動物細胞培養(yǎng)和核移植技術

1、班級班級姓名姓名高二生物習題內(nèi)容：專題二專題二第二節(jié)第二節(jié)動物細胞培養(yǎng)和核移植技術動物細胞培養(yǎng)和核移植技術編審人：總第頁細節(jié)決定成敗細節(jié)決定成敗生物導學案專題二專題二第二節(jié)第二節(jié)動物細胞培養(yǎng)和核移植技術動物細胞培養(yǎng)和核移植技術課題：動物細胞工程課型：新授主講人：李大偉使用時間：2010.3.20【考綱要求考綱要求】動物細胞培養(yǎng)I動物細胞核移植I【學習目標學習目標】簡述動物細胞培養(yǎng)的過程、條件及應用。簡述通過動物體細胞核移植技術克隆動物的

2、過程和應用前景【預習導航預習導航】動物細胞工程常用的技術手段有、、、等，其中是其他動物細胞工程技術的基礎。一、動物細胞培養(yǎng)一、動物細胞培養(yǎng)1、動物細胞培養(yǎng)的概念、動物細胞培養(yǎng)的概念（1）動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織，它分散成______________，后放在______________中，讓這些細胞_________和__________。（2）動物細胞培養(yǎng)的原理是：_________________。2、動物細胞培養(yǎng)的

3、過程、動物細胞培養(yǎng)的過程3、動物細胞培養(yǎng)的條件、動物細胞培養(yǎng)的條件①無菌、無毒的環(huán)境具體措施為對進行無菌處理；在培養(yǎng)液中添加一定量的，以防培養(yǎng)過程中的；定期更換，以便清除，防止細胞代謝產(chǎn)物。②營養(yǎng)合成培養(yǎng)基中要含有、、、、等。此外通常需加入、等，因為。③溫度和PH。哺乳動物的培養(yǎng)溫度多以為宜。多數(shù)細胞生存的適宜PH為。④氣體環(huán)境。所需氣體主要有O2和CO2，O2是所必需的，CO2的主要作用是。通常將培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶置于含空氣加CO2的混合

4、氣體的中進行培養(yǎng)。4、動物細胞培養(yǎng)技術的應用、動物細胞培養(yǎng)技術的應用①生產(chǎn)生物制品：疫苗、干擾素、等；②作為基因工程中的受體細胞；③檢測及毒性；④科研方面：篩選抗癌藥物、治療和預防疾病等。二、動物體細胞核移植技術和克隆動物二、動物體細胞核移植技術和克隆動物1、動物核移植、動物核移植（1）概念：）概念：動物核移植是將動物的一個細胞的_______移入一個_________________卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新的_______。

5、這個新的______最終發(fā)育為動物個體。核移植移到的動物稱__________。（2）分類：）分類：動物核移植可以分為______________和_________________。_____________難度更高。（3）原理）原理：____________________。2、體細胞核移植的過程、體細胞核移植的過程3、體細胞核移植技術的應用前景、體細胞核移植技術的應用前景①在畜牧業(yè)中，加速優(yōu)良種畜改良進程；②保護；③作為生物反應器

6、；④轉(zhuǎn)基因克隆動物作為異種移植；⑤人核移植胚胎干細胞誘導分化后提供組織、器官用于；⑥研究胚胎發(fā)育及衰老過程；⑦做疾病模型。4、體細胞核移植技術存在的問題、體細胞核移植技術存在的問題①成功率非常低；②絕大多數(shù)克隆動物存在健康問題，表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷；③對克隆動物食品的安全性問題存有爭議等。()酶或()酶剪碎加培養(yǎng)液制成供體細胞（供核）供體細胞（供核）細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)卵巢卵母細胞（卵巢卵母細胞（MⅡ中期：供質(zhì)）中期：供質(zhì)）去核去核注入注入

7、重組重組細胞細胞構建重組胚胎構建重組胚胎代孕母牛代孕母牛生出與供體奶牛生出與供體奶牛遺傳遺傳物質(zhì)基本相同物質(zhì)基本相同的個體的個體班級班級姓名姓名高二生物習題內(nèi)容：專題二專題二第二節(jié)第二節(jié)動物細胞培養(yǎng)和核移植技術動物細胞培養(yǎng)和核移植技術編審人：總第頁細節(jié)決定成敗細節(jié)決定成敗【知識鏈接知識鏈接】細胞株與細胞系細胞株與細胞系①細胞株：原代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右，細胞的生長就會出現(xiàn)停滯，大部分細胞衰老死亡。但是極少數(shù)的細胞能夠度過“危機”

8、而繼續(xù)傳下去，這些存活的細胞一般能傳代40～50代，這種傳代細胞叫做細胞株。細胞株的細胞的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。②細胞系：當細胞株傳至50代以后不能再傳下去。但是有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，并帶有癌變的特點，從而有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳下去，這種傳代細胞叫做細胞系?！菊n堂鞏固課堂鞏固】1為了使用于培養(yǎng)的動物組織細胞分散開以便配制成一定濃度的細胞懸浮液，選取來的動物組織應選用下列哪種物質(zhì)處理（

9、）A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.鹽酸D.胰脂肪酶2一般來說，動物細胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件()①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③合成培養(yǎng)基需加血漿④溫度與動物體溫相近⑤需要O2，不需要CO2⑥CO2能調(diào)節(jié)培養(yǎng)液pHA①②③④⑤⑥B①②③④C①③④⑤⑥D(zhuǎn)①②③④⑥3下列關于體細胞克隆的敘述中，錯誤的是（）A.供體為體細胞的細胞核B.受體為去核卵細胞的細胞質(zhì)C.克隆出的后代與供體的遺傳物質(zhì)和表現(xiàn)型完全一致D.細胞核移植是體細胞克隆的關鍵4某研究小組

10、進行藥物試驗時，以動物肝細胞為材料，測定藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性。供培養(yǎng)的細胞有甲、乙兩種，甲細胞為肝腫瘤細胞，乙細胞為正常肝細胞。請回答下列有關動物細胞培養(yǎng)的問題：（1）將數(shù)量相等的甲細胞和乙細胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一段時間后，觀察到甲細胞數(shù)量比乙細胞數(shù)量___________________。（2）在動物細胞培養(yǎng)時，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是________________________

11、___________________________________________________。細胞培養(yǎng)應在含5％CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO2的作用是____________________________________________________________________。（3）在兩種細胞生長過程中，當乙細胞鋪滿瓶壁時，其生長_______________。藥物試驗需要大量細胞，若用動物的肝臟組織塊制備肝細胞懸

12、液，需用_______________處理。（4）為了防止細胞培養(yǎng)過程中細菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的_______________。（1）多（2）血清可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)維持培養(yǎng)液的pH（3）停止胰蛋白酶（4）抗生素【請梳理本節(jié)知識請梳理本節(jié)知識】11.如圖是動物細胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請根據(jù)圖回答:(1)容器A中放置的是動物器官或組織。它一般取自或。(2)容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是，然后在B瓶中用__

13、____________酶處理，這是為了______________________________。(3)培養(yǎng)首先在C瓶中進行這時的細胞培養(yǎng)稱為________瓶中的培養(yǎng)液成分有等。(4)在C瓶中培養(yǎng)時，懸浮液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為____________。培養(yǎng)貼附性細胞時，細胞要能夠貼附于底物上才能生長增殖。這就要求培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的內(nèi)表面_____________________，易于貼附。細胞進行有絲分裂，數(shù)量不斷增

14、多，當貼壁細胞分裂生長到_______________________時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的______________。為了把C瓶中的細胞分瓶，要用處理，目的是___________________________。然后配成，再分裝。(5)分裝后，在D瓶中培養(yǎng)叫做______________。一般來說，細胞在傳至_______代左右時，增殖會逐漸緩慢，以至于完全停止，這時部分細胞的_______________可

15、能會發(fā)生變化。當繼續(xù)傳代培養(yǎng)時，少部分細胞會克服_____________________________，獲得不死性，這些細胞已經(jīng)發(fā)生了突變，正在朝著等同于_____________的方向發(fā)展。目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為_______代以內(nèi)，以保持細胞正常的二倍體核型。(6)細胞培養(yǎng)所需氣體主要有______和CO2，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的______。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含_____

16、_______________的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。（1）胚胎幼齡動物組織器官（2）剪碎胰蛋白酶使細胞分散開（3）原代培養(yǎng)葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清（4）細胞貼壁光滑、無毒表面相互接觸接觸抑制胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離下來細胞懸浮液（5）傳代培養(yǎng)10~50細胞核型細胞壽命的自然極限癌細胞10（6）PH95%空氣加5%2O2CO動物細胞培養(yǎng)和核移植技術動物細胞培養(yǎng)動物體細胞核移植技術和克隆動物概念過程條件應用體細胞核