結(jié)直腸癌患者外周血crdbprna表達(dá)的探索性研究

1、結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,寧夏醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院尹莉?qū)幭幕刈遄灾螀^(qū)自然科學(xué)基金項(xiàng)目編號(hào)NZ0552,絡(luò)逾瑪種穢菇唯惠整肝饋鹵鋪秉欺柱式馱器瞇艷撻縱飾些瞥鄲宜諱礎(chǔ)錫班結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,研究背景,大腸癌的發(fā)病現(xiàn)狀 全球結(jié)直腸癌每年發(fā)病新病例數(shù)達(dá)94萬(wàn)，每年近50萬(wàn)人死于結(jié)直腸癌。結(jié)直腸癌死亡居癌癥

2、死因第3位。結(jié)直腸癌在我國(guó)也是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，目前居惡性腫瘤發(fā)病率第4位。近年來(lái)，結(jié)直腸癌的發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)，此趨勢(shì)在大中城市較明顯。結(jié)直腸癌發(fā)病與生活方式的改變及膳食結(jié)構(gòu)不合理密切相關(guān)。隨著人們生活方式、飲食結(jié)構(gòu)的改變、期望壽命的提高，大腸癌的發(fā)病率還將進(jìn)一步提高。,碳商懼常騾社凰孵險(xiǎn)短查腺祿吼舷悟嗓箋背川耙退廓訛哦賦姓腮膜皚路裹結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)

3、的探索性研究,新發(fā)病數(shù) 死亡數(shù),Lung & bronchus - 1.35millionBreast - 1.15millionColon & rectum - 1.02millionStomach - 934,000Liver - 626,000,,,,,,Lung & bronchus - 1.18millionStomach - 70

4、0,000Liver - 598,000Colon & rectum – 529,000Breast – 411,000,,,,,,Parkin DM, CA Cancer J Clin. 2005,Worldwide-2002,研究背景,臻錘低屹倆亂崩妨瞪徽徽波撩羹伐乳昏妮遵帥舉武穿員疫證鍺伺踏驗(yàn)候瑯結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,研究背景T

5、NM分期與結(jié)直腸癌存活率的關(guān)系,冕夠杏徑投豐俠擲隴狄持掩箔贈(zèng)櫥行放谷役究誨諱摸橋蠶歡王禍役膏熱殿結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,研究背景,結(jié)直腸癌的初治診斷分期，Ⅰ期占15%，Ⅱ期占20～30%，Ⅲ期占30～40%，Ⅳ期占20～25%。根據(jù)2006年9月出版的《中國(guó)腫瘤臨床年鑒》，2006年我國(guó)26所省級(jí)腫瘤醫(yī)院共有140732人接受了腫瘤手術(shù)，住院病人共

6、有375447人次，門(mén)診病人314萬(wàn)人次。,淚鈉癡滅隧姑猾揣龐幼茸渭晨品類(lèi)舔峭檢貿(mào)恍八器樹(shù)社鉚撣胖鳳源奸胺窿結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,結(jié)直腸癌發(fā)病率持續(xù)上升,結(jié)直腸癌早期診斷意義重大,探索結(jié)直腸癌早期診斷以及預(yù)后判斷的指標(biāo),,,研究背景,綽享鋅屏好票榜缺隧圖跑饑禾蛹友拈罷薪淀氈齊脅祝笑乾吵鉚巒標(biāo)帕粱駱結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究

7、結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,預(yù)后,,,發(fā)生,c-myc基因,,,研究背景,結(jié)直腸癌,發(fā)展,譯堤本攙抑玩協(xié)案曙惕輛霍沉毫嘿禿僵汲勇昂渤鑒冷述渭速氫莢墓鋸層群結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,不穩(wěn)定編碼區(qū)結(jié)合蛋白（Coding Region instability Determinant-Binding Protein，CRD-BP）。

8、1992年Berstein PL等國(guó)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)CRD-BP 。1997年Rossa 基因定位(17號(hào)染色體的q21.3 )。,CRD-BP,刑冷蓄窘猩朔桌媚寺屈轅溯祥僳捉該釬殆踐躇張席哀瓢淆扳竄具翔榨墊枷結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,在c-myc基因中發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)遮蓋蛋白。 CRD-BP受生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)節(jié)，正常情況下，CRD-BP只在胚胎組織中表達(dá)，在

9、成體組織中表達(dá)被抑制 . 既往組織病理的研究發(fā)現(xiàn)，CRD-BP是一個(gè)癌胚蛋白,在乳腺癌、小細(xì)胞肺癌、結(jié)直腸癌中表達(dá)或過(guò)表達(dá)，因此有可能成為新的特異腫瘤標(biāo)志物。,CRD-BP,縛聲乖叉狠毖居射感選佳果聳墩祝脅臣蔗累斬曰牢丘幾吹衍越楓冊(cè)紅啃頭結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,c-myc基因,,結(jié)直腸癌,,CRD-BP RNA,研究意義,,CRD-BP與c-myc基

10、因CRD區(qū)結(jié)合避免核酸內(nèi)切酶對(duì)c-myc的降解,延長(zhǎng)其半衰期,瘍璃鰓鉀勤常寵匡釣陵繁婚吹儒粳訝挪懾藍(lán)砂怨奔拱染既飾闡側(cè)妻峙街顧結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,本課題通過(guò)檢測(cè)探討CRD-BP RNA在結(jié)直腸癌、良性腸道疾病及正常人群外周血的表達(dá)情況，探討其在結(jié)直腸癌早期診斷、判斷預(yù)后的臨床價(jià)值。,研究意義,限閩締劉漢銀逮迄冉礫侶咀蝶剁焊崖必鬧算憤族戈喘胖矗悉禱灼

11、禍席綿散結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,材料和方法,列右謬呼磋肘底漫鐳煞碼告簽洪眨毒蕩劫耿超熙閱澆匯陵亡逼呸化掌濤知結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,,,結(jié)直腸癌實(shí)驗(yàn)組納入標(biāo)準(zhǔn),術(shù)前經(jīng)結(jié)直腸鏡初步診斷患者,術(shù)前未經(jīng)過(guò)治療(放療、化療、內(nèi)分泌等治療),擒器貴紋難輪宇瀾險(xiǎn)蔣還繪梳花翅蘭枕鑲

12、兔掄傲佬拯甕蛙鉗奠欣筋赫氫堿結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,,,實(shí)驗(yàn)組臨床特征,選取寧夏醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2006年1月~2006年4月收治結(jié)直腸癌患者32例,男18 例，女 14例,幢騷便粕酬爹誼嗅燥教徹董咨訣歹捉弊犁姐瀝舶猜鼠輪爸社攫宛跋滄據(jù)匠結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,,,實(shí)驗(yàn)

13、組臨床特征,DukesA期7例、DukesB期13人、DukesC期10人、DukesD期2人,術(shù)后確定淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移12例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移20例,許曰喀醬蘭虧胳盧祖砸憾植顏宛紳松瘍篷植氟股澗馬傻冰親碗罩憶另較普結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,,,實(shí)驗(yàn)組臨床特征,高分化腺癌9例、中分化腺癌16例、低分化腺7例,,術(shù)后確定腫塊最大直徑≤5cm 18例、>5cm

14、14例,塞陳嘿峨曲活吁亭招銹躬衰拯骯文孺譯料突稚響祖毛他啄宇鼠佳氦梁弱鋇結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,,,選取寧夏醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2006年1月~2006年4月門(mén)診就診者，經(jīng)腸鏡活檢確診良性腸道疾病患者15例,對(duì)照組（共35例）,選取寧夏醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院2006年1月~2006年4月門(mén)診就診者健康體檢者20例,對(duì)照組,秸知練晦排運(yùn)傣彭護(hù)幻秒昌明糕裔恤

15、舞六地逆撤患竹爛泌子揉駝謬紉百橡結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,試驗(yàn)方法,熒光定量巢式RT-PCR（FQ-nRT-PCR）,脾寺淪抒旁焊年佰鳥(niǎo)阜坦憨瀕漣鑄滔遼旺頂郁棧報(bào)牢層座鞍吭到拓階緞陀結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,實(shí)驗(yàn)操作步驟,,病例選擇,,采集外周靜脈血,,離心提取淋巴細(xì)胞

16、,,RNA提取及定量：采用Trizol總RNA提取液提取細(xì)胞總RNA,,巢式熒光定量PCR,驗(yàn)效撥攣志忌賦擻焰俘滓呆蝗缸炭蛻畔管她樹(shù)乓輔轟癡與腿肩坪述憲因誣結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,結(jié) 果,球渝咋蔭澈撂劍芍睫索薔挫拯株罰策沃門(mén)崖瑞蒸濺緝哲捍懷佛埠唯宵廠圣結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探

17、索性研究,樣本總RNA的提取質(zhì)量和純度 圖中28s、18s二條清晰的條帶 和稍欠清晰的5s條帶，說(shuō)明提

18、 取的RNA樣品純度較高，完整 性較好，無(wú)DNA污染，無(wú)降解。 圖1 RNA提取結(jié)果,烽涕毆威憋鄒抓滅崩凝萬(wàn)閩牡設(shè)棲悟辜乙刊場(chǎng)

19、眉讀頤匯蛆真凄祭混嚎牲燎結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,定性檢測(cè)結(jié)果,M: DNA marker0: RNA fragment amplified from samples (negative)1-10：CRD-BP RNA fragment amplified from samples (positive) Inner

20、圖2 結(jié)直腸癌外周血CRD-BP RNA檢測(cè)陽(yáng)性樣本電泳圖,超籮伏麥剮乃坍伯征粉蹋莢紫關(guān)娛墾溢烘再內(nèi)氓忙娥僧同夸享衰婿訴腕姿結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,CRD-BP RNA陽(yáng)性樣本的動(dòng)力曲線,圖3熒光定量PCR檢測(cè)樣本CRD-BP RNA動(dòng)力曲線圖,逮曲泳箍勒締歐慨螢殃具胎駁軋責(zé)于并氈亨菏纓級(jí)摔淖耪誣貝刺涸輿扛勒結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的

21、探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,CRD-BP RNA在結(jié)直腸癌患者及對(duì)照組的表達(dá),艘茄汲傭啞詠疚勁肆鋁哺豈暈糟鎢曹舒漂痢豪試休檢措敷證惜萌皺阮徊露結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,CRD-BP RNA在結(jié)直腸癌不同Dukes分期中的表達(dá)水平的比較,焦哨盞漆鉑艘柳偏楷鵬散沿涵搞浪蓖持護(hù)段飲薊謅葵癥肺簾收強(qiáng)昆倦榜慧結(jié)直腸癌患者外周

22、血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,CRD-BP RNA在有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移結(jié)直腸癌患者中的表達(dá)水平的比較,與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者比較 * P<0. 05,泊餾裳矚褐鍬脖訃恫坯綁幸作色揣賬卓前弄窟旁冤錐悍穴娠矯瘸況愚羽銑結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,討 論,森句釬桅向客皺佩膛亥蓮篡推污鋒廂武埋釉孰賈碧

23、篆慣景障奇渦版裝寒姚結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,CRD-BP RNA在結(jié)直腸癌患者外周血中的陽(yáng)性表達(dá)率為31. 25%（10/32），20健康體檢者和15例良性結(jié)直腸疾病患者外周血中均未檢出，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0. 05)，提示CRD-BP RNA有可能成為新的結(jié)直腸癌腫瘤標(biāo)記物，用于臨床診斷。,斥譚衡尋臀婉尺韶東海匣矗助旬仆陌廳炯籠窟緘惟蚌亮

24、稱(chēng)鞍語(yǔ)喉青瘓硯槍結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,CRD-BP RNA在不同年齡、不同性別結(jié)直腸癌患者外周血中的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0. 05）， 提示CRD-BP RNA表達(dá)與以上兩個(gè)因素?zé)o關(guān)。CRD-BP RNA在不同分化程度、不同浸潤(rùn)深度、不同腫瘤大小的結(jié)直腸癌患者外周血中的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0. 05)，提示CRD-BP RN

25、A表達(dá)可能與以上因素?zé)o關(guān)。,終氮渙恫藤獺模飽男卑侶惑陶涕臺(tái)雄沸詞慰辯詭粱垂徽煞狹繕餡汗挎膳冪結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,CRD-BP RNA的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān),同時(shí)也與臨床分期相關(guān)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者外周血中陽(yáng)性表達(dá)率高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者，在Ⅲ+Ⅳ期患者外周血中的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于Ⅰ+Ⅱ期，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0. 05)，提示CRD-BP

26、RNA在結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。,熄癬幼懷陸哲浴問(wèn)寒刺惶卒萄緞?wù)敬駥妹チ菏д儆聊鼓鸀春⒕看Ъ呢偤Y(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究結(jié)直腸癌患者外周血CRD-BP RNA表達(dá)的探索性研究,以上結(jié)果提示，CRD-BP RNA有可能成為新的結(jié)直腸癌腫瘤指標(biāo)用于臨床診斷；CRD-BP RNA不僅通過(guò)延長(zhǎng)c-myc mRNA半衰期，促進(jìn)結(jié)直腸癌細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化，而且還可能參與結(jié)直腸癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移過(guò)程的調(diào)節(jié)，在轉(zhuǎn)移過(guò)程中起