版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、1.什么是細(xì)胞工程細(xì)胞工程按照一定的設(shè)計(jì)方案,通過在細(xì)胞、亞細(xì)胞或組織水平上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,獲得重構(gòu)的細(xì)胞、組織、器官以及個(gè)體,創(chuàng)造優(yōu)良品種和產(chǎn)品的綜合性生物工程。細(xì)胞工程所涉及的范圍很廣,按生物類型可以分為動(dòng)物細(xì)胞工程、植物細(xì)胞工程和微生物細(xì)胞工程,按實(shí)驗(yàn)操作對(duì)象可以分為細(xì)胞與組織培養(yǎng)、動(dòng)物融合、細(xì)胞核移植、染色體操作、轉(zhuǎn)基因生物等。以細(xì)胞工程為基礎(chǔ),發(fā)展派生出了不少以工程冠名的新領(lǐng)域,如組織工程、胚胎工程、染色體工程等。2.什么是消毒
2、disinfection是指殺滅或去除外環(huán)境中媒介物攜帶的病源微生物的過程。3.什么是干細(xì)胞stemcell干細(xì)胞是指具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。4.什么是細(xì)胞融合cellfusion又稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞融合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。5.什么是細(xì)胞培養(yǎng)cellculture是指生物細(xì)胞在離體條件下的生長和增殖,細(xì)胞的離體培養(yǎng)稱為細(xì)胞培養(yǎng)。6.基因治療genetherapy指將外源功能性目的基因?qū)牖颊唧w內(nèi),通過調(diào)控目的基因
3、表達(dá),抑制、替代或補(bǔ)償缺陷基因,從而恢復(fù)受累細(xì)胞、組織或器官的生理功能,達(dá)到疾病治療目的。7.轉(zhuǎn)基因動(dòng)物transgenicanimal借助基因工程技術(shù)將外源基因?qū)胧荏w動(dòng)物染色體內(nèi),外源基因與動(dòng)物基因整合后歲細(xì)胞的分裂而擴(kuò)增,在體內(nèi)表達(dá)并能穩(wěn)定的遺傳給后代的動(dòng)物。8.ES細(xì)胞embryonicstemcell當(dāng)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞分離出來進(jìn)行培養(yǎng),在一定條件下這些細(xì)胞可在體外“無限期”地增殖傳代,同時(shí)還保持其全能性。這種干細(xì)胞稱為胚胎干細(xì)胞即
4、ES細(xì)胞。他是一種高度未分化細(xì)胞,具有發(fā)育的全能性,能分化出成體動(dòng)物的所有組織和器官,包括生殖細(xì)胞。9.什么是克隆clone克隆是指生物體通過體細(xì)胞進(jìn)行的無性繁殖,以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的后代個(gè)體組成的種群。10.什么是染色體Chromosome染色體是細(xì)胞內(nèi)具有遺傳性質(zhì)的物體易被堿性染料染成深色所以叫染色體(染色質(zhì))其本質(zhì)是脫氧核甘酸.11.什么是細(xì)胞污染cellcontamination在細(xì)胞培養(yǎng)中,凡是與培養(yǎng)無關(guān)的雜質(zhì)
5、的混入培養(yǎng)系統(tǒng)稱為污染二、簡答題1.重組DNA技術(shù)的一般步驟(1)目的基因的獲取目前,獲取目的基因的方法主要有三種:反向轉(zhuǎn)錄法、從細(xì)胞基因組直接分離法和人工合成法。(2)DNA分子的體外重組體外重組是把載體與目的基因進(jìn)行連接。數(shù)法(3)比濁法。2活菌計(jì)數(shù)法(平板菌落記數(shù)法):是通過測(cè)定樣品在培養(yǎng)基上形成的菌落數(shù)來間接確定其活菌數(shù)的方法故又稱平板計(jì)數(shù)法(1)涂布平板法(2)倒平板法3濾膜過濾法:樣品同過微孔濾膜后,細(xì)菌收集在濾膜上,然后將
6、濾膜放在培養(yǎng)基中培養(yǎng),通過菌落計(jì)數(shù)求出樣品活菌落。(2)微生物生長量和生理指標(biāo)的測(cè)定方法測(cè)定微生物生長量及相關(guān)的生理指標(biāo),常用以下方法:1濕重法2干重法(3)測(cè)定含氮量(2)測(cè)定DNA(3)其他生理指標(biāo):如測(cè)定碳、磷、RNA、ATP、DAP(二氨基庚二酸)的含量等。4、細(xì)胞培養(yǎng)中消毒的原則是什么體外培養(yǎng)細(xì)胞缺乏抗感染能力,所以防止污染是決定培養(yǎng)成功或失敗的首要條件。1.培養(yǎng)前準(zhǔn)備根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,將所需器具和材料準(zhǔn)備好,以合適的方法進(jìn)行消毒
7、和滅菌。2.操作室消毒無菌培養(yǎng)室每天都要用1‰的新潔爾滅拖洗地面―次(拖布要專用).紫外線照射消毒3050min,超凈工作臺(tái)臺(tái)面每次實(shí)驗(yàn)前要用75%酒精擦洗。然后紫外線淌毒30min。在工作臺(tái)面消毒時(shí)切勿將培養(yǎng)細(xì)胞和培養(yǎng)用液同時(shí)照射紫外線,消毒時(shí)工作臺(tái)面上用品不要過多或重疊放置,―些操作用具如移液器、廢液缸、污物盒、試管架等用75%酒精擦洗后置于臺(tái)內(nèi)同時(shí)紫外線消毒。3.洗手和著裝平時(shí)僅做觀察不做培養(yǎng)操作時(shí),可穿裝細(xì)胞培養(yǎng)室內(nèi)紫外線照射3
8、0min的清潔工作服。在利用超凈臺(tái)工作時(shí),前臂要伸入箱內(nèi),應(yīng)著長袖的清潔工作服,操作前要用75%酒精消毒手。出入培養(yǎng)室都要重新用消毒液洗手。進(jìn)入原代培養(yǎng)室需徹底洗手還要戴口罩、著消毒衣帽。4.無菌培養(yǎng)操作在無菌環(huán)境進(jìn)行培養(yǎng)或做其它無菌工作時(shí),首先要點(diǎn)燃酒精燈或煤氣燈。以后一切操作都需在火焰近處并經(jīng)過燒灼進(jìn)行。金屬器械不能在為焰中燒的時(shí)間過長,以防退火,燒過的金屬鑷要待冷卻后才能挾取組織,以免造成組織損傷。吸取過營養(yǎng)液后的吸管不能再用火焰
9、燒灼,再用時(shí)會(huì)把有害物帶入營養(yǎng)液中。開啟、關(guān)閉長有細(xì)胞的培養(yǎng)瓶時(shí),火焰滅菌時(shí)間要短。防止因溫度過高燒死細(xì)胞。另外膠塞過火焰時(shí)也不能時(shí)間長,以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體,危害培養(yǎng)細(xì)胞。進(jìn)行培養(yǎng)時(shí),動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷,但又不必太快,以防空氣流動(dòng),增加污染機(jī)會(huì)。不能用手觸及已消毒器皿,如已接觸,要用火焰燒灼消毒或取備品更換。原則上應(yīng)是右手使用的東西放置在右側(cè),左手用品在左側(cè),酒精燈置于中央。組織或細(xì)胞在未做處理之前,勿過早暴露在空氣中。同樣,培養(yǎng)液在未用
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論