三疣梭子蟹養(yǎng)殖塘水體可培養(yǎng)微生物多樣性的研究.pdf

1、可培養(yǎng)微生物在養(yǎng)殖池塘的物質(zhì)循環(huán)、能量流動(dòng)、生態(tài)平衡及環(huán)境凈化等方面起著十分重要的作用，與蟹病的發(fā)生與防治密切相關(guān)。本文將傳統(tǒng)分離培養(yǎng)方法與聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、變性梯度凝膠電泳(DGGE)和核酸序列測(cè)定等現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合，對(duì)三疣梭子蟹進(jìn)水塘和養(yǎng)殖塘環(huán)境中的可培養(yǎng)微生物多樣性進(jìn)行了研究。本實(shí)驗(yàn)研究?jī)?nèi)容主要包括三部分：第一部分基于形態(tài)結(jié)構(gòu)特征上的可培養(yǎng)微生物分群研究。10月份在三疣梭子蟹養(yǎng)殖池塘水體中分離240株細(xì)菌，根據(jù)菌落特

2、征分成15個(gè)類群，其中有3個(gè)優(yōu)勢(shì)類群，5個(gè)較豐富類群和7個(gè)稀有類群。再依據(jù)菌體特征分為31個(gè)亞群，其中球桿狀亞群是最優(yōu)勢(shì)亞群；結(jié)果表明進(jìn)水塘和養(yǎng)殖塘的優(yōu)勢(shì)類群和亞群組成存在差別，當(dāng)進(jìn)水塘水體進(jìn)入養(yǎng)殖塘后，其優(yōu)勢(shì)菌菌群和亞群都發(fā)生了顯著改變；第二部分為可培養(yǎng)微生物遺傳多樣性的研究。建立實(shí)驗(yàn)分離到得可培養(yǎng)微生物的DGGE指紋數(shù)據(jù)庫(kù),同時(shí)測(cè)定了相應(yīng)的16S rDNA序列并分析了它們的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)地位。結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)分離到得可培養(yǎng)微生物分為73個(gè)系

3、統(tǒng)發(fā)育型，分布于細(xì)菌域中的3個(gè)門(mén)7個(gè)綱16個(gè)科中的大約20個(gè)屬。涵蓋菌株數(shù)最多的4個(gè)屬為：Bacillus屬、Vibrio屬、Halobacillus屬、Stenotrophomonas屬。通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)進(jìn)水塘和養(yǎng)殖塘的優(yōu)勢(shì)菌種發(fā)生變化，并且進(jìn)水塘的菌種多樣性多于養(yǎng)殖塘。第三部分為養(yǎng)殖水體功能微生物菌群的研究。對(duì)上述菌株進(jìn)行了轉(zhuǎn)化氮、磷、硫元素化合物生態(tài)功能試驗(yàn)和酪蛋白酶，膠原蛋白酶，卵磷脂酶的生理生化實(shí)驗(yàn)。對(duì)它們?cè)陴B(yǎng)殖環(huán)境內(nèi)源污染中的作