免疫組化指標意義及分子分型

1、乳腺癌免疫組化指標意義,甘肅省婦幼保健院乳腺二科 白海亞,腫瘤標志物,定義：指腫瘤組織或細胞由于癌基因及其產(chǎn)物異常表達所產(chǎn)生的抗原和生物活性物質(zhì)。反映癌的發(fā)生、發(fā)展過程中有關基因或癌基因活化程度可在腫瘤病人的組織、體液和排泄物中檢出。包括：激素、受體、酶和同工酶、癌基因及其產(chǎn)物，單克隆抗體等。,性激素受體,雌激素受體（estrogen receptor，ER）為糖蛋白，生物特性不穩(wěn)定，受熱易破壞只能與雌二醇及結構相似

2、的物質(zhì)結合受體飽和達到容量限度后，結合與離解呈動態(tài)平衡激素與受體結合后，在體內(nèi)發(fā)揮各種激素效應,染色結果,ER陽性的細胞的核與胞漿中均可見深的棕黑色顆粒判斷標準：(-):陽性細胞數(shù)50%,性激素受體,孕激素受體（prosgesterone receptor，PR） PR是E2和ER結合誘導的產(chǎn)物，其合成必須有雌激素作為啟動，缺乏ER時很少能合成PR，PR 的出現(xiàn)顯示ER 功能機制的完整性， 大多數(shù)乳腺癌呈激素依

3、賴性,,正常乳腺上皮細胞內(nèi)存在ER、PR。當細胞發(fā)生癌變時，ER和PR出現(xiàn)部分和全部缺失。如果細胞仍保留ER和（或）PR，則該乳腺癌細胞的生長和增殖仍然受內(nèi)分泌的調(diào)控，稱為激素依賴性乳腺癌如果ER和（或）PR缺失，則該乳腺癌細胞的生長和增殖不再受內(nèi)分泌的調(diào)控，稱為非激素依賴性乳腺癌,基因,癌基因與抑癌基因：是細胞內(nèi)控制細胞分裂和分化的基因族，在特定情況下，可使其激活或失活，從而導致細胞癌變。,C-erBb-2 基因,又稱neu 或

4、HER2定位于17q21，編碼分子質(zhì)量為185 kDa ( P185) 的跨膜蛋白，具有胞內(nèi)酪氨酸酶活性與表皮生長因子受體(EGFR) 具有高度同源性，故它又稱人表皮生長因子相關基因,意義：,參與細胞生長、分化的調(diào)節(jié)。正常情況下處于非激活狀態(tài)，當受到體內(nèi)、外某些因素作用而激活時，具有腫瘤轉化活性，通過基因擴增和蛋白過度表達在細胞信號傳遞系統(tǒng)中起橋梁作用，刺激細胞增殖、浸潤和轉移。 在正常乳腺組織中呈低表達，在乳腺癌組織中表達率可增

5、高，其表達與乳腺癌分級、淋巴結轉移和臨床分期呈正相關，表達率越高，預后可能也就越差。,P53抑癌基因,有兩種類型：野生型和突變型，野生型能誘導細胞凋亡和促進DNA 修復，但其半衰期短，含量低，用免疫組化方法難以檢測突變型P53 蛋白因構象改變，半衰期長，故臨床測定主要是突變型的P53 蛋白。突變型P53 基因失去了對細胞的監(jiān)視功能，不能引起細胞增殖的停滯和凋亡，使細胞帶著受損和錯配的DNA 進入S 期，結果細胞因遺傳不穩(wěn)定而發(fā)生突變

6、和染色體畸形變，最后發(fā)生癌變。,意義,乳腺癌P53基因的突變率約為14%～40%P53基因突變或P53蛋白的過度表達與乳腺癌組織分化低、表皮生長因子受體及Ki-67表達增加、晚期、轉移擴散、ER、PR含量低有關P53陽性病例無病生存率和總生存期較短P53基因與淋巴結關系不大，但淋巴結陽性同時P53陽性者預后較差,nm23基因,由Steeg 等在1988 年應用消減技術發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤轉移抑制基因，定位于人17 號染色體長臂主要分布

7、于細胞質(zhì)中，胞膜上有少量表達；其基因產(chǎn)物二磷酸核苷激酶(NDPK) 參與多種生物學活動，在細胞信號傳遞、細胞分化、維持細胞的正常骨架等過程中起著重要作用。,意義,Nm23的表達與腫瘤大小、病理類型無相關性淋巴結無轉移者nm23呈高表達，反之呈低表達,Ki67抗原,是與增殖細胞相關的核抗原，分布于核內(nèi)，其功能被認為與染色質(zhì)相連及與細胞的有絲分裂有絲分裂密切相關，與其他細胞周期相關的蛋白不同的是它不表達于D N A 修復狀態(tài)的細胞。Ki

8、67 在G1 后期開始出現(xiàn)，S、G2 期升高，M 期達高峰，其后迅速降解，在G0 期無表達，半衰期為1 小時或更短。,意義,乳腺癌中Ki67抗原的陽性率與乳腺癌的淋巴結轉移有顯著關系，而Ki67抗原表達水平與乳腺癌患者生存率的直接關系國內(nèi)外罕見報道。Ki67抗原表達水平與乳腺癌淋巴結轉移密切相關。腫瘤淋巴結轉移是與腫瘤細胞的增殖活性密切相關的，Ki67 抗原是與增殖細胞相關的核抗原，故Ki67 抗原表達水平高者易出現(xiàn)乳腺癌淋巴結轉移。

9、Ki67 蛋白的表達，可反映腫瘤細胞活性，與惡性腫瘤的發(fā)展、轉移和預后高度相關,E - cadherin,屬于鈣粘蛋白家族中典型的鈣粘蛋白亞族的一員。分布在所有上皮組織中，是建立與保持上皮細胞極性和細胞-細胞間緊密連接的關鍵分子。E - cadherin是一分子量約120 kD的跨膜糖蛋白，分為細胞外區(qū)、跨膜區(qū)、胞漿區(qū)。,意義,E -cadherin的表達與乳腺癌的分化程度、淋巴結轉移及預后均有一定的關系。乳腺癌起源于乳腺的導管和

10、小葉上皮細胞， E - cadherin在小葉癌和導管癌中表達是不同的，大多數(shù)導管癌表達E - cadherin陽性，而小葉癌E - cadherin表達很少用免疫組織化學方法標記E – cadherin，用作導管癌和小葉癌的鑒別診斷。,表皮生長因子受體（EGFR）,又稱C-erBb-1或Her-1能引起細胞的過度分裂、增殖，最后引起細胞癌變。,意義,EGFR陽性率與乳腺癌的組織學分級呈顯著相關性，分化差的乳腺癌EGFR陽性率表達高

11、，分化好的腫瘤細胞則較低EGFR的高表達提示有較強的侵襲轉移力、生存率降低、預后差。,p63基因,是一個抑癌基因，免疫組化染色主要定位于細胞核，判斷肌上皮完整性的指標p63在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要的作用可為乳腺癌的早期診斷、及時治療及預后判斷提供必要的理論依據(jù)。,BRCA1 ( breast cancer susceptibility gene 1),是遺傳性乳腺癌和卵巢癌的易感基因，BRCA1基因的結構和功能1990年

12、Hall等研究發(fā)現(xiàn)，染色體17q21與早期發(fā)生的家族性乳腺癌相關。,血管內(nèi)皮細胞生長因子VEGF,是一種重要的血管生成因子，又稱血管通透因子( vascular peameability factor ，VPF) ,是近年來發(fā)現(xiàn)的一種多肽類細胞因子功能:通過其受體直接刺激血管內(nèi)皮細胞增殖，并誘導產(chǎn)生蛋白水解酶、間質(zhì)膠原酶和組織因子來促進血管形成；提高血管通透性，促進血漿蛋白、纖維蛋白原外滲導致腫瘤間質(zhì)水腫，引起細胞外基層改變，從而

13、為腫瘤浸潤及轉移提供適合的基礎。,SMA（smooth muscle actin）：,稱為平滑肌肌動蛋白，是可靠的標記抗體。從乳腺正常組織、良性病變到原位癌，早期浸潤和浸潤性癌，它的消失是一逐漸發(fā)展的過程。,COX-2 (cyclooxygenase-2),COX - 2是前列腺素合成途徑中的關鍵酶，乳腺癌組織中存在COX-2的表達。在腫瘤生成的多個關鍵步驟，如細胞抗凋亡、增強細胞運動性及血管生成中發(fā)揮重要作用。 COX - 2高表達與

14、乳腺癌脈管侵犯、淋巴結侵犯、分期、PR 表達、CerbB2 表達及p53表達具有相關性。,,,,,,,全球狀況,100% 乳腺癌患者,絕經(jīng)前26%,絕經(jīng)后74%,ER–46%,ER+54%,ER– 27%,ER+73%,晚期: 19%,早期: 81%,Decision Resources Epidemiology Data & Primary MR.,,,,,,,,,中國狀況,100% 乳腺癌患者,絕經(jīng)前60%,絕