vegf對(duì)cd3439;造血干祖細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞分化和功能的影響及其在卵巢癌免疫中的作用和相關(guān)機(jī)制

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文VEGF對(duì)CD34造血干/祖細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞分化和功能的影響及其在卵巢癌免疫中的作用和相關(guān)機(jī)制姓名：葉楓申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)（婦科腫瘤）指導(dǎo)教師：謝幸20050201浙江大學(xué)2 0 0 5 屆博士學(xué)位論文第二部分 卵巢癌細(xì)胞株凍融抗原負(fù)載的樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)C T L 抗卵巢癌免疫應(yīng)答的體外研究目的在第一部分的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究經(jīng)卵巢癌凍融抗原負(fù)載的D C 誘導(dǎo)細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞( C T L ) 體外

2、殺傷卵巢癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性效應(yīng)。方法利用M A C S 分離純化臍血C D 3 4 +細(xì)胞并在體外誘導(dǎo)分化為D C ，用反復(fù)凍融法從卵巢癌細(xì)胞株S K O V 3 中提取的可溶性相關(guān)抗原負(fù)載D C 。流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)負(fù)載抗原后D C 表面各種分化相關(guān)抗原的表達(dá)，E L I S A 法檢測(cè)D C 上清中I L ．1 2 的表達(dá)，M L R 測(cè)定D C 體外刺激T 細(xì)胞增殖的能力，M T T 法檢測(cè)抗原負(fù)載D C 激活的抗原特異性C T L 對(duì)

3、卵巢癌細(xì)胞的殺傷作用。結(jié)果 與未經(jīng)抗原負(fù)載的D C相比，經(jīng)卵巢癌抗原負(fù)載的D C 不僅能更高地表達(dá)各種D C 分化相關(guān)抗原C D l a ( 7 3 ．3 5 ％±29 4 ％v s3 4 ．1 ％±2 ，3 5 ％) 、C D 8 3 ( 7 3 ．9 ％±84 6 ％w ．5 4 ．6 8 ％±3 ．2 6 ％) 、C D 8 0 ( 9 1 ．9 5 ％±2 ．4 8 ％Ⅷ5 2

4、．5 3 ％±3 ．1 8 ％) 、H L A - D R ( 7 0 ．0 5 ％±23 5 ％v s4 8 ．7 ％±2 ．0 7 ％) 以及C D 5 4 ( 8 8 ．9 ％±5 ．5 2 ％v s 7 1 ．4 5 ％±2 ．2 9 ％) ．同時(shí)具有更強(qiáng)的刺激同種異體T 淋巴細(xì)胞增殖和I L ．1 2 分泌的能力( 尸均小于O ．0 5 ) 。此外．卵巢癌細(xì)胞S K O V 3

5、 凍融抗原負(fù)載D C 激活的C T L 在體外對(duì)S K O V 3的殺傷率為7 7 ．3 5 ％，顯著高?。唇?jīng)抗原負(fù)載的D Cc 尸= 0 0 0 0 1 ) 。結(jié)論經(jīng)卵巢癌細(xì)胞凍融抗原負(fù)載D C 激活的C T L 在體外具有更強(qiáng)的增殖能力和殺傷卵巢癌細(xì)胞的作用?！娟P(guān)鍵詞】樹突狀細(xì)胞；卵巢癌；凍融抗原；細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞第三部分 V E G F 及卵巢癌細(xì)胞培養(yǎng)上清對(duì)C D 3 4 + 干，祖細(xì)胞來源的樹突狀細(xì)胞分化及功能的影響目的

6、探討V E G F 和卵巢癌細(xì)胞上清對(duì)臍血C D 3 4 + 干勝日細(xì)胞來源的D C 分化和功能的影響。方法E L I S A 法測(cè)定3 種卵巢癌細(xì)胞株( S K O V 3 ，C a o v 3 ，3 a o ) 培養(yǎng)上清中V E G F 的表達(dá)；利用M A C S 分離純化臍血C D 3 4 + 造血干／祖細(xì)胞并在體外將其誘導(dǎo)擴(kuò)增為D C ，觀察V E G F 、卵巢癌細(xì)胞上清在培養(yǎng)早期和晚期對(duì)D C 分化和功能的影響：用V E G