血細(xì)胞分析項(xiàng)目質(zhì)量要求及性能驗(yàn)證

1、血細(xì)胞分析項(xiàng)目質(zhì)量要求及性能驗(yàn)證,,前言,本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)提出。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心、四川大學(xué)華西醫(yī)院、北京協(xié)和醫(yī)院。本標(biāo)準(zhǔn)起草人：彭明婷、周文賓、谷小林、李臣賓、吳際、陸紅、江虹、李建英。,范圍,本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目（全血細(xì)胞計(jì)數(shù)和凝血血試驗(yàn)）的分析質(zhì)量要求及驗(yàn)證方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于使用血液分析儀和血凝儀的臨床實(shí)驗(yàn)室、室間質(zhì)量評(píng)價(jià)

2、機(jī)構(gòu)或體外診斷企業(yè)的內(nèi)部質(zhì)量控制、外部質(zhì)量評(píng)價(jià)及檢測(cè)系統(tǒng)的性能驗(yàn)證,引用文件,下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。WS/T 407  醫(yī)療機(jī)構(gòu)內(nèi)定量檢驗(yàn)結(jié)果的可比性驗(yàn)證指南WS/T 408  臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南,,CLSI EP9-A2  用患者樣本進(jìn)行方法學(xué)比對(duì)及偏倚評(píng)估：批準(zhǔn)

3、指南～第二版（Method comparison and bias estimation using patient samples: Approved guideline-Second edition,下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。,1、驗(yàn)證 verification 提供客觀證據(jù)以認(rèn)定規(guī)定要求得到滿(mǎn)足。,,2、攜帶污染 carryover 由測(cè)量系統(tǒng)將一個(gè)檢測(cè)樣品反應(yīng)攜帶到另一個(gè)檢測(cè)樣品反應(yīng)的分析物不連續(xù)的量

4、，由此錯(cuò)誤地影響了另一個(gè)檢測(cè)樣品的表現(xiàn)量。,,3、精密度 precision 在規(guī)定的條件下，獨(dú)立檢測(cè)結(jié)果間的一致程度，精密度的度量通常以不精密度表示。,,4、不精密度 imprecision 同一實(shí)驗(yàn)室用同種方法在多次獨(dú)立檢測(cè)中分析同一樣品所得結(jié)果的離散程度。,,5、批內(nèi)精密度 within-run precision 在相同的檢測(cè)條件下，對(duì)同一被測(cè)物進(jìn)行連 續(xù)測(cè)量所得結(jié)果間的一致程度。注

5、：批內(nèi)精密度又稱(chēng)為重短性。,,6、日間精密度 inter-day precision 在不同天內(nèi)對(duì)同一被測(cè)物進(jìn)行重復(fù)測(cè)量所得結(jié)果間的一致程度。,,7、線性 linearity 檢測(cè)樣本時(shí)，在一定范圍內(nèi)可以直接按比例關(guān)系得出分析物含量的能力。,,8、正確度 trueness 一系列檢測(cè)結(jié)果的均值與靶值之間的一致程度，以偏倚表示。,,9、偏倚 bias 同一實(shí)驗(yàn)室用同種方法在多次

6、獨(dú)立檢測(cè)中分析同一樣品所得結(jié)果的均值與靶值之間的差異。 注1：靶值可以是參考方法測(cè)定值、有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)定值或其他適當(dāng)定值，如室間質(zhì)量評(píng)價(jià)計(jì)劃的統(tǒng)計(jì)值。 注2：偏倚一般通過(guò)分析有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及其他適當(dāng)參考物質(zhì)、與參考方法或已知正確度的其他方法（如公認(rèn)的指定比對(duì)方法）比對(duì)而獲得。 注3：偏倚可用絕對(duì)值或相對(duì)值表示。 注4：偏倚有方向性，即可能是正偏倚或負(fù)偏倚。,,10、準(zhǔn)確度 accuracy 單次檢測(cè)結(jié)果與參考值間的一致程度

7、，以 誤差表示。,,11、總誤差 total error 實(shí)驗(yàn)室用某方法在多次獨(dú)立檢測(cè)中分析某 樣品所得各個(gè)結(jié)果值與靶值之差在一定置 信區(qū)間內(nèi)的最大允許范圍。,,12、可比性 comparability 使用不同的檢測(cè)程序測(cè)定某種分析物獲得的檢測(cè)結(jié)果間的一致性。結(jié)果間的差異不超過(guò)規(guī)定的可接受標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，可認(rèn)為結(jié)果具有可比性。,全血細(xì)胞計(jì)數(shù)的分析質(zhì)量要求及驗(yàn)證方法,1 本底計(jì)數(shù)1.1 本底

8、計(jì)數(shù)檢測(cè)要求血液分析儀本底計(jì)數(shù)各參數(shù)的結(jié)果應(yīng)符合表1的要求。,,表1 血液分析儀本底計(jì)數(shù)的檢測(cè)要求,5.1.2 驗(yàn)證方法用稀釋液作為樣本在分析儀上連續(xù)檢測(cè)3次，3次檢測(cè)結(jié)果的最大值應(yīng)在允許范圍內(nèi)。,,2 攜帶污染2.1 攜帶污染檢測(cè)要求血液分析儀的攜帶污染率應(yīng)符合表2的要求。,,表2 血液分析儀攜帶污染檢測(cè)要求,,2.2 驗(yàn)證方法 分別針對(duì)不同檢測(cè)項(xiàng)目，取一份高濃度的臨床樣本（EDTA-K2或EDTA-K3抗凝靜脈血）

9、，混合均勻后連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為H1、H2、H3； 再取一份低濃度的臨床樣本，混合均勻后連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為L(zhǎng)1、L2、L3。按式（l）計(jì)算攜帶污染率。,,式中：CR -攜帶污染率；L1 -低濃度臨床樣本的第1次測(cè)定值； L3——低濃度臨麻樣本的第3次測(cè)定值； H3——高濃度臨床樣本的第3次測(cè)定值。,,2.3 臨床樣本濃度要求 不同檢測(cè)項(xiàng)目所選高、低濃度樣本的濃度水平應(yīng)符合表3的要求

10、。,,表3 攜帶污染率驗(yàn)證樣本的濃度要求,,3 批內(nèi)精密度3.1 批內(nèi)精密度檢測(cè)要求 批內(nèi)精密度以連續(xù)檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，批內(nèi)精密度應(yīng)達(dá)到廠家說(shuō)明書(shū)的要求，檢測(cè)正常濃度水平新鮮血的批內(nèi)精密度至少應(yīng)符合表4的要求。,,表4 批內(nèi)精密度檢測(cè)要求,,3.2 驗(yàn)證方法 取一份濃度水平在上述檢測(cè)范圍內(nèi)的臨床樣本，按常規(guī)方法重復(fù)檢測(cè)11次，計(jì)算后10次檢測(cè)結(jié)果的算術(shù)平均值和標(biāo)準(zhǔn)差，按照式（2）計(jì)算變異系數(shù)。,,式中：CV

11、-變異系數(shù)；s——標(biāo)準(zhǔn)差；,——算數(shù)平均值。,,4 日間精密度4.1 日間精密度檢測(cè)要求 日間精密度以室內(nèi)質(zhì)控在控結(jié)果的變異系數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，日間精密度應(yīng)符合表5的要求。,,表5 日間精密度檢測(cè)要求,,4.2 驗(yàn)證方法 至少使用兩個(gè)濃度水平（包含正常和異常水平）的質(zhì)控品，在檢測(cè)當(dāng)天至少進(jìn)行一次室內(nèi)質(zhì)控，剔除失控?cái)?shù)據(jù)（失控結(jié)果已得到糾正）后按批號(hào)或者月份計(jì)算在控?cái)?shù)據(jù)的變異系數(shù)。,,5 線性

12、5.1 線性驗(yàn)證檢測(cè)要求 線性回歸方程的斜率在1±0. 05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r≥0.975或r2≥0.95。 WBC、RBC、Hb和Plt項(xiàng)目滿(mǎn)足要求的線性范圍在廠家說(shuō)明書(shū)規(guī)定的范圍內(nèi)。5.2 驗(yàn)證方法 驗(yàn)證方法參照《臨床化學(xué)設(shè)備線性評(píng)價(jià)指南》 （制定過(guò)程中）,,6 正確度6.1 偏倚 正確度驗(yàn)證以偏倚為評(píng)價(jià)指標(biāo)，偏倚應(yīng)符合表6的要求。,,表6 正確度驗(yàn)證

13、的允許偏倚,,6.2 驗(yàn)證方法 至少使用10份檢測(cè)結(jié)果在參考區(qū)間內(nèi)的新鮮血樣本，每份樣本檢測(cè)兩次，計(jì)算20次以上檢測(cè)結(jié)果的均值。 以校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室的定值或臨床實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部規(guī)范操作檢測(cè)系統(tǒng)（如使用配套試劑、用配套校準(zhǔn)物定期進(jìn)行儀器校準(zhǔn)、儀器性能良好、規(guī)范地開(kāi)展室內(nèi)質(zhì)量控制、參加室間質(zhì)量評(píng)價(jià)成績(jī)優(yōu)良、檢測(cè)程序規(guī)范、人員經(jīng)過(guò)良好培訓(xùn)的檢測(cè)系統(tǒng)）的測(cè)定均值為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算偏倚。,,7 不同吸樣模式的結(jié)果可比性7.1 

14、適用條件使用不同吸樣模式檢測(cè)樣本并報(bào)告結(jié)果時(shí)。,,7.2 可比性要求 同一臺(tái)血液分析儀不同吸樣模式的結(jié)果可比性應(yīng)符合表7的要求。,,表7 血液分析儀不同吸樣模式的結(jié)果可比性要求,,7.3 驗(yàn)證方法 每次校準(zhǔn)后，取5份臨床樣本分別使用不同模式進(jìn)行檢測(cè)，每份樣本各檢測(cè)兩次，分別計(jì)算兩種模式下檢測(cè)結(jié)果均值間的相對(duì)差異，結(jié)果應(yīng)符合表7的要求。,,8 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的結(jié)果可比性8.1 偏差 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)

15、的結(jié)果可比性以相對(duì)偏差為評(píng)價(jià)指標(biāo)，相對(duì)偏差應(yīng)符合表8的要求。,,表8 檢測(cè)項(xiàng)目濃度范圍樣本數(shù)量 所占比例相對(duì)偏差,續(xù)表8,續(xù)表8,,,8.2 驗(yàn)證方法8.2.1 新儀器使用前，配套檢測(cè)系統(tǒng)至少使用20份臨床樣本（濃度要求見(jiàn)表8），每份樣本分別使用臨床實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部規(guī)范操作檢測(cè)系統(tǒng)和被比對(duì)儀器進(jìn)行檢測(cè)，以?xún)?nèi)部規(guī)范操作檢測(cè)系統(tǒng)的測(cè)定結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算相對(duì)偏差，每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的相對(duì)偏差符

16、合表8要求的比例應(yīng)≥80%。,,8.2.2 新儀器使用前，非配套檢測(cè)系統(tǒng)按CLSI頒布的EP9-A9文件與配套檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行比對(duì)，至少使用40份臨床樣本（濃度要求見(jiàn)表8），計(jì)算相對(duì)偏差，每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的相對(duì)偏差符合表8要求的比例應(yīng)≥80%。然后再按5.8.2.1的方法進(jìn)行驗(yàn)證。,,8.2.3 常規(guī)檢測(cè)儀器使用過(guò)程中，至少使用20份臨床樣本（血細(xì)胞計(jì)數(shù)項(xiàng)目所選標(biāo)本的濃度水平應(yīng)符合表8的要求，其他檢測(cè)項(xiàng)目所選標(biāo)本應(yīng)含正常、異常濃度水平各占50%

17、;比對(duì)可分次進(jìn)行）定期（至少半年）進(jìn)行一次結(jié)果比對(duì)，每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的相對(duì)偏差符合表8要求的比例應(yīng)≥80%。,,8.2.4 以下情況，可按WS/T 407的方法和要求進(jìn)行比對(duì)：a） 室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果有漂移趨勢(shì)時(shí)；b） 室間質(zhì)評(píng)結(jié)果不合格，采取糾正措施后；c） 更換試劑批號(hào)（必要時(shí)）；d） 更換重要部件或重大維修后；e） 軟件程序變更后；f）  臨床醫(yī)生對(duì)結(jié)果的可比性有疑問(wèn)時(shí)；g） 患者投訴對(duì)

18、結(jié)果可比性有疑問(wèn)（需要確認(rèn)時(shí)）；h） 需要提高周期性比對(duì)頻率時(shí)（如每季度或每月一次）。,比對(duì)樣本,樣本類(lèi)型 臨床標(biāo)本：首選比對(duì)物質(zhì) 其他物質(zhì)：室間質(zhì)評(píng)或其他參考物質(zhì)樣本濃度水平 需已知比對(duì)物質(zhì)不同濃度水平對(duì)應(yīng)的結(jié)果 不精密度 至少檢測(cè)兩個(gè)濃度水平（正常和異常水平）,比對(duì)結(jié)果不符合要求的處理措施,維持結(jié)果的可比性需要以檢測(cè)系統(tǒng)各質(zhì)量控制環(huán)節(jié)標(biāo)準(zhǔn)化操作為前提，必要時(shí)通過(guò)校準(zhǔn)

19、改善結(jié)果的可比性即不同檢測(cè)系統(tǒng)通過(guò)結(jié)果的數(shù)字轉(zhuǎn)換獲得結(jié)果的一致性。結(jié)果不可比且難以糾正時(shí)，應(yīng)與臨床進(jìn)行溝通，用不同的參考區(qū)間和/或醫(yī)學(xué)決定水平并在檢驗(yàn)報(bào)告單上明確標(biāo)識(shí)。,比對(duì)樣本的濃度范圍和檢測(cè)次數(shù),以質(zhì)控品總均值±20%作為比對(duì)樣本的濃度選擇范圍 依據(jù)合并CV值，查找附錄A的表A.1，確定比對(duì)樣本的重復(fù)檢測(cè)次數(shù),,9 準(zhǔn)確度9.1 總誤差 準(zhǔn)確度驗(yàn)證以總誤差為評(píng)價(jià)指標(biāo)，用相對(duì)偏差表示，相對(duì)偏