ev71和coxa16檢測(cè)對(duì)早期診斷重癥手足口病的意義

1、手足口病(Hand-foot-mouth disease,HFMD),EV71和COXA16檢測(cè)對(duì)早期診斷重癥手足口病的意義 華北石油管理局總醫(yī)院檢驗(yàn)科 徐偉,手足口病流行概況,手足口病是全球性傳染病，許多國(guó)家均有此病流行的報(bào)道。1957年新西蘭首次報(bào)道該病，1959年提出手足口病命名。我國(guó)1981年由上海首次報(bào)道了HFMD。在80年代，中國(guó)手足口病的流行主要以CoxA16為主。而近10年

2、來(lái)，EV71成為了引起手足口病爆發(fā)的主要病原體。 EV71感染的HFMD患者，神經(jīng)系統(tǒng)癥狀的發(fā)病率較高。手足口病是由多種腸道病毒引起的急性傳染病,EV71流行概況,1969年首次從加利福尼亞患有中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的嬰兒糞便標(biāo)本中分離出。1975年保加利亞：705 例患兒受到感染,其中149 例發(fā)生了急性弛緩性癱瘓,68 例死亡。1997年馬來(lái)西亞：5999 例發(fā)病,39 例急性脊髓灰質(zhì)炎樣麻痹或無(wú)菌性腦膜炎,31例患兒死亡 。19

3、98年我國(guó)臺(tái)灣地區(qū)：129106例HFMD ,其中405 例為嚴(yán)重的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染,78 例死亡,死亡原因主要為由中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染而導(dǎo)致的肺水腫和肺出血。,EV71流行概況,1999年以來(lái),我國(guó)廣東、福建、上海、重慶等地區(qū)報(bào)告局部流行EV71感染。2007年山東臨沂流行以EV71為主的手足口病。2008年安徽阜陽(yáng)、 海南、廣州,河北等。2009年河南、山東等多地流行。民權(quán)79例實(shí)驗(yàn)室檢查97.5%為EV71陽(yáng)性。荷澤36例實(shí)

4、驗(yàn)室檢查100%為陽(yáng)性。,手足口病---病原體,腸道病毒感染引起柯薩奇A、B、C群ECOHEV71型 以柯薩奇A16，EV71型最多重癥主要由EV71引起,手足口病---病原體,腸道病毒：為RNA病毒。臨床上可引起手足口病的腸道病毒有20余種。腸道病毒適合在濕、熱的環(huán)境下生存與傳播，對(duì)醋、來(lái)蘇水、乙醚、乙醇無(wú)效，低溫?zé)o意義；對(duì)熱、紫外線及干燥敏感，病毒在50度可被迅速滅活。對(duì)含氯消毒劑、含碘均敏感。,流行病學(xué),,流行特征：夏

5、秋季，2-3年暴發(fā)一次。隱性：顯性 100：1受感染后可獲得免疫力，但各型之間無(wú)交叉免疫。,傳染源：患者和隱性感染 傳播途徑：①糞-口傳播 ②日常接觸 ③空氣飛沫 ④醫(yī)源性 易感性：人，主要是兒童 4歲以下兒童占85-95%,為什么要關(guān)注EV71病毒感染？,手足口病為兒童常見(jiàn)病，已有50余年歷史，為什么現(xiàn)在連續(xù)幾年引起廣泛關(guān)注？ EV71

6、在手足口病暴發(fā)流行中占到主要流行株的地位。 較其它腸道病毒引起的手足口病病情嚴(yán)重，病死率高。 臨床表現(xiàn)有相對(duì)特殊性和不典型性，醫(yī)師缺乏認(rèn)識(shí) 對(duì)重癥病例的發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，影響了救治。,EV71特點(diǎn),（1）很強(qiáng)的傳染性：爆發(fā)流行 （2）較高的重癥率和病死率 （3）較為特殊的發(fā)病機(jī)制：病情突然加重。 （4）較難做到重癥病例的早期識(shí)別,EV71引發(fā)重癥的原因？,有嗜神經(jīng)性腦炎腦膜炎腦干腦炎---腦脊髓

7、炎,,中樞性呼吸、循環(huán)衰竭,,,肺出血、死亡,發(fā)病機(jī)制,病毒直接侵犯：腦組織、脊髓組織感染后免疫炎癥反應(yīng)神經(jīng)源性肺水腫：是指在沒(méi)有心肺原發(fā)性疾病和損傷的情況下，由顱腦損傷或中樞神經(jīng)系統(tǒng)其它疾病引起的肺水腫。尤其是腦干與呼吸中樞和血管舒縮有關(guān)的區(qū)域受損，以及腦水腫致顱內(nèi)壓升高，均可引起肺水腫。,重癥臨床分期,第一期：手足口出疹期第二期：神經(jīng)系統(tǒng)受累期（重型）第三期：心肺功能衰竭前期（危重型）第四期：心肺功能衰竭期（危重型）第五

8、期：恢復(fù)期,第2期,第3期,第1期,死亡,痊愈或后遺癥,根據(jù)發(fā)病機(jī)制和臨床表現(xiàn)，將EV71感染分為5期,,,,,第4期,痊愈,痊愈,痊愈,第5期,手足口出疹期,神經(jīng)系統(tǒng)受累期,心肺功能衰竭前期,心肺功能衰竭期,恢復(fù)期,普通型,重型,危重型,危重型,EV71引起的手足口病都是重癥嗎?,否但容易引發(fā)重癥 中國(guó)大陸>80%重癥病例,>90%死亡病例由EV71感染所致 ---重癥腸道病毒71型（EV71）感染臨床救

9、治專(zhuān)家共識(shí),EV71是重癥及死亡病例的主要病原,,,臨床表現(xiàn),潛伏期：2—7天急性起病，約半數(shù)人發(fā)熱手足口病表現(xiàn)：口腔出現(xiàn)較早，舌下、兩頰、唇齒側(cè)多見(jiàn)。手掌或腳掌出現(xiàn)斑丘疹和皰疹，臀部或膝蓋也可出現(xiàn)皮疹。,臨床表現(xiàn),皮疹特點(diǎn)：早期平，皰疹周?chē)捎醒装Y紅暈，皰內(nèi)液體較少；5天左右變暗、消退，延掌紋縱向分布；離心性分布，很少融合，疹壁較厚。疹子四不象①不象蚊子叮的②不象藥疹③不象口唇皰疹④不象水痘四不①不疼②不癢③不結(jié)痂④不留痕,,

10、,,第1期（手足口出疹期）,主要表現(xiàn)為發(fā)熱，手、足、口、臀等部位出疹（斑丘疹、丘疹、小皰疹），可伴有咳嗽、流涕、食欲不振等癥狀。部分病例僅表現(xiàn)為皮疹或皰疹性咽峽炎，個(gè)別病例可無(wú)皮疹。此期病例屬于手足口病普通病例，絕大多數(shù)病例在此期痊愈。,EV71感染的皮疹特點(diǎn)？,小、厚、硬,不癢，不疼，消退后不留痕跡,第2期（神經(jīng)系統(tǒng)受累期）,少數(shù)EV71感染病例可出現(xiàn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害，多發(fā)生在病程1-5天內(nèi)表現(xiàn)為精神差、嗜睡、易驚、頭痛、嘔吐、

11、煩躁、肢體抖動(dòng)、急性肢體無(wú)力、頸項(xiàng)強(qiáng)直等腦膜炎、腦炎、脊髓灰質(zhì)炎樣綜合征、腦脊髓炎癥狀體征腦脊液檢查為無(wú)菌性腦膜炎改變腦脊髓CT掃描可無(wú)陽(yáng)性發(fā)現(xiàn)，MRI檢查可見(jiàn)異常此期病例屬于手足口病重癥病例重型。,第3期（心肺功能衰竭前期）,多發(fā)生在病程5天內(nèi)。目前認(rèn)為可能與腦干炎癥后植物神經(jīng)功能失調(diào)或交感神經(jīng)功能亢進(jìn)有關(guān)，亦有認(rèn)為EV71感染后免疫性損傷是發(fā)病機(jī)制之一。表現(xiàn)為心率、呼吸增快，出冷汗、皮膚發(fā)花、四肢發(fā)涼，血壓升高，血糖升高，

12、外周血白細(xì)胞（WBC）升高，心臟射血分?jǐn)?shù)可異常。此期病例屬于手足口病重癥病例危重型。及時(shí)發(fā)現(xiàn)上述表現(xiàn)并正確治療，是降低病死率的關(guān)鍵。,第4期（心肺功能衰竭期）,可能與腦干腦炎所致神經(jīng)源性肺水腫、循環(huán)功能衰竭有關(guān)。多發(fā)生在病程5天內(nèi)，年齡以0-3歲為主。心動(dòng)過(guò)速（個(gè)別患兒心動(dòng)過(guò)緩）,呼吸急促，口唇紫紺，咳粉紅色泡沫痰或血性液體，持續(xù)血壓降低或休克。亦有病例以嚴(yán)重腦功能衰竭為主要表現(xiàn)，肺水腫不明顯，出現(xiàn)頻繁抽搐、嚴(yán)重意識(shí)障礙及中樞

13、性呼吸循環(huán)衰竭等。屬于手足口病重癥病例危重型，病死率較高。,第5期（恢復(fù)期）,體溫逐漸恢復(fù)正常。對(duì)血管活性藥物的依賴(lài)逐漸減少。神經(jīng)系統(tǒng)受累癥狀和心肺功能逐漸恢復(fù)，少數(shù)可遺留神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥狀。,降低病死率的關(guān)鍵？,及時(shí)準(zhǔn)確地將重癥和危重患者從大量普通患者中甄別出來(lái)！重癥早期識(shí)別是對(duì)基層醫(yī)生培訓(xùn)的要點(diǎn)及早發(fā)現(xiàn)危重癥的早期癥候 3歲以下，5天以?xún)?nèi)。高水平的救治手段,重癥病例早期表現(xiàn),持續(xù)高熱：體溫（腋溫）大于39℃，常規(guī)退

14、熱效果不佳。神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)：出現(xiàn)精神萎靡、嘔吐、易驚、肢體抖動(dòng)、無(wú)力、站立或坐立不穩(wěn)等，極個(gè)別病例出現(xiàn)食欲亢進(jìn)。呼吸異常：呼吸增快、減慢或節(jié)律不整。若安靜狀態(tài)下呼吸頻率超過(guò)30-40次/分（按年齡），需警惕神經(jīng)源性肺水腫。循環(huán)功能障礙：出冷汗、四肢發(fā)涼、皮膚花紋，心率增快。（>140-150次/分，按年齡）、血壓升高、毛細(xì)血管再充盈時(shí)間延長(zhǎng)（>2秒）。外周血WBC計(jì)數(shù)升高：外周血WBC超過(guò)15×109/L，除

15、外其他感染因素。血糖升高：出現(xiàn)應(yīng)激性高血糖，血糖大于8.3mmol/L。,及時(shí)準(zhǔn)確地甄別2、3期最關(guān)鍵,2期是3、4期發(fā)生的基礎(chǔ)，阻斷2期向3期、3期向4期發(fā)展是救治成功的關(guān)鍵。不能及時(shí)發(fā)現(xiàn)2、3期，是目前我國(guó)重癥手足口病的最大問(wèn)題。,監(jiān)測(cè)指標(biāo)血壓、心率、血氧飽和度、血糖、四肢皮膚循環(huán)（重癥患者的循環(huán)衰竭總是從四肢末梢即腳趾、手指開(kāi)始，要及時(shí)觀察到腳趾手指發(fā)涼）。體溫、精神狀態(tài)、進(jìn)食情況、頻繁嘔吐、肢體抖動(dòng)或無(wú)力、抽搐、紫紺、肺

16、部羅音。血象、胸片、血?dú)狻＜皶r(shí)的檢測(cè)EV71和COXA16對(duì)于早期鑒別重癥手足口病有重要指導(dǎo)意義。,密切觀察是及時(shí)發(fā)現(xiàn)重癥的關(guān)鍵,病 例 （一）,某某，女，4歲3月主訴：發(fā)熱伴嗜睡4天，加重1天。入院2日后出現(xiàn)皮疹，查體肺呼吸音粗，無(wú)羅音?；?yàn)：血wbc22.05ｘ109/L胸片：右肺大片實(shí)變影出院診斷：手足口病重癥（腦干腦炎）、肺炎、多臟器功能衰竭,病 例 （二）,某某某，女，3歲6月主訴：發(fā)熱4天，精神差2天。入院

17、查體時(shí)發(fā)現(xiàn)口腔有潰瘍，腦征陽(yáng)性，雙肺呼吸音粗，可聞及少許濕羅音?；?yàn)：血wbc26.44ｘ109/L胸片：雙肺紋理增多，內(nèi)中帶見(jiàn)點(diǎn)片狀模糊影。出院診斷：手足口病重癥、病毒性腦炎、感染性休克、心肌炎、心衰、呼衰,病 例 （三）,某某某，男，5月22天主訴：發(fā)熱、咳嗽4天，氣促、煩躁2天，加重5小時(shí)入院。入院后咳出粉紅色泡沫痰，16小時(shí)后雙下肢出現(xiàn)散在紅色丘疹，雙肺呼吸音粗，可聞散在細(xì)濕羅音。化驗(yàn)：血wbc20.04ｘ109/L

18、胸片：雙肺大片狀模糊陰影，以右肺明顯出院診斷：手足口病重癥、肺炎、肺出血、腦干腦炎、呼衰、心率失常、感染性休克、心肌損害、高鉀血癥,病 例 （四）,某某，男，3月4天主訴：發(fā)熱3天，嘔吐2天，腹瀉12小時(shí)，抽搐1次入院后查體發(fā)現(xiàn)手足幾個(gè)散在紅色丘疹，雙肺呼吸音粗，可聞散在濕性羅音，頸抵抗陽(yáng)性?；?yàn)：血wbc21.26ｘ109/L出院診斷：手足口病重癥、病毒性腦炎、神經(jīng)源性休克、多臟器功能不全、代謝性酸中毒、高鈉血癥、低鉀血癥

19、,病 例 （五）,某某某，女，6月主訴：發(fā)熱4天，呼吸困難、青紫、昏睡7小時(shí)入院。入院后咳出粉紅色泡沫痰，5小時(shí)后足底出現(xiàn)散在紅色丘疹，雙肺可聞干濕羅音?；?yàn)：血wbc27.14ｘ109/L出院診斷：手足口病重癥、腦干腦炎、神經(jīng)源性肺水腫、休克、呼衰、應(yīng)激性潰瘍,病 例 （六）,患兒女，6個(gè)月主訴：腹瀉數(shù)日伴喘息、呼吸困難2日，精神差4小時(shí)體檢發(fā)現(xiàn)患兒面色蒼白、口唇發(fā)紺，呼吸急促，三凹征陽(yáng)性，雙肺廣泛中小水泡音，心率184次

20、?；?yàn)：白細(xì)胞總數(shù)26.9ｘ109/L附近醫(yī)院救治在吸痰時(shí)吸出淡紅色血性分泌物，因病情重2小時(shí)后轉(zhuǎn)兒童醫(yī)院途中呼吸心跳停止。死亡診斷：重癥肺炎、肺出血、多臟衰尸解結(jié)果：腦干腦炎、肺水腫、EV71陽(yáng)性,病 例 （七）,患兒男，11月，因發(fā)熱2天，腹瀉1天伴嘔吐，精神差4小時(shí)而就診。體檢：神志不清，面色蒼白，呼吸急促，三凹征陽(yáng)性，雙肺濕羅音，四肢末梢循環(huán)差，肝肋下5cm。化驗(yàn)：白細(xì)胞總數(shù)22.7ｘ109/L胸片：雙肺大片實(shí)變

21、搶救2小時(shí)后無(wú)效死亡。死亡診斷：感染性休克、肺出血、多臟衰尸解結(jié)果：腦干腦炎、肺水腫、EV71陽(yáng)性,重癥病例主要死因,神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)：PICU搶救病例全部累及（以腦炎和腦脊髓膜炎為主）呼吸循環(huán)系統(tǒng)：全部累及主要死因依次為：腦疝；肺水腫、肺出血；頑固性休克平均死亡年齡為1.5歲,重癥病例出現(xiàn)癥狀構(gòu)成比,危重癥狀出現(xiàn)距起病時(shí)間12h~5d（平均2.1d）危重癥狀包括神經(jīng)系統(tǒng)（嗜睡或昏睡平均2.1天、昏迷2.9天、抽搐2.4天）；呼吸

22、系統(tǒng)（呼吸促或減慢平均2天、肺部羅音2.5天、泡沫痰或血性痰2.7天、肺水腫2.7天）；心血管系統(tǒng)（心率快>180次/分平均2.4天、四肢末梢涼1.9天）。,EV71和COXA16檢測(cè)意義,神經(jīng)源性肺水腫(neu2rogenicpulmonaryedema,NPE)病死率高,是EV71病毒感染的重要并發(fā)癥和主要死因,受到國(guó)內(nèi)外研究者的高度關(guān)注。由于多種腸道病毒感染都可導(dǎo)致手足口病并且不同病毒感染所導(dǎo)致手足口病的疾病過(guò)程有所不同

23、,為了能對(duì)手足口病尤其是重癥患兒做到早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、早診斷、早治療,病原學(xué)診斷就尤為重要。,實(shí)驗(yàn)方法,目前手足口病的檢測(cè)技術(shù)主要有病毒分離培養(yǎng)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、PCR檢測(cè)，快速金標(biāo)法等,PCR技術(shù)由于其快速、靈敏度高、特異性好,并可通過(guò)設(shè)計(jì)不同的引物進(jìn)行病毒分型,是目前手足口病最主要的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù),鑒別,EV71在不同時(shí)間和不同地區(qū)流行引起的臨床癥狀各異,其感染引起的HFMD在臨床癥狀等方面通常與CoxA16引起者

24、難以區(qū)別,而且Cox2A16往往伴隨著EV71的流行。實(shí)驗(yàn)室診斷就顯得尤為重要,特別是對(duì)重癥病例的快速診斷,對(duì)治療和預(yù)后判斷具有較大意義。,標(biāo)本采集,患者咽拭子、糞便、皰疹液及腦脊液均可分離到病毒或用于病毒核酸檢測(cè),目前從國(guó)內(nèi)外資料來(lái)看,糞便標(biāo)本更為常用,但是糞便標(biāo)本的采集有時(shí)不是很方便,而咽拭子標(biāo)本的采集不但簡(jiǎn)便易行,而且從理論上來(lái)講,咽部是手足口病相關(guān)病毒最早感染繁殖的部位,能夠最早采集到病毒。,標(biāo)本采集補(bǔ)充,在單一的檢測(cè)標(biāo)本中咽

25、拭子標(biāo)本是最有效的標(biāo)本,但咽拭子要注意采集的部位、力度及采集時(shí)間。另外,皰疹液同樣有效,而且具有采樣部位相對(duì)無(wú)菌的優(yōu)點(diǎn),只是采集起來(lái)相對(duì)困難,只有約一半的患者出現(xiàn)皰疹。從對(duì)重癥病例的檢測(cè)結(jié)果來(lái)看,咽拭子和皰疹液差別不大,都可以作為手足口病實(shí)驗(yàn)室診斷的理想標(biāo)本,小結(jié),目前人類(lèi)是EV71病毒唯一已知的自然宿主,由于尚無(wú)特異、高效的手足口病抗病毒治療藥物,主要是對(duì)癥治療,對(duì)廣大學(xué)齡前兒童加強(qiáng)健康宣傳教育,對(duì)于手足口病的防控就顯得尤為重要。在

26、實(shí)驗(yàn)室診斷中，第一時(shí)間進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)對(duì)于鑒別區(qū)分重癥手足口病有重要指導(dǎo)意義,,滄州某醫(yī)院36例重癥病例共采集104份標(biāo)本,同時(shí)采用RT-PCR及實(shí)時(shí)熒光RT-PCR進(jìn)行EV7I和CoxA16病毒核酸檢測(cè),兩種方法結(jié)果一致,其中咽拭子36份,35份檢出EV71,檢出率為97.2%,皰疹液32份,全部檢出EV71,腦脊液36份,只有1份檢出EV71,檢出率為2.8%。所有標(biāo)本CoxA16均未檢出,手足口病的防范重點(diǎn),及早進(jìn)行手足口病原學(xué)檢測(cè)