灰飛虱與RSV親和性相關(guān)的分子標(biāo)記及RSV對(duì)灰飛虱生活力的影響.pdf

1、水稻條紋病毒(Rice strpe virus，RSV)是纖細(xì)病毒屬(Tenuivirus)的典型成員，由介體灰飛虱(Laodelphax striate Fallen，SBPH)以持久性方式經(jīng)卵傳播。本文通過(guò)構(gòu)建親和力差異明顯的兩個(gè)灰飛虱群體-高親和性灰飛虱群體和非親和性灰飛虱群體，運(yùn)用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(random amplified polymorphic DNA RAPD)與單引物擴(kuò)增PCR(single prjmer am

2、plified reations，SPAR)兩種分子生物學(xué)技術(shù)，分析兩個(gè)灰飛虱群體的基因差異，初步研究了灰飛虱與RSV親和性相關(guān)的分子標(biāo)記。并且對(duì)高親和性灰飛虱群體的無(wú)毒蟲(chóng)與帶毒蟲(chóng)進(jìn)行不同組合的雜交配對(duì)，探索其對(duì)F1代生活力的影響。 從江蘇四個(gè)地區(qū)采集灰飛虱，通過(guò)連續(xù)多代的人工篩選，獲得了對(duì)RSV親和性差異顯著的兩個(gè)灰飛虱群體。高親和性的群體在經(jīng)過(guò)4代無(wú)人工選擇壓力后仍可保持90％以上的帶毒率。說(shuō)明構(gòu)建的高親和性群體不僅具有很高

3、的帶毒率而且具有較好的穩(wěn)定傳遞特性，這樣一個(gè)群體對(duì)于傳毒機(jī)制的研究、RSV致病性分化研究和品種抗性分析都具有重要意義。 運(yùn)用RAPD和SPAR技術(shù)篩選高親和性灰飛虱群體和非親和性灰飛虱群體的差異基因序列，結(jié)果表明在47條隨機(jī)引物中篩選出3條，在3條微衛(wèi)星引物中篩選出2條能擴(kuò)增出多態(tài)性較好的條帶，其中3條隨機(jī)引物和2條微衛(wèi)星引物各有一條能擴(kuò)增出差異條帶，擴(kuò)增效果也比較單一.他們對(duì)高親和性灰飛虱群體均分別能擴(kuò)增出一條1200bp和一

4、條900bp特異性條帶。推測(cè)這兩條特異性條帶可能可以作為灰飛虱與RSv親和性相關(guān)的分子標(biāo)記。 利用同一家系的高親和性灰飛虱的無(wú)毒蟲(chóng)與帶毒蟲(chóng)，將親代灰飛虱組合成四個(gè)組合：組合1帶毒雌蟲(chóng)×帶毒雄蟲(chóng)；組合2帶毒雌蟲(chóng)×無(wú)毒雄蟲(chóng)；組合3無(wú)毒雌蟲(chóng)×帶毒雄蟲(chóng)；組合4無(wú)毒雌蟲(chóng)×無(wú)毒雄蟲(chóng)作為對(duì)照。研究發(fā)現(xiàn)F1代的帶毒情況只與雌蟲(chóng)有關(guān)，雌蟲(chóng)帶毒則后代帶毒率為100％。攜帶RSV灰飛虱，其對(duì)F1帶產(chǎn)卵量無(wú)明顯影響，而對(duì)孵化力有影響，四個(gè)組合中孵化出的