氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶突變體檢測氯霉素.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、　　本課題通過參考當(dāng)前關(guān)于CAT酶的結(jié)構(gòu)和功能研究進展，利用基因工程手段對野生型cat基因進行定點突變，使其蛋白產(chǎn)物催化活性喪失而結(jié)合活性基本不變，并構(gòu)建重組載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌，得到了可高效穩(wěn)定表達的重組菌株。而且由于表達出來的氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶NH2基端帶了可和Ni柱結(jié)合的HisTag序列，簡化了純化工藝，大大降低了成本。最后，對酶的“競爭性ELISA曲線”進行了初步探索，證明突變型氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶應(yīng)用于檢測氯霉素是可行的，同時也為構(gòu)建新

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