武漢大學(xué)-微生物實(shí)驗(yàn)大綱

1、三.教學(xué)學(xué)時(shí)分配與安排本課程講授按每周4學(xué)時(shí)安排，全學(xué)期共16周。實(shí)驗(yàn)一：1.本學(xué)期教學(xué)計(jì)劃安排及要求；2.環(huán)境微生物的檢測(cè)；3.滅菌器皿的準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)二：1.微生物菌落形態(tài)的觀察；2.細(xì)菌簡(jiǎn)單染色及個(gè)體形態(tài)的觀察實(shí)驗(yàn)三：1.酸奶的制作；2.革蘭氏染色(革蘭氏陽性菌、陰性菌)實(shí)驗(yàn)四：培養(yǎng)基的配制實(shí)驗(yàn)五：神農(nóng)架自然保護(hù)區(qū)土壤樣品中微生物的分離與純化實(shí)驗(yàn)六：1.放線菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)（試管法）；2.霉菌形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察(壓片法等)實(shí)驗(yàn)七：1.酵母菌死活

2、染色及形態(tài)觀察；2.細(xì)菌的鞭毛染色與運(yùn)動(dòng)性觀察實(shí)驗(yàn)八：1.平板計(jì)數(shù)法；2.光電計(jì)數(shù)法；3.直接計(jì)數(shù)法(顯微鏡)實(shí)驗(yàn)九：1.大分子物質(zhì)的水解試驗(yàn)；2.糖發(fā)酵試驗(yàn)；3.IMViC試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十：1.化學(xué)因素；2.生物因素；3.物理因素實(shí)驗(yàn)十一十二：1.東湖水體中微生物的檢測(cè)；2.純凈水中微生物的檢測(cè)；3.自來水中微生物的檢測(cè)；4.酸奶中細(xì)菌的檢查實(shí)驗(yàn)十三：DNA轉(zhuǎn)化(固體轉(zhuǎn)化法)實(shí)驗(yàn)十四：Ames試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)十五：1.實(shí)驗(yàn)問題解答；2.本學(xué)期教學(xué)總

3、結(jié)實(shí)驗(yàn)十六：期末考試四教學(xué)內(nèi)容和要求實(shí)驗(yàn)一[目的要求]1.證明實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與體表存在微生物。2.比較來自不同場(chǎng)所與不同條件下細(xì)菌的數(shù)量和類型。3.觀察不同類群微生物的菌落形態(tài)特征。4.體會(huì)無菌操作的重要性。[實(shí)驗(yàn)原理]平板培養(yǎng)基含有細(xì)菌生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)成分，當(dāng)取自不同來源的樣品接種于培養(yǎng)基上，在合宜溫度下培養(yǎng)，12天內(nèi)每一菌體即能通過很多次細(xì)胞分裂而進(jìn)行繁殖，形成一個(gè)可見的細(xì)胞群體的集落，稱為菌落。每一種細(xì)菌所形成的菌落都有它自己的特點(diǎn)，

4、例如菌落的大小，表面干燥或濕潤(rùn)、隆起或扁平、粗糙或光滑，邊緣整齊或不整齊，菌落透明或半透明或不透明，顏色以及質(zhì)地疏松或緊密等。因此，可通過平板培養(yǎng)來檢查環(huán)境中細(xì)菌的數(shù)量和類型。[教學(xué)內(nèi)容]實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和人體表面微生物的檢查實(shí)驗(yàn)二[目的要求]1.明確培養(yǎng)基的配制原理。2.通過對(duì)基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配制，掌握配制培養(yǎng)基的一般方法和步驟。[實(shí)驗(yàn)原理]牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時(shí)又稱為普通培養(yǎng)基，由于這種生蒸汽。從而使

5、沸點(diǎn)增高，得到高于100℃的溫度。導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。[教學(xué)內(nèi)容]高壓蒸汽滅菌實(shí)驗(yàn)七[目的要求]了解紫外線滅菌的原理和方法[實(shí)驗(yàn)原理]紫外線滅菌是用紫外線燈進(jìn)行的。波長(zhǎng)為200300nm的紫外線都有殺菌能力，其中以260nm的殺菌力最強(qiáng)。在波長(zhǎng)一定的條件下，紫外線的殺菌效率與強(qiáng)度和時(shí)間的乘積成正比。紫外線殺菌機(jī)制主要是因?yàn)樗T導(dǎo)了胸腺嘧啶二聚體的形成和DNA鏈的交聯(lián)，從而抑制了DNA的復(fù)制。另一方面，由于輻射能使空氣

6、中的氧電離成［O］，再使O2氧化生成自臭氧(O3)或使水(H2O)氧化生成過氧化氫(H2O2)。O3和H2O2均有殺菌作用。[教學(xué)內(nèi)容]紫外線滅菌實(shí)驗(yàn)八[目的要求]了解過濾除菌的原理；掌握微孔濾膜過濾除菌的方法。[實(shí)驗(yàn)原理]過濾除菌是通過機(jī)械作用濾去液體或氣體中細(xì)菌的方法。根據(jù)不同的需要選用不同的濾器和濾板材料。此法除菌的最大優(yōu)點(diǎn)是可以不破壞溶液中各種物質(zhì)的化學(xué)成分，但由于濾量有限，所以一般只適用于實(shí)驗(yàn)室中小量溶液的過濾除菌。[教學(xué)內(nèi)容

7、]微孔濾膜過濾除菌實(shí)驗(yàn)九[目的要求]掌握倒平板的方法和幾種常用的分離純化微生物的基本操作技術(shù)。[實(shí)驗(yàn)原理]從混雜的微生物群體中獲得只含有某一種或某一株微生物的過程稱為微生物的分離與純化。常用的方法有：1).簡(jiǎn)易單細(xì)胞挑取法2).平板分離法。土壤是微生物生活的大本營(yíng)，它所含微生物無論是數(shù)量還是種類都是極其豐富的。因此土壤是微生物多樣性的重要場(chǎng)所，是發(fā)掘微生物資源的重要基地，可以從中分離、純化得到許多有價(jià)值的菌株。[教學(xué)內(nèi)容]微生物的分離與