感染免疫、腫瘤標志物檢查

1、臨床免疫學,吉林大學第一醫(yī)院黃晶,一 病毒性肝炎血清標志物檢查 甲肝病毒(HAV) 乙肝病毒(HBV) 丙肝病毒(HCV) 丁肝病毒(HDV) 戊肝病毒(HEV) 庚肝病毒(HGV) 輸血傳播病毒（TTV)二 HIV抗體的實驗室檢測三 梅毒的實驗室檢測,第一節(jié) 感染免疫檢測,病毒性肝炎標志物：肝炎病毒本身、組成該病毒的成份及抗病毒的抗體等總稱。,一 病毒性肝炎

2、血清標志物檢查376,甲型肝炎病毒標志物: 甲肝抗體(抗-HAV)【參考值】 陰性【臨床意義】抗-HAV IgM陽性表示近期感染過HAV，抗-HAV IgG陽性表示曾經(jīng)感染過HAV，見于甲肝恢復(fù)期。,（一）HAV標志物檢測,（二）HBV標志物檢測,,pre-S1 pre-S1蛋白pre-S2 pre-S2蛋白S HBsAgpre-C HBeAgC

3、 HBcAgP DNAP,Dane顆粒（完整的病毒）形態(tài),（1）乙肝血清學（二對半） HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb HBcAg PreS1,（二）HBV標志物檢測,（2） HBV–DNA測定PCR法,,參考值：陰性,【臨床意義】1. 急性HBV感染可靠的診斷指標2. HBV–DNA與血清學結(jié)果的評價,【臨床

4、意義】 3.抗病毒療效觀察 4.篩查獻血隊員 5.檢測疫苗安全性,HbsAg HbsAb HbeAg HbeAb HbcAb 臨床意義 + - + - - 活躍期，傳染性強 + - - - + 攜帶

5、者/感染早期 + - - + + 趨向恢復(fù)/傳染性弱 - + - - + 既往感染/恢復(fù)期 - - - + + 感染恢

6、復(fù)期  - - - - + 窗口期/既往感染 - + - - - 感染恢復(fù)期/疫苗 - + - + + 感

7、染恢復(fù)期/潛在感 染后有免疫力 + + - + + HBsAg變異,（三） HCV標志物檢測,【方法】ELISA、RIA、HCV RNA【參考值】陰性【臨床意義】1.抗HCV陽性－

8、HCV感染標志 2.抗HCV-IgM陽性－急性丙肝3.抗HCV-IgG陽性－慢性丙肝4.HCV RNA陽性－病毒復(fù)制活躍,抗-HCV免疫測定試劑的陽性判斷標準,抗HCV篩查及確認試驗結(jié)果的解釋,（四） HDV標志物檢測 HDAg、抗-HDV IgG和IgM檢測【參考值】陰性【臨床意義】 1.抗-HDV IgM — 急性感染 2.抗-HDV IgG — 慢性感染,（五） HEV標志物檢測 戊型肝炎病毒標志

9、物:戊肝抗體(抗-HEV) 【參考值】 陰性 【臨床意義】 1.抗-HEV IgM陽性表示近期感染HEV 2.抗-HAV IgG陽性表示戊型肝炎恢復(fù)期（六） HGV標志物監(jiān)測（七） TTV標志物監(jiān)測,【篩選試驗】 膠體金法、ELISA【確診試驗】 WESTEN BLOT 、RT-PCR【參 考 值】 陰性【臨床意義】 診斷AIDS 流行病普查,二、HIV抗體（Human Im

10、munodeficiency Virus）,HIV 病毒及基因結(jié)構(gòu),HIV感染窗口期,HIV進入人體后，需要經(jīng)過一段時間血液才會產(chǎn)生HIV抗體，在此期間抗體檢測呈陰性，這段時間即為窗口期。窗口期HIV感染者病毒復(fù)制水平高，傳染性強。,三、梅毒螺旋體抗體檢測,【定性試驗】快速血漿反應(yīng)素試驗（Rapid Plasma Reagin test，RPR）【確診試驗】梅毒螺旋體血清試驗（ Treponemal Pallidum

11、 Hemagglutination Test, TPHA）【參考值】 RPR、TPHA均陰性,三、梅毒螺旋體抗體檢測,梅毒螺旋體反應(yīng)素試驗,1 - 原倍陽性血清 2 - 1∶2 稀釋血清3 - 1∶4 稀釋血清4 - 1∶8 稀釋血清5 - 1∶16 稀釋血清6 - 1∶32 稀釋血清7 - 1∶64 稀釋血清8 - 1∶128 稀釋血清,梅毒螺旋體抗原血清試驗,【臨床意義】1. RPR（+）→TP

12、HA（+）→梅毒2. RPR（-）→TPHA（+）→感染過梅毒3. RPR（+）→TPHA（-）→進一步觀察→TPHA （-）→排除 ↘ TPHA（+）→確診 4.RPR（+）可見于SLE、IM、TB、PSS,四、TORCH病毒抗體檢測,弓形蟲（Toxoplasma，TOXO）風疹病毒（Rubella Virus，RV）巨細胞病毒（Cytomeg

13、alovirus，CMV）單純皰疹病毒（Herpes Virus，HSV）或其他原因（Others）,四、TORCH病毒抗體檢測349,【參考值】IgM（-），IgG（-） 【臨床意義】1.IgM+、IgG+：早期感染過體內(nèi)有抗體，近期復(fù)發(fā)感染，應(yīng)終止妊娠。2.IgM+、IgG-： 急性期初次感染，危險性極高，應(yīng)終止妊娠。3.IgM-、IgG+ ：早期感染過，體內(nèi)有抗體，有一定免疫力；4.IgM-、IgG-： 無感染史，

14、體內(nèi)無抗體，無免疫力。,第二節(jié) 腫瘤標志物檢測333,【定義】 腫瘤細胞合成、釋放或由機體對腫瘤細胞反應(yīng)異常產(chǎn)生的一類反映腫瘤存在物質(zhì)。,1.甲種胎兒球蛋白（alpha fetoprotein, APF) α-巖藻糖苷酶（alpha fucosidase, AFU),【參考范圍】 APF＜25μg/L; AFU（3-11U/L)【臨床意義】 原發(fā)性肝細胞癌；生殖腺胚胎癌； 胃癌；胰腺癌；病

15、毒性肝炎；肝硬化； 婦女妊娠3個月后APF開始升高， 7-8個月達到高峰，分娩后3周恢復(fù)正常。,2.癌胚抗原(carcinoembryonic antigen， CEA),【參考范圍】 EIA 、RIA 參考值＜5μg/L【臨床意義】(1)消化道惡性腫瘤：整個胃腸道惡性腫瘤(2)非消化道惡性腫瘤：如卵巢癌、乳腺癌、肺癌 (3)非腫瘤性疾病增高：良性腫瘤、大量吸煙、妊娠,3.癌抗原125（cancer antigen

16、125, CA-125） 人附睪蛋白4(HE4)4.癌抗原15-3（cancer antigen15-3, CA15-3）5.糖鏈抗原19-9（CA19-9）6.糖鏈抗原72-4（CA72-4） 胃蛋白酶元I、II,7.前列腺特異性抗原 (Prostate specific antigen，PSA) 前列腺特異磷酸酶（Prostatic acid phosphatase，PAP）8.鱗狀細胞癌抗原（squamo

17、us cell carcinoma, SCC)10.神經(jīng)元特異性烯醇(neuronspecificenolase，NSE)11.細胞角蛋白19片斷（CYFRA21-1)12.人絨毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,hCG),第三節(jié) 細胞免疫檢測309,（一）T細胞分化抗原檢測 - 免疫熒光法【原理】 流式細胞術(shù),【參考值】CD3 (69.40±4.86)% CD4 (41.1

18、7±5.28)% CD8(24.58±4.02)% CD4/CD8 0.9-2.0,一 細胞表型分析,（一）T細胞分化抗原檢測,【臨床意義】1 T細胞總數(shù)的變化（CD3） CD3↓見于： 免疫缺陷病 自身免疫病 病毒感染 惡性腫瘤 應(yīng)用免疫抑制劑,,（一）T

19、細胞分化抗原檢測,2 T細胞亞群的變化CD4↓見于：免疫缺陷病，病毒感染，惡性腫瘤，應(yīng)用免疫抑制劑CD8↓見于：自身免疫病CD4 /CD8↓：AIDS3 CD3↑CD4↑CD8↑，同時伴CD2↑ CD5↑ CD7↑，應(yīng)考慮急性T淋巴細胞白血病。,,（二）B細胞分化抗原測定,【參考值】 CD19陽性率（11.74±3.73）%【臨床意義】（1）CD19↑見于B細胞惡性增殖性疾病，如急淋、慢淋、多發(fā)性骨髓

20、等。（2）CD19↓見于體液免疫缺陷病，如無丙種球蛋白血癥，化療或應(yīng)用免疫抑制劑,（一） 玫瑰花結(jié)形成實驗,【參考值】 64.4±6.7%,二 細胞功能測定,【原 理】 T細胞 --- ConA或(PHA) --- 淋巴母細胞【參考值】 (60.1±7.6)% （形態(tài)學計數(shù)法） SI＞2 （H3摻入法或MTT法）【臨床意義】1.判定機體細胞免疫功能水平淋轉(zhuǎn)率↓見于

21、 a 細胞免疫缺陷 b 細胞免疫功能↓：惡性腫瘤、免疫缺陷病、自身免疫病 病毒感染、應(yīng)用免疫抑制劑2.估計疾病療效及預(yù)后,（二）T細胞功能檢測,（三）NK細胞活性測定,1 胞質(zhì)乳酸脫氫酶釋放法 【參考值】細胞毒指數(shù)：27.5%-52.5%2 51Cr釋放法 【參考值】自然殺傷率：47.6%-76.8% 【臨床意義】 (1)NK細胞活性↑：病毒感染早期、抗移植排斥反應(yīng)、應(yīng)用干擾素。