胡付品不常見藥敏結果閱讀_第1頁
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1、不常見細菌耐藥表型結果探討,胡付品華山醫(yī)院抗生素研究所,藥物敏感性試驗方法,稀釋法試管稀釋法(肉湯稀釋法)平板稀釋法(瓊脂稀釋法)微量肉湯稀釋法擴散法(紙片法)Kirby-bauer(K-B)法E-test自動化儀器,紙片擴散法,原理:將浸有抗菌藥物的紙片貼在涂有細菌的瓊脂平板上,抗菌藥物在瓊脂內(nèi)向四周擴散,因此敏感細菌在紙片周圍一定距離內(nèi)的生長受到抑制。,如何制備菌懸液?,正確測量苯唑西林、萬古霉素和利奈唑胺對葡萄球菌

2、;以及萬古霉素對腸球菌的抑菌圈直徑,透射光,反射光,,,不要用反射光,要使用透射光,,大腸埃希菌污染腸球菌;菌落再次純分,銅綠假單胞菌有耐藥菌落,抑菌圈內(nèi)有菌落,怎么辦?,,第1問:如何解釋阿米卡星對大腸埃希菌的抑菌現(xiàn)象?,阿米卡星,厄他培南,J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131,,藥物:青霉素G細菌:β-溶血性鏈球菌,矛盾的現(xiàn)象 (Eagle現(xiàn)象),指抗菌藥物在高濃度的時候反而降低殺菌活性這種

3、現(xiàn)象第一次由Eagle和Musselman兩位科學家發(fā)現(xiàn)并報道。青霉素類抗菌藥物在作用于葡萄球菌、β溶血性鏈球菌以及腸球菌時出現(xiàn)藥物低濃度(仍超過MIC值)時抗菌活性好于高濃度。,J. Exp. Med., Jul 1948; 88: 99 - 131,第2問:金黃色葡萄球菌D試驗,erm基因編碼改變的核糖體結構(23S rRNA甲基化),導致對大環(huán)內(nèi)酯類和林可霉素類耐藥。erm 基因需誘導,紅霉素具誘導作用。若出現(xiàn)紅霉素R而克林

4、霉素S,但D試驗陽性。若未進行D試驗,克林霉素很可能會被報告敏感而誤導臨床用藥。,第3問:如何解釋萬古霉素E-試驗結果?,萬古霉素依賴的糞腸球菌長期使用包括糖肽類、氨基糖肽類等抗生素壓力下,必須依賴萬古霉素才能生長,The change at the ninth codon resulted in the inactivation of the ddl gene andvancomycin-dependent growth.,第4

5、問:銅綠假單胞菌對復方新諾明天然耐藥?,,,,,,第4問:銅綠假單胞菌對復方新諾明天然耐藥?,2011年CHINET監(jiān)測6981株克雷伯菌屬耐藥率(%),,第5問:肺炎克雷伯菌體外藥敏結果會顯示對氨芐西林敏感嗎?,,肺炎克雷伯菌對氨芐西林天然耐藥是天然產(chǎn)SHV型酶,160株肺桿中20株對氨芐西林敏感19株細菌SHV基因出現(xiàn)“點突變”,mRNA 逆轉(zhuǎn)錄失敗,無法翻譯出由SHV基因正確編碼的β-內(nèi)酰胺酶。,第6問:大腸埃希菌對頭孢噻肟的耐

6、藥機制?,,第7問:如何解釋大腸埃希菌對頭孢唑啉S但頭孢呋辛R的現(xiàn)象?,頭孢呋辛,頭孢唑林,頭孢呋辛酶可水解頭孢呋辛但不能水解頭孢唑啉,第8問:大腸埃希菌紙片法藥敏結果,結果可能嗎?頭孢唑林 S 頭孢他啶R,第9問:這株大腸埃希菌可能的耐藥機制是什么?,第10問:這株銅綠假單胞菌可能的耐藥機制是什么?,可能的機制:1、膜孔蛋白缺失:導致亞胺培南耐藥2、AmpC酶:對頭孢西丁耐藥3、ESBL:對頭孢他啶和頭孢吡肟耐藥,產(chǎn)

7、ESBL菌株的檢測,含酶抑制劑復合制劑與相應單藥抑菌圈直徑相差≥5mm,即判斷該菌為產(chǎn)ESBLs菌株,,,,MIC比值,假陽性結果,,,,第12問:如何解釋這株大腸埃希菌的藥敏結果?,耐藥阿莫西林、哌拉西林、頭孢噻吩、頭孢呋辛、頭孢哌酮阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦、頭孢哌酮/舒巴坦敏感頭孢噻肟、頭孢他啶,第12問:如何解釋這株大腸埃希菌的藥敏結果?,ESBL確證試驗陰性本株細菌產(chǎn)生TEM-1型β內(nèi)酰胺酶、膜孔蛋白缺

8、失。頭孢西丁的耐藥性可能是由膜孔蛋白缺失所致,而非β-內(nèi)酰胺酶Pa/Pb調(diào)控TEM-1b高表達所致,強啟動子Pa/Pb是由弱啟動子P3經(jīng)32CC→T突變而成,第13問:腸桿菌科細菌對頭孢西丁耐藥就表示細菌產(chǎn)AmpC 酶嗎?,腸桿菌科細菌對頭孢西丁耐藥只能表示該菌是產(chǎn)AmpC 的可疑菌株。某些類型的ESBL 也能水解頭孢西丁,2009年14家醫(yī)院大腸埃希菌的耐藥率(%)(CHINET監(jiān)測),,第14問:改良Hodge試驗陽性就是產(chǎn)K

9、PC酶?,,改良Hodge試驗檢測假陽性結果,,,,,Figure 1. Phenotypic carbapenemase detection by MHT 1、K. pneumoniae ATCC BAA-1705, positive result2、K. pneumoniae ATCC BAA-1706, negative result3、CTX-M-producing K. pneumoniae clinical isola

10、te4、KPC-producing K. pneumoniae clinical isolate,ETP,MEM,,,改良Hodge試驗檢測假陰性結果,,,,,,第15問:這株大腸埃希菌對厄他培南可能的耐藥機制是什么?,1. 厄他培南:13 mm2. 厄他培南+APB14 mm3. 厄他培南+EDTA14 mm4. 亞胺培南:30 mm5. 頭孢吡肟:12 mm,第16問:這株大腸埃希菌對厄他培南可能的耐藥機制是什么

11、?,1. 厄他培南:13 mm2. 厄他培南+APB+EDTA14 mm3. 美羅培南:28 mm4. 法羅培南:23 mm 5. 法羅培南+APB23 mm,第16問:這株大腸埃希菌對厄他培南可能的耐藥機制是什么?,1、頭孢美唑:26 mm2、頭孢噻肟:11 mm3、頭孢噻肟/克拉維酸:30 mm4、頭孢他啶:22 mm5、頭孢他啶/克拉維酸:30 mm6、頭孢噻肟/硼酸:13 mm,第16問:

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