豬人工授精

1、豬人工授精－實驗室關(guān)鍵技術(shù),中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院朱士恩zhushien@cau.edu.cnTel: 010-627317672007.04.26,報告內(nèi)容,豬人工授精的歷史及現(xiàn)狀,豬人工授精的實驗室設(shè)備,豬人工授精的意義,豬精液的人工采集,豬精液的品質(zhì)檢查,豬精液的保存處理,豬精液處理后輸精,,,,,,,,豬人工授精的歷史及現(xiàn)狀,豬人工授精的意義,豬人工授精的實驗室設(shè)備,豬精液的采集,采集前的準(zhǔn)備工作,豬精液采精的方法,,

2、,精液采集前的準(zhǔn)備工作,實驗室的準(zhǔn)備,精液稀釋液準(zhǔn)備,操作人員的準(zhǔn)備,采精器皿的準(zhǔn)備,檢測儀器的準(zhǔn)備,分裝器皿的準(zhǔn)備,采精公豬的準(zhǔn)備,,,,,,,,豬的人工采精方法,電刺激采精法,手握采精法,假陰道采精法,,,,手握采精法,豬精液的品質(zhì)檢查,品質(zhì)檢查的目的,精液顯微鏡檢查,精液外觀檢查,,,,精液的外觀檢查,顏 色,,,乳白色或淺灰色呈云霧狀,綠色、黃色 淺紅色、紅褐色,,氣 味,,,略帶腥味,惡臭等異常氣味

3、,,pH 值,,,正常精液pH值為 7.0~7.8,pH值越低, 精子密度越大,,采精量,,,電子天平稱量法按1g = 1 ml計,射精量為200~500 ml,,正常,正常,異常,異常,精液的顯微鏡檢查,精子活率檢查,精子畸形率檢查,精子密度檢查,,,,精子活率檢查,與受精能力相關(guān),,,精子活率,精液品質(zhì)的指標(biāo),,,按0.1~1.0的十級評分法進行評估,,,目測估測法,,,,活率要求,,,精子密度檢查,估測法,,,精子密度儀

4、法,,,血細胞計數(shù)法,,,,,,,,,主觀性強，誤差大,最準(zhǔn)確，但速度慢,滴上1滴稀釋精液,原精液200μL,3%NaCl稀釋10倍,計數(shù)板上放蓋玻片,計數(shù)5個中方格精子,將該數(shù)乘以50萬,,,,,方便、時間短、重復(fù)性好,豬精子密度一般為2~3億/ml生產(chǎn)上主要以精子密度儀法檢測,,,,,精子計數(shù),注意：讓稀釋后的精液通過毛細作用自行吸入！,用吸管稀釋后精液注入計數(shù)室,共有兩個對稱的計數(shù)室,精子計數(shù),精子計數(shù)室及一個中方格,,,精子計

5、數(shù)方法,,,,,,,,以圖示次序計數(shù)，精子的頭部為準(zhǔn)，依數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左右不數(shù)右的原則進行計數(shù)格線上的精子。白色精子不計數(shù),計算公式,1ml原精液內(nèi)的精子數(shù)＝5個中方個數(shù)的精子數(shù)×5 ×10 ×1000 ×稀釋倍數(shù) （如為原精液不× 稀釋倍數(shù)）,精子畸形率檢查,儀器觀察精子活力及膜的完整性,豬精液的保存處理,精液的稀釋,,,,,,,,,,,采精量200 ml, 活率0.8, 密度2億

6、/ ml, 每個輸精劑量含40億/100 ml?？偩訑?shù)=200 ml × 2億/ ml =400億稀釋份數(shù)=400億× 0.8/40億=8份需稀釋液=8×100 ml -200 ml =600 ml,精液的分裝,分裝簡單方便,,用于冷凍保存,,輸精方便，但需分裝機,,稀釋后分裝的豬精液,精液的保存,生產(chǎn)上：常溫17℃,,精液的冷凍及解凍方法 (Westendorf et al. 設(shè)計， Bwang

7、a et al 改進),置于冷凍支架并移入程序冷凍儀（5℃）,3 ℃/min， 5 ℃ → -5℃，保持 1 min結(jié)晶,50℃/min， -5℃ → -140℃，液氮儲存,5ml扁平袋: 50 ℃，13 s,5ml 細管: 50 ℃ ， 40 s,0.5ml 細管: 50 ℃，12 s或37 ℃, 20s,,,,精液的運輸,,輸精,輸精的時間,輸精的方法,填寫輸精記錄,,,,人工授精（Artifical insemination：A

8、I）,借助于專門的器械，用人工的方法采取公畜精液，經(jīng)體外檢查與處理后，再輸入發(fā)情母畜的生殖道內(nèi)，使其受胎的一種繁殖技術(shù)。人工授精技術(shù)包括： 采精?精液品質(zhì)評定?稀釋?保存?運輸?輸精等環(huán)節(jié)。,輸精的時間,豬發(fā)情癥狀與人工授精最佳時間,受精率： 靜立前一天：10%；靜立第一天：70%；靜立第二天：98%；靜立第三天：15%最佳時間：靜立后12~24h,輸 精 方 法,宮頸輸精法,,豬人工授精,精子在母畜生殖道運

9、行中的損耗,,射精后的精子在母畜生殖道內(nèi)要通過三道屏障：子宮頸?子宮腺窩與宮管結(jié)合部?壺峽連接部,精子在受精前的準(zhǔn)備（精子獲能與頂體反應(yīng)）,精子在母畜生殖道內(nèi)存活時間和維持受精能力的時間,各種家畜精液的稀釋倍數(shù)和輸精劑量,凍精解凍和輸精過程中應(yīng)注意的事項,解凍水浴溫度應(yīng)為39℃適宜;三防( 寒、熱、光 )，一快( 輸精時間 );保證有效精子數(shù)( 活率>0.3 );嚴格操作規(guī)程( 衛(wèi)生、消毒、禁止吸煙、解凍方式要規(guī)范 )