簡單測定種子的生活力

1、8種子生活力測定Z—1概述概述種子生活力（Seedviability）是指種子發(fā)芽的潛在能力。種子生活力測定在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上具有重要的意義：①測定休眠種子的生活力。許多植物種子因存在休眠，暫時不能萌發(fā)，因此發(fā)芽率很低，尤其是新收獲的和野生性較強的種子，必須進(jìn)行生活力測定，才能了解種子的發(fā)芽潛力，以便合理利用種子。播種前對發(fā)芽率低而生活力高的種子，應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)處理。種子檢驗時，若發(fā)芽試驗?zāi)┢谟行迈r不發(fā)芽種子或硬實種子，也應(yīng)接著進(jìn)行生活力測定，以

2、正確評定種子品質(zhì)。②快速預(yù)測種子的發(fā)芽力。休眠種子可借助于各種處理措施打破休眠，然后進(jìn)行發(fā)芽試驗，但所需時間較長。而種子貿(mào)易中，有時因時間緊迫，不可能采用標(biāo)準(zhǔn)發(fā)芽試驗來測定發(fā)芽力，因為發(fā)芽試驗所需時間更長，如小麥需8d，水稻需14d，某些蔬菜和牧草種子需2～3周，而多數(shù)林木種子則需要更長的時間。在這種情況下，可用生物化學(xué)速測法測定種子生活力作為參考。種子生活力測定方法有10多種，根據(jù)其測定原理可大致分為4類：①生物化學(xué)法，如四唑測定法、

3、溴麝香草酚藍(lán)法、甲烯藍(lán)法、中性紅法和二硝基苯法等。②組織化學(xué)法，如靛藍(lán)染色法、紅墨水染色法和軟x射線造影法等。③熒光分析法。④離體胚測定法。本節(jié)主要介紹四唑測定法、離體胚測定法、染料染色法和軟x射線造影法。Z—2生活力測定方法生活力測定方法一、測定原理一、測定原理有生活力的種子，其活細(xì)胞原生質(zhì)膜具有選擇透性，當(dāng)種子浸入染料后，染料大分子不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，所以胚部等活組織不能被染料染色，而死的種胚細(xì)胞因原生質(zhì)膜喪失選擇吸收能力，故可被染料

4、染色。二、測定方法二、測定方法（一）染色法（一）染色法1靛藍(lán)染色法此法適用于豆類、谷類、棉花、瓜類和林木等大粒種子的生活力測定。所用試劑為靛藍(lán)（或稱靛藍(lán)洋紅），分子式為C18H8O2N2（SO5Na）2，系藍(lán)色粉劑，能緩慢溶于水。測定方法如下：(l)種子預(yù)處理：將種子浸人30℃水中，水稻、向日葵、蓖麻、花生和棉籽等種子須先去殼再浸種，浸種時間因種子不同而異，小麥、大麥、大豆、豌豆和向日葵等為3h，燕麥、芝麻等4h，油菜、花生、棉籽等6h

5、，蓖麻、紅麻、大麻等7h、黍8h、水稻12h、玉米20h將充分吸脹的種子(100粒2次重復(fù)），沿胚中線縱切（如禾谷類）或剝?nèi)シN皮（如雙子葉種子），以備染色用。(3)測定種子收獲或加工過程中的種子損傷（如熱傷、機械損傷、化學(xué)傷害等）原因。（4）解決發(fā)芽試驗中遇到的問題，查明不正常幼苗產(chǎn)生的原因和殺菌劑、種子包衣等處理的傷害。(5)查明種子貯藏期間劣變衰老程度，按染色圖形分級，評定種子活力水平。(6)調(diào)種時時間緊迫，快速測定種子生活力。（二

6、）四唑測定法的原理有生活力的種子活細(xì)胞在呼吸過程中都會發(fā)生氧化還原反應(yīng)。四唑溶液作為一種無色的指示劑，被種子活組織吸收后，參與活細(xì)胞的還原反應(yīng)，從脫氫酶接受氫離子，在活細(xì)胞里產(chǎn)生紅色、穩(wěn)定、不擴散、不溶于水的三苯基甲替?；瘜W(xué)反應(yīng)式如下：依據(jù)四唑染成的顏色和部位，即可區(qū)分種子紅色的有生活力部分和無色的死亡部分。一般來說，單子葉植物種子的胚和糊粉層、雙子葉植物種子的胚和部分雙子葉植物的胚乳、裸子植物種子的胚和配子體等屬于活組織，含有脫氫酶，

7、四唑滲入后能染成紅色，而種皮和禾谷類胚乳等為死組織，不能染色。除完全染色的有生活力種子和完全不染色的無生活力種子外，還可能出現(xiàn)一些部分染色的種子。判斷種子有無生活力，主要看胚和（或）胚乳（或配子體）不染色壞死組織的部位及面積大小，而不一定在于顏色的深淺，顏色的差異主要是將健全的、衰弱的和死亡的組織區(qū)別出來，根據(jù)上述原理鑒定種子胚的死亡部分，還可以查明種子死亡的原因。四唑染色是一酶促反應(yīng)因此反應(yīng)不僅受酶活性的影響，還受底物濃度、反應(yīng)溫度、

8、pH等因素的影響。該酶促反應(yīng)的適宜pH為6.1～7，高于者低于此pH反應(yīng)不能正常進(jìn)行，也就無法測定種子活力的高低。因此對于游離酸含量高的四唑試劑應(yīng)當(dāng)用緩沖液配制。反應(yīng)速率隨溫度的不同而變化溫度每升高10℃反應(yīng)速率提高1倍，譬如20℃時需要反應(yīng)時間4h，30℃則需要2h，但反應(yīng)最高溫度不能超過45℃，染色時底物的濃度要一致，一般染色部位切開的種子，測定時四唑溶液的質(zhì)量濃度為0.1％～0.2％，染色部位完整的種子，質(zhì)量濃度為1%～2%。種子