紅細(xì)胞比容和三種平均值、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、

1、血細(xì)胞比容(Hct或PCV)，以前稱為紅細(xì)胞壓積，是指在一定條件下經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細(xì)胞在全血標(biāo)本中所占體積的比值。 HCT的高低與紅細(xì)胞數(shù)量及平均體積、血漿量有關(guān),1,任務(wù)四 血細(xì)胞比容測定,1.常量法(Wintrobe法)和微量法(microhematocrit) 將抗凝血液標(biāo)本置于孔徑統(tǒng)一的溫氏管或毛細(xì)玻璃管中，以一定轉(zhuǎn)速離心一定時(shí)間后，計(jì)算紅細(xì)胞層占全血的體積比。 5層：血漿層、血小板層、白細(xì)胞和

2、有核紅細(xì)胞層、還原紅細(xì)胞層和氧合紅細(xì)胞層。2.血液分析儀法 由紅細(xì)胞平均體積和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)兩項(xiàng)指標(biāo)后導(dǎo)出，Hct＝紅細(xì)胞計(jì)數(shù)×紅細(xì)胞平均體積。,檢測原理,4,1.操作規(guī)范化 避免操作誤差，如抗凝量不準(zhǔn)，混勻不充分，離心速度不均等。 2．注意干擾因素 ①假性增高：紅細(xì)胞形態(tài)異常和紅細(xì)胞增多時(shí)應(yīng)注明， (細(xì)胞變形性減低和數(shù)量增多 血漿殘留量增加)； 高網(wǎng)織紅細(xì)胞或

3、高白細(xì)胞等 ②假性降低：體外溶血、自身凝集等。,,質(zhì)量保證,參考值,男性：0.380—0.508；女性：0.335—0.450,臨床意義,HCT的臨床意義與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相似。HCT減低是診斷貧血的指標(biāo)， HCT的高低與紅細(xì)胞數(shù)量及平均體積、血漿量有關(guān)主要用于貧血、真性紅細(xì)胞增多癥和紅細(xì)胞增多的診斷、血液稀釋和血液濃縮變化的測定、計(jì)算紅細(xì)胞平均體積和紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度等。,,臨床意義,1．臨床補(bǔ)液量的參考 各種原

4、因?qū)е旅撍畷r(shí)，HCT都會增高，補(bǔ)液時(shí)可監(jiān)測HCT，HCT恢復(fù)正常表示血容量得到糾正。 2．真性紅細(xì)胞增多癥診斷指標(biāo) 當(dāng)HCT大于0.7，RBC為(7-10)X1012／L, Hb大于180g／L，即可診斷。,臨床意義,3．紅細(xì)胞平均指數(shù)計(jì)算的基礎(chǔ)數(shù)據(jù) 紅細(xì)胞平均值(MCV、MCHC)可用于貧血的形態(tài)學(xué)分類。 4．血液流變學(xué)指標(biāo) HCT增高表明紅細(xì)胞數(shù)量偏高， 全血

5、黏度增加，嚴(yán)重者表現(xiàn)為高黏滯綜合征， 微循環(huán)障礙、組織缺氧。 HCT與其他血液流變學(xué)指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用，可對一些血栓前狀態(tài)進(jìn)行監(jiān)測。,,,,10,任務(wù)五 紅細(xì)胞平均指數(shù)計(jì)算,紅細(xì)胞平均容積(mean corpuscular volume，MCV)，指每個(gè)紅細(xì)胞平均體積的大小，以飛升(f1)為單位； 紅細(xì)胞血平均紅蛋白含量(mean corpuscular he-moglobin，MCH)，指每個(gè)紅細(xì)胞內(nèi)

6、平均所含血紅蛋白的量，以皮克(pg)為單位；紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(mean corpuscular Hemoglobin concentration，MCHC)，指平均每升紅細(xì)胞中所含血紅蛋白濃度(g／L)。,(1)MCV=每升血液中紅細(xì)胞體積/每升血液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù)=Hct/RB(f1)(2)MCH=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細(xì)胞個(gè)數(shù)=Hb/RBC(pg)(3)MCHC=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細(xì)胞比容=

7、Hb/ Hct,11,[檢測原理] 1．手工法 同時(shí)計(jì)數(shù)紅細(xì)胞，測定血紅蛋白和血細(xì)胞比容，計(jì)算出紅細(xì)胞3個(gè)平均指數(shù)。例：RBC為3.50X1012／L，Hct為0.36，Hb為120g/L Hct 0.36MCV＝—— （fl）＝—————— ＝103（fl） RBC 3.50X1012／L

8、 Hb HbMCH＝—— （pg）， MCHC＝——（ g／L ） RBC Hct,[檢測原理]2．血液分析儀 能直接導(dǎo)出MCV的值，再結(jié)合儀器直接測定的RBC和Hb，計(jì)算出MCH和MCHC MCH＝Hb／RBC，

9、 MCHC＝Hb／(RBC×MCV)。,14,參考值,,,臨床意義,作為貧血的紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)分類,紅細(xì)胞體積分布寬度,（一）檢測原理　紅細(xì)胞體積分布寬度（RDW）反映樣本中紅細(xì)胞體積大小的異質(zhì)程度，即反映紅細(xì)胞大小不等客觀指標(biāo)，常用變異系數(shù)（CV）表示，由血液分析儀的紅細(xì)胞體積直方圖導(dǎo)出。（二）方法學(xué)評價(jià)　　RDW是對紅細(xì)胞體積大小的評價(jià)，比血涂片紅細(xì)胞形態(tài)大小的觀察更為客觀和準(zhǔn)確。（三）質(zhì)量控制RDW異常受樣本中

10、紅細(xì)胞碎片、紅細(xì)胞凝集、雙相性紅細(xì)胞的影響。 （四）臨床意義1.貧血形態(tài)學(xué)分類：根據(jù)紅細(xì)胞形態(tài)大小不同，將貧血分成6類,紅細(xì)胞體積分布寬度,1983年由Bessman提出的新貧血分類法對貧血病因鑒別診斷具有更大意義。MCV和RDW聯(lián)合檢測對貧血形態(tài)學(xué)鑒別診斷靈敏度為86.7%～100%，特異度為83.4%～100%。 2.作為缺鐵性貧血（IDA）：篩選診斷和療效觀察的指標(biāo)：RDW增大對IDA的診斷靈敏度達(dá)95%以上，特異性不強(qiáng)，可

11、作為IDA的篩選診斷指標(biāo)。當(dāng)鐵劑治療有效時(shí)，RDW開始增大，隨后逐漸降至正。3.鑒別缺鐵性貧血和β-珠蛋白生成障礙性貧血：RDW增大對IDA的診斷靈敏度達(dá)95%以上，特異性不強(qiáng)，可作為IDA的篩選診斷指標(biāo)。當(dāng)鐵劑治療有效時(shí)，RDW開始增大，隨后逐漸降至正常。,18,任務(wù)六 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù),網(wǎng)織紅細(xì)胞(reticulocyte，Ret)是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟紅細(xì)胞間的過渡細(xì)胞胞質(zhì)中殘存嗜堿性物質(zhì)核糖核酸(RNA)，經(jīng)煌焦油藍(lán)等活

12、體染色后，嗜堿性物質(zhì)凝聚成藍(lán)黑色顆粒，連綴成線，線連接成網(wǎng)。屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞(當(dāng)嗜堿性物質(zhì)消耗殆盡后才被視為成熟紅細(xì)胞)，一般為8～9.5μm。,19,20,[檢測原理] 1.普通光學(xué)顯微鏡法 活體染色（新亞甲藍(lán)或煌焦油藍(lán))的堿性著色基團(tuán) 網(wǎng)織紅細(xì)胞RNA的磷酸基(帶負(fù)電荷) RNA膠體間的負(fù)電荷減少而

13、發(fā)生凝縮， 藍(lán)色的點(diǎn)狀、線狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu) ， 顯微鏡下計(jì)數(shù)1000個(gè)紅細(xì)胞中所占的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，以百分比或分?jǐn)?shù)數(shù)表示。,,,,[檢測原理] 流式細(xì)胞儀法2．儀器法 網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 血液分析儀法。 熒光染料與網(wǎng)織紅細(xì)胞中RNA

14、結(jié)合， 發(fā)出特定顏色的熒光進(jìn)行RNA定量精確計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞占成熟紅細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)(Ret％)。將網(wǎng)織紅細(xì)胞分成高、中、低熒光強(qiáng)度網(wǎng)織紅細(xì)胞 比率(HFR 、MFR、 LFR)并計(jì)算網(wǎng)織紅細(xì)胞其他參數(shù)。,,,血液分析儀法 提供與網(wǎng)織紅細(xì)胞相關(guān)的多個(gè)參數(shù)， 網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對值、 網(wǎng)織紅細(xì)胞百分比、 網(wǎng)織紅細(xì)胞平均體積、 網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白

15、分布寬度、 網(wǎng)織紅細(xì)胞血紅蛋白濃度、 網(wǎng)織紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度、 LFR、MFR、HFR、 網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟指數(shù)。,,24,【質(zhì)量保證】 以手工計(jì)數(shù)法為重點(diǎn)。 1．染料選擇,【質(zhì)量保證】 2．正確辨認(rèn)網(wǎng)織紅細(xì)胞 外周血中網(wǎng)織紅細(xì)胞主要為Ⅳ型，凡含有2個(gè)以上網(wǎng)織顆粒的紅細(xì)胞均應(yīng)計(jì)為網(wǎng)織紅細(xì)胞。 3．網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方法 (1)Miller窺盤： (2)顯微成像系

16、統(tǒng)：計(jì)算機(jī)和細(xì)胞形態(tài)分析軟件， ①HFR：粗顆粒堆積成網(wǎng)狀。 ②MFR：粗顆粒在10個(gè)以上，或細(xì)小顆粒超過15個(gè)。 ③LFR：細(xì)胞內(nèi)含15個(gè)以下細(xì)小顆粒,①網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)： 成人和兒童:0.005～0.025 新生兒: 0.02～0.06②網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對數(shù)： 成人和兒童: (24～84)X109／L,參考值,臨床意義,1．評價(jià)骨髓增生能力，判斷貧血類型。(1)網(wǎng)織紅細(xì)胞增多

17、：表示骨髓造血功能旺盛， 各種增生性貧血 (2)網(wǎng)織紅細(xì)胞減少：常見于再生障礙性貧血 (3)鑒別貧血：,臨床意義,2．評價(jià)療效 (1)觀察貧血療效：貧血隨訪缺鐵貧或巨幼貧有效治療后，2～3d后Ret開始上升，7～10d達(dá)到最高峰(約10％)，2周后漸降至正常。 (2)骨髓移植后監(jiān)測骨髓造血恢復(fù)：骨髓移植后第21天，如Ret大于15X109／L，常表示無移植并發(fā)癥；若骨髓開始恢復(fù)造血功能，首先HFR和MF