實驗常用培養(yǎng)基及基本特性

1、常用常用培養(yǎng)基培養(yǎng)基及基本特性及基本特性1、RPMI1640MediumRPMI1640廣泛應(yīng)用于哺乳動物、特殊造血細(xì)胞、正?；驉盒栽錾陌准?xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，是目前應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基。主要用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。其它像K562、HL60、Jurkat、Daudi、IM9等成淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT15上皮細(xì)胞等均可參考使用。2、MinimumEssentialMedium（MEM）也稱最低必需培養(yǎng)基，它僅

2、含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素。成分簡單，可廣泛適應(yīng)各種已建成細(xì)胞系和不同地方的哺乳動物細(xì)胞類型的培養(yǎng)。MEMAlpha一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細(xì)胞類型一般用于培養(yǎng)一些難培養(yǎng)細(xì)胞類型，而其它沒有特殊之處的細(xì)胞株則幾乎均可采用MEM來培養(yǎng)。3、DMEM高糖高糖（標(biāo)準(zhǔn)型）是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)更適合高密度懸浮更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)。適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養(yǎng)，也

3、可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。4、DMEM低糖低糖（標(biāo)準(zhǔn)型）是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。5、DMEMF12DMEMF12培養(yǎng)基適于克隆密度的培養(yǎng)。F12培養(yǎng)基成分復(fù)雜，含有多種微量元素，和DMEM以1：1結(jié)合，稱為DMEMF12培養(yǎng)基（DMEF12medium），作為開發(fā)無血清配方的基礎(chǔ)，以利用F12含有較豐富

4、的成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點。該培養(yǎng)基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。為了增強該培養(yǎng)基的緩沖能力，改良之一是在DMEMF12（1：1）中加入15mMHEPES緩沖液。6、McCoy’s5AMcCoy’s5AMedium主要為肉瘤細(xì)胞的培養(yǎng)所設(shè)計，可支持多種（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細(xì)胞培養(yǎng)外，主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些一些淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長支

5、持。如何正確選擇細(xì)胞培養(yǎng)基如何正確選擇細(xì)胞培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)是實驗室里最常見和最基本的實驗了，但卻不是最簡單的。別小看細(xì)胞培養(yǎng)，這里可蘊含著大學(xué)問。有時候細(xì)胞狀態(tài)不好，轉(zhuǎn)染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Invitrogen(GIBCO)、thermofisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEMF12都是應(yīng)

6、用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。◆MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的，其中增加了組分的范圍及濃度?！鬌ulbecco改良的BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mgL，后來為了某些細(xì)胞的生長

7、需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mgL，這就是大家常說的低糖和高糖了?！鬭MEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型，包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞?！鬑am’sF12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)。F12還可以與還可以與DMEM等體積混合使用，等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培得到一種高濃度