎn)物阻礙了大腸桿菌對(duì)環(huán)境中磷的吸收，破壞細(xì)胞膜功能結(jié)構(gòu)，干擾核酸合成。
　　蒜氨酸降解產(chǎn)物成分分析方面，采用氣質(zhì)和液質(zhì)技術(shù)對(duì)降解產(chǎn)物進(jìn)行分析。結(jié)果表明，酶降解產(chǎn)物中的二烯丙基二硫化物和二噻烯類物質(zhì)占80％以上;堿熱處理產(chǎn)物中的二烯丙基二硫醚類，占主成分40％左右，其余多為烷烴類、酯類、醇類等。利用半制備HPLC對(duì)蒜氨酸酶降解產(chǎn)物進(jìn)行分離，并采用HPLC-MS-MS對(duì)其進(jìn)行分析，確定