微生物實驗問題與答案

1、微生物實驗問題與答案微生物實驗問題與答案一、光學(xué)顯微鏡的操作及細菌、放線菌個體形態(tài)的觀察一、光學(xué)顯微鏡的操作及細菌、放線菌個體形態(tài)的觀察1、為什么油鏡的放大倍數(shù)比普通物鏡大？答：油鏡能減少光的折射，進而提高視野的亮度；通過提高顯微鏡的數(shù)值口徑增加顯微鏡的分辨力。2、數(shù)值口徑的表達公式？答案：N.A=nsinα，n為介質(zhì)折射率；α為光線最大入射角的半數(shù)。3、顯微鏡數(shù)值口徑與分辨力的關(guān)系？答案：分辨力是指顯微鏡能辨別兩點之間最小距離的能力，

2、它與光的波長成反比，與數(shù)值口徑成正比。4、油鏡的使用與普通物鏡有何不同？答案：油鏡必須借助于光折射率等于或接近于玻璃的試劑，如香柏油等才能使用，而普通物鏡則不需要；油鏡是由100物鏡與香柏油構(gòu)成，而普通物鏡則限于10物鏡、40物鏡等。5、使用油鏡時應(yīng)特別注意什么？答案：上下調(diào)節(jié)鏡頭時應(yīng)使用微螺旋，否則容易損壞鏡頭；應(yīng)使油鏡始終浸泡在香柏油中，否則就不是油鏡；使用完畢后，必須用搽鏡紙沾取二甲苯等有機溶劑搽去殘留的油跡，否則會玷污油鏡。6、

3、什么是物鏡的同焦現(xiàn)象？它在顯微鏡觀察中有什么意義？答：在一般情況下，當(dāng)物像在一種物鏡中已清晰聚焦后，轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器將其他物鏡轉(zhuǎn)到工作位置進行觀察時，物像將保持基本準(zhǔn)焦的狀態(tài)，這種現(xiàn)象稱為物鏡的同焦。利用這種同焦現(xiàn)象，可以保證在使用高倍鏡或油鏡等放大倍數(shù)高、工作距離短的物鏡時僅用細調(diào)節(jié)器即可對物像清晰聚焦，從而避免由于使用粗調(diào)節(jié)器時可能的誤操作而損壞鏡頭或載玻片。7、根據(jù)你的實驗體會談?wù)剳?yīng)如何根據(jù)所觀察微生物的大小選擇不同的物鏡進行有效地

4、觀察答：細菌用油鏡，真菌用高倍鏡。都是先用低倍鏡找到目標(biāo)后，再用高倍鏡調(diào)到合適的視野和合適的清晰度。答：放線菌、酵母菌、多細胞真菌相對較大，用放大40倍的物鏡就可以看了，細菌小，要答案：將革蘭氏陽性細菌—葡萄球菌與革蘭氏陰性細菌大腸桿菌制成混合涂片，經(jīng)革蘭氏染色后，如果葡萄球菌呈紫色，而大腸桿菌呈紅色，則說明染色操作是正確的。11、固定的目的之一是殺死菌體，這與自然死亡的菌體有何不同？自然死亡的菌體本身已經(jīng)部分自溶，結(jié)構(gòu)已經(jīng)改變。固定殺

5、死細菌時細菌結(jié)構(gòu)是保持死亡時的狀態(tài)的。12、不經(jīng)復(fù)染這一步能否區(qū)分革蘭氏陽性菌和陰性菌？能。在酒精脫色后，不被酒精脫色而保留紫色者為革蘭氏陽性菌（G＋），被酒精脫色為革蘭氏陰性菌。最后一步用番紅染液復(fù)染，是為了讓結(jié)果更清楚。三、無菌操作（補充）三、無菌操作（補充）1、無菌操作過程中，為什么試管或三角燒瓶在開塞或回塞之前，口部要過火幾次？答案：這樣可以燒去管口或瓶口的微生物。2、開塞后的試管或三角燒瓶口部微生物要平放？答案：如果口部向上或

6、朝下，則容易通過空氣對流污染培養(yǎng)物。3、接種針接種前后微什么要過火焚燒？答案：主要防止微生物培養(yǎng)物之間交叉污染，也防止污染操作臺面。4、.試述高壓蒸汽滅菌的操作方法和原理。答：高壓滅菌的原理是：在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細菌及其高度耐熱的芽孢。操作方法：加水——裝料、加蓋——排氣——升壓、保壓、

7、和降壓——取料5、如何確定平板上某單個菌落是否為純培養(yǎng)？請寫出實驗的主要步驟。答：通過觀察菌落特征；單個菌落再次劃線分離。6、為什么干熱滅菌比濕熱滅菌所需溫度高時間長？在濕熱條件下，有水蒸汽的作用：a高溫水蒸汽導(dǎo)熱比干空氣要快；b高溫水蒸汽冷凝變水時有放熱過程；c高溫水蒸汽能穿透細菌的細胞膜，直接進入細胞內(nèi)破壞細胞；c高溫水蒸汽能水解一部分細胞結(jié)構(gòu)，加速導(dǎo)熱。（濕熱中細菌菌體吸收水分，蛋白質(zhì)較易凝固，因蛋白質(zhì)含水量增加，所需凝固溫度降低