諾瓦克病毒急性胃腸炎

1、一、病原學(xué),1972年，Kapikian等在美國(guó)Norwalk(諾瓦克)鎮(zhèn)暴發(fā)的一次急性胃腸炎患者的糞便中發(fā)現(xiàn)一種直徑約為27nm的病毒樣顆粒，將之命名為諾瓦克病毒(NorwalkVirus，NV)。此后，世界各地陸續(xù)自胃腸炎患者糞便中分離出多種形態(tài)與之相似但抗原性略異的病毒樣顆粒，均以發(fā)現(xiàn)地點(diǎn)命名，如：美國(guó)的Hawaii Virus(HV)、Snow Mountain Virus(SMV)，英國(guó)的Taunton virus、 Sout

2、hampton virus(SV)等，日本的SRSVl—9等，統(tǒng)稱(chēng)為諾瓦克樣病毒(Norwalk-like viruses，NLVs)，諾瓦克病毒是這組病毒的原型株。,,1993年通過(guò)分析其cDNA克隆的核酸序列，將諾瓦克病毒歸屬于杯狀病毒科(calici virus)。諾瓦克樣病毒成員龐雜，目前已對(duì)其100多個(gè)分離株進(jìn)行基因測(cè)序。根據(jù)RNA聚合酶區(qū)或衣殼蛋白區(qū)核甘酸和氨基酸序列的同源性比較，將諾瓦克樣病毒分為兩個(gè)基因組：基因組I，代表

3、株NV，包括SV等、Desert Shield virus(DSV)等；基因組Ⅱ，代表株SMV，包括HV、Mexio virus(MX)等。,,諾瓦克樣病毒有許多共同特征：①直徑26—35nm的小圓結(jié)構(gòu)病毒，無(wú)包膜；②分離自急性胃腸炎病人的糞便；③不能在細(xì)胞或組織中培養(yǎng)；④基因組為單股正鏈RNA；⑤在Cscl密度梯度中的浮力密度為(1.36—1.41)g/cm3；⑥電鏡下缺乏顯著的形態(tài)學(xué)特征。,二、流行特點(diǎn),(一)傳染源：諾瓦克樣病毒感

4、染的患者、隱性感染者及健康攜帶者均可為傳染源。(二)傳播途徑：主要傳播途徑是糞口傳播。原發(fā)場(chǎng)所有學(xué)校、家庭、旅游區(qū)、醫(yī)院、食堂、軍隊(duì)等，食用被病毒污染的食物如牡蠣、冰、雞蛋、色拉及水等最常引起暴發(fā)性胃腸炎流行。生吃貝類(lèi)食物是導(dǎo)致諾瓦克樣病毒胃腸炎暴發(fā)流行的最常見(jiàn)原因。1987—1992年，在日本Kyushu地區(qū)暴發(fā)的急性諾瓦克樣病毒胃腸炎中，有4次被證實(shí)與生食牡蠣密切相關(guān)。Schwab等用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)的方法證實(shí)，

5、諾瓦克病毒可以在貝類(lèi)生物體內(nèi)累積，且用消滅大腸桿菌的方法不能凈化。,,此外人—人接觸傳播、空氣傳播亦是諾瓦克病毒和諾瓦克樣病毒傳播的途徑，后者可由患者周?chē)娜宋牒《镜奈⒘?患者排出的嘔吐物在空氣中蒸發(fā))而傳播。暴發(fā)期間經(jīng)常發(fā)生最初病例接觸被污染的媒介物(食物或水)引起，而第二、第三代病例由人對(duì)人傳染引起。1996年1月至2000年11月間，報(bào)告給美國(guó)CDC的諾瓦克樣病毒胃腸炎暴發(fā)348起，經(jīng)食物傳染的占39％，人與人接觸傳染的

6、占12％，經(jīng)水傳染的占3％，還有18％不能與特定傳染方式相聯(lián)系，還有28％無(wú)資料。,,(三)易感人群：諾瓦克病毒多侵襲成年人和較大年齡兒童，具有癥狀較輕、自限性、易引起暴發(fā)和無(wú)明顯季節(jié)性等特點(diǎn)。,三、流行情況,隨著諾瓦克樣病毒檢測(cè)手段的不斷改進(jìn)，對(duì)諾瓦克樣病毒感染的流行病學(xué)調(diào)查亦越來(lái)越深入，在美國(guó)等發(fā)達(dá)國(guó)家，諾瓦克病毒不但是造成急性胃腸炎暴發(fā)的首要病原，而且是兒童和成人散發(fā)病例的常見(jiàn)病因，在美國(guó)諾瓦克病毒胃腸炎已占到42％。19

7、90年1月至1991年5月，海灣戰(zhàn)爭(zhēng)中美國(guó)“沙漠風(fēng)暴”行動(dòng)中駐中東的883支部隊(duì)中61％的人出現(xiàn)過(guò)至少1次急性胃腸炎流行。使用諾瓦克抗原對(duì)不同癥狀的人進(jìn)行抽樣檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)抗體陽(yáng)性率分別為：無(wú)癥狀者3.0％，有癥狀者9.5％，其中單純嘔吐者23.5％，既嘔吐又腹瀉者12.0％，單純腹瀉者6.5％。在日本，冬季兒童病毒性胃腸炎的病原體主要是諾瓦克樣病毒和輪狀病毒，近年來(lái)，流行病學(xué)調(diào)查也顯示諾瓦克樣病毒感染率已超過(guò)輪狀病毒。,,我國(guó)未見(jiàn)有

8、諾瓦克病毒急性胃腸炎暴發(fā)流行的報(bào)道，但1996年和1997年分別在北京和太原開(kāi)展的人群血清標(biāo)本中的諾瓦克樣病毒特異性IgG抗體檢測(cè)表明，北京市諾瓦克樣病毒抗體總檢出率為88.8％以上。太原市總檢出率在78.6％以上。1998—2002在福州地區(qū)用RT-PCR方法對(duì)288份腹瀉患者糞便標(biāo)本諾瓦克樣病毒病原檢測(cè)顯示，諾瓦克樣病毒基因組I的陽(yáng)性率為11.1％，主要是7歲以上兒童及成人；諾瓦克樣病毒基因組Ⅱ的陽(yáng)性率為 28.8％，要是6月齡至3

9、歲嬰幼兒。,四、臨床表現(xiàn),各種諾瓦克樣病毒胃腸炎臨床表現(xiàn)與輪狀病毒相似。潛伏期 24—48h，可短至18h，長(zhǎng)至72h。起病突然，主要癥狀為發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹部痙攣性疼痛及腹瀉。大便為稀水便或水樣便，無(wú)粘液膿血，2h內(nèi)4—8次，持續(xù)12—60h，一般48h。兒童一般嘔吐多見(jiàn)，而年長(zhǎng)者腹瀉癥狀更嚴(yán)重?？砂橛蓄^痛、肌痛、咽痛等癥狀。病情多呈自限，不需用抗菌素，預(yù)后較好。對(duì)兒童及病情較重者，需住院補(bǔ)液、對(duì)癥治療。Nakamura等報(bào)道，在日

10、本暴發(fā)的1次644例成人諾瓦克樣病毒胃腸炎中，有15人出現(xiàn)眼睛不適，應(yīng)予注意。,五、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),(一)抗原檢測(cè)1、電鏡(EM)：諾瓦克病毒被發(fā)現(xiàn)后很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)，電鏡一直是檢測(cè)的主要手段，具有直接、可靠的優(yōu)點(diǎn)。但由于諾瓦克病毒組病毒在電鏡下缺乏顯著的形態(tài)學(xué)特征，且敏感性低、，價(jià)格昂貴、技術(shù)條件要求高，因此不適于大規(guī)模流行病學(xué)調(diào)查。2、酶鏈免疫法(ELISA)：此法特異性強(qiáng)，靈敏度高，診斷迅速，且較經(jīng)濟(jì)，是目前可廣泛應(yīng)用的檢測(cè)

11、方法。由于諾瓦克親病毒培養(yǎng)還未成功，原來(lái)用作試劑的病毒抗原數(shù)量受到限制?，F(xiàn)在，用分子生物學(xué)技術(shù)已經(jīng)可以人工重組NV的衣殼蛋白，ELISA的發(fā)展不再受糞便標(biāo)本中病毒數(shù)量的影響了。,,3、雜交技術(shù)和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)：除了能更準(zhǔn)確、靈敏地檢測(cè)標(biāo)本中的諾瓦克病毒，尤其是低濃度的諾瓦克病毒感染外，最大的優(yōu)點(diǎn)在于可以進(jìn)一步對(duì)病毒進(jìn)行血清型和基因型的研究，不會(huì)受到獲得分型單克隆抗體的限制，對(duì)流行病學(xué)研究具有重要意義。,,(二

12、)血清學(xué)檢測(cè)l、免疫電鏡法(1EM)：同樣可檢測(cè)出恢復(fù)期患者血清中的病毒，但靈敏度仍較低，限制了它的使用。2、放免(RIA)和生物素—親和素法：RIA法檢測(cè)抗原與IEM法相比，在靈敏度上沒(méi)有明顯差異，但用RIA法檢測(cè)出急性期和恢復(fù)期之間抗體升高4倍以上，對(duì)流行病學(xué)調(diào)查更有意義。 RIA法實(shí)驗(yàn)時(shí)間需6d，同時(shí)還需要放射性同位素標(biāo)記。美國(guó)疾病與控制中心(CDC)建立的生物素—親和素免疫法，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)方法，且靈敏度與RIA相當(dāng)，

13、成為檢測(cè)諾瓦克病毒抗原和抗體的標(biāo)準(zhǔn)方法。,六、預(yù)防,加強(qiáng)水源、食物的管理，切斷糞—口途徑等防治腸道傳染病的綜合措施是預(yù)防諾瓦克樣病毒胃腸炎暴發(fā)或流行的重要措施。 諾瓦克病毒的疫苗研制已取得重大進(jìn)展。用重組桿狀病毒表達(dá)的諾瓦克樣病毒的病毒樣顆粒作為疫苗，免疫小鼠和志愿者，均產(chǎn)生可檢測(cè)的血清抗體。應(yīng)用轉(zhuǎn)基因植物(煙葉、西紅柿或土豆)表達(dá)諾瓦克樣病毒樣顆粒，志愿者食用后，亦能檢測(cè)到針對(duì)諾瓦克病毒的IgG和slgA，提示這種轉(zhuǎn)基因植物可作為