三疣梭子蟹養(yǎng)殖塘弧菌群落結(jié)構(gòu)研究【開題報(bào)告】

1、<p><b>　　畢業(yè)論文開題報(bào)告</b></p><p><b>　　海洋生物資源與環(huán)境</b></p><p>　　三疣梭子蟹養(yǎng)殖塘弧菌群落結(jié)構(gòu)研究</p><p>　　一、選題的背景與意義</p><p>　　三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）是我國(guó)海產(chǎn)

2、經(jīng)濟(jì)蟹類，其肉質(zhì)鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富、經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，在國(guó)內(nèi)外享有盛名。近年來，由于養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴(kuò)大、養(yǎng)殖密度不斷提高、養(yǎng)殖環(huán)境的污染等損害了三疣梭子蟹免疫防御系統(tǒng)，導(dǎo)致自身的抗病力下降，對(duì)病害的易感性增加，疾病頻繁發(fā)生，例如近幾年由弧菌引起的“乳化病”給三疣梭子蟹養(yǎng)殖業(yè)帶來了重大經(jīng)濟(jì)損失（陳萍等，2009）。</p><p>　　目前，有關(guān)“乳化病”的病原鑒定、病理和組織生理變化的研究國(guó)內(nèi)已有不少報(bào)道(劉淇等2007；

3、王國(guó)良等2006，施慧等2005；許文軍等2003)，但目前對(duì)于疾病爆發(fā)與水體環(huán)境微生物群落的關(guān)系研究較少，倪純治等（1995）有研究過弧菌數(shù)量與蝦病的關(guān)系?；【c疾病爆發(fā)的關(guān)系一般認(rèn)為是由于水體中某特定種類的弧菌大量繁殖而引發(fā)疾病，水產(chǎn)品的弧菌檢測(cè)也多是針對(duì)某特定弧菌而建立的，因而，養(yǎng)殖水體的弧菌數(shù)量常常被看做疾病爆發(fā)的重要征兆之一，但是，弧菌種類繁多，致病性菌株只占一小部分，大部分是非致病菌，因此，相較于弧菌數(shù)量，弧菌群落的結(jié)構(gòu)組成

4、可能與疾病爆發(fā)更為相關(guān)。</p><p>　　二、研究的基本內(nèi)容與擬解決的主要問題：</p><p>　　我們擬選取兩個(gè)代表性的三疣梭子蟹養(yǎng)殖塘，其中一個(gè)塘中梭子蟹發(fā)生類似“牛奶病”的疾病，其典型癥狀為三疣梭子蟹沿岸爬上，活動(dòng)力差呼吸困難、行動(dòng)遲緩，打開蟹蓋，蓋內(nèi)可見大量乳白色液體，發(fā)病蟹死亡率為100%，造成梭子蟹連續(xù)不斷死亡，稱為病害塘，另一個(gè)塘，沒有明顯的梭子蟹死亡跡象，稱為健康塘。

5、然后基于細(xì)菌計(jì)數(shù)、菌落特征和16S rDNA基因序列比對(duì)對(duì)這兩個(gè)三疣梭子蟹養(yǎng)殖塘的養(yǎng)殖水體中的弧菌群落組成進(jìn)行比較研究，以期揭示養(yǎng)殖塘弧菌群落結(jié)構(gòu)變化與三疣梭子蟹疾病發(fā)生的關(guān)系。</p><p>　　三、研究的方法與技術(shù)路線：</p><p>　　研究方法：先進(jìn)行一些簡(jiǎn)單的預(yù)實(shí)驗(yàn)，了解基本情況，然后設(shè)計(jì)好實(shí)驗(yàn)方案。之后采集樣品，涂布計(jì)數(shù)，分離純化保種，菌落觀察，然后提DNA，做DGGE，挑

6、選出條帶不同的菌株，做PCR，測(cè)序，鑒定弧菌的分類地位，最后分析數(shù)據(jù)，撰寫論文。</p><p><b>　　技術(shù)路線：</b></p><p>　　四、研究的總體安排與進(jìn)度：</p><p><b>　　總體安排：</b></p><p>　　1．2010年6月及之前，進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，熟悉各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)操作

7、方法，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案</p><p>　　2．2010年7-9月，完成實(shí)驗(yàn)過程，得到實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，做好總結(jié)</p><p>　　3．2010年12月，開題報(bào)告</p><p>　　4．2011年2-4月，分析數(shù)據(jù)，撰寫論文</p><p>　　5．2011年5月，論文答辯</p><p>　　進(jìn)度：因?yàn)橐佳?，所以畢業(yè)論文的

8、實(shí)驗(yàn)完成得較早，在2009年暑期就已經(jīng)完成實(shí)驗(yàn)，得到了數(shù)據(jù)，且做好了總結(jié)。明年開學(xué)后就開始分析數(shù)據(jù)，撰寫論文。</p><p><b>　　五、主要參考文獻(xiàn)：</b></p><p>　　[1] 閆茂倉(cāng),陳少波,單樂州,等.海水養(yǎng)殖動(dòng)物致病弧菌的研究進(jìn)展.水產(chǎn)科學(xué),2009,28(8):475-481</p><p>　　[2] 王國(guó)良，金珊，

9、陳寅兒等. 三疣梭子蟹肌肉乳化病的病原及其致病性研究.海洋研究進(jìn)展,2006,24(4):526-531</p><p>　　[3] 倪純治,林燕順,葉德贊,等.海水養(yǎng)蝦池的幾種致病弧菌生態(tài).臺(tái)灣海峽,1995,14(1):73-79</p><p>　　[4] 國(guó)家海洋局. 海洋調(diào)查規(guī)范[M]. 北京:海洋出版社, 1975.</p><p>　　[5] 金珊,

10、王國(guó)良, 薛良義等. 海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖水域異養(yǎng)細(xì)菌和弧菌的數(shù)量動(dòng)態(tài)[J]. 海洋漁業(yè), 1999, 21(4): 154-156.</p><p>　　[6] 張德民,黃志勇等.紫色非硫細(xì)菌Rhodocista屬一新分離株的鑒定及其系統(tǒng)學(xué)研究.微生物學(xué)報(bào),2000,4(1): 14-20</p><p>　　[7] 溫 丹, 張德民, 初航. 網(wǎng)箱養(yǎng)殖海區(qū)底泥產(chǎn)芽孢細(xì)菌多樣性[J]. 海洋與湖

11、沼, 2009, 40(5): 615-621. </p><p>　　[8] 錢麗君，張德民，徐小紅等.應(yīng)用DGGE分析三疣梭子蟹養(yǎng)殖塘底泥細(xì)菌的多樣性.水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2007，31（2）：204-210</p><p>　　[9] 王保坤, 余俊紅,李筠,等.花鱸弧菌病病原菌(哈維氏弧菌)的分離與鑒定.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2002,9(1):52-55</p><p>