微生物學(xué)質(zhì)量控制

1、第四章 微生物學(xué)質(zhì)量控制,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量控制遺傳質(zhì)量控制微生物質(zhì)量控制營養(yǎng)質(zhì)量控制環(huán)境質(zhì)量控制,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按微生物學(xué)控制的分類,按對(duì)微生物學(xué)質(zhì)量的控制，可將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為四類：無菌動(dòng)物(Germfree animal, GF)和悉生動(dòng)物(Gnotobiotic animal, GN)無特定病原體動(dòng)物(Specific pathogen free animal, SPF)清潔動(dòng)物(Clean animal, CL)普通動(dòng)物(Co

2、nventional animal, CV),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物等級(jí),2001版國家標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)微生物和寄生蟲等級(jí)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物等級(jí)進(jìn)行了重新設(shè)定。小鼠 清潔級(jí) SPF級(jí) 無菌級(jí)大鼠 清潔級(jí) SPF級(jí) 無菌級(jí)地鼠 普通級(jí) 清潔級(jí) SPF級(jí) 無菌級(jí) 豚鼠 普通級(jí) 清潔級(jí) SPF級(jí) 無菌級(jí)家兔

3、 普通級(jí) 清潔級(jí) SPF級(jí) 無菌級(jí)犬 普通級(jí) SPF級(jí)猴 普通級(jí) SPF級(jí),第一節(jié) 無菌動(dòng)物（Germfree animal，簡稱GF）定義：指用現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)手段檢測，動(dòng)物的體表體內(nèi)不攜帶其它生命體（包括一切微生物和寄生蟲）的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。飼養(yǎng)條件：無菌隔離器內(nèi)來源：第一代通過無菌剖腹產(chǎn)術(shù)，人工哺乳獲得；以后通過無菌動(dòng)物雌雄交配繁殖或無

4、菌剖腹產(chǎn)術(shù)，保姆鼠代奶擴(kuò)群。,種 類 培育者及育成時(shí)間小 鼠 Pleasants,1959大鼠 Reyniers1946；Gustafsson,1948豚　鼠 Miyakawa1958; Tanami,1959;兔 Wostmann1959; Luckey,1963狗

5、 Glimsedt,1946貓 Bleby,1969山羊、綿羊 Smith,1961,1966豬 Whitenair,1960馬　 Drummond等,1973猴 Reyniers,1942雞 Reyniers,1943鵪　鶉

6、 Woodard等,1965;Miles,1966,無菌動(dòng)物特點(diǎn)：,1.微生物特點(diǎn)： 在動(dòng)物體內(nèi)外任何部位均檢不出任何活的微生物和寄生蟲。 “無菌”是個(gè)相對(duì)的概念，只是根據(jù)現(xiàn)有的科學(xué)知識(shí)和檢驗(yàn)方法在一定時(shí)期內(nèi)不能檢出病原體而已。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)在認(rèn)為是無菌的動(dòng)物或許將來可以檢出病原體而不是無菌動(dòng)物。,,2.形態(tài)學(xué)特點(diǎn)：消化系統(tǒng) (1)盲腸肥大， (2)腸道肌層薄，腸絨毛

7、變細(xì)變短 (3)肝臟變小,,循環(huán)系統(tǒng) (1)心臟變小 (2)白細(xì)胞數(shù)變少，且數(shù)量波動(dòng)范圍小免疫系統(tǒng)(1)胸腺，淋巴組織，網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)發(fā)育不良(2)脾臟小，無二級(jí)濾泡,,2.生理學(xué)特點(diǎn)： 免疫功能 (1)血清中IgG、IgM水平低，幾乎不存在丙種球蛋白和特異性抗體 (2)免疫應(yīng)答速度慢，過敏反應(yīng)、對(duì)異體移植物的排斥反應(yīng)以及自身免疫現(xiàn)象消失或減弱,,生長率 (1)不同種屬不同 (2)無菌

8、鳥類生長率高于同種普通鳥 (3)無菌大、小鼠與普通鼠差不多 (4)無菌豚鼠和無菌兔比普通的慢,,生殖(1)無菌大、小鼠略高于普通大小鼠(2)豚鼠和兔繁殖能力比普通級(jí)低,,代謝和營養(yǎng) 無菌動(dòng)物血中含氮量少，腸管對(duì)水的吸收率低，代謝周期比普通動(dòng)物長 體內(nèi)不能合成維生素B和K，易產(chǎn)生這兩種維生素的缺乏癥,,抗輻射能力 無菌動(dòng)物抗輻射能力強(qiáng)，抗實(shí)驗(yàn)性燙傷和抗休克死亡能力也強(qiáng)于普通動(dòng)物壽命 無菌動(dòng)物的壽命普

9、遍長于普通動(dòng)物,第二節(jié) 悉生動(dòng)物（Gnotobiotic animal，簡稱GN）定義：又稱已知菌動(dòng)物，指動(dòng)物體內(nèi)帶有明確的微生物種類的動(dòng)物。飼養(yǎng)條件：無菌隔離器內(nèi)來源：人為將已知的微生物投給無菌動(dòng)物，使其體內(nèi)帶有已知菌 單菌動(dòng)物 雙菌動(dòng)物 多菌動(dòng)物,悉生動(dòng)物特點(diǎn)：,微生物特點(diǎn)體內(nèi)攜帶有已知微生物來源無菌動(dòng)物植入微生物飼養(yǎng)管理 必須飼養(yǎng)在溫濕度恒定的百級(jí)空氣凈化的隔離系統(tǒng)中，實(shí)行嚴(yán)格的微生物控制。,,其他

10、 與無菌動(dòng)物比較。 悉生動(dòng)物腸道內(nèi)存在細(xì)菌可以合成維生素，不會(huì)像無菌動(dòng)物一樣發(fā)生維生素缺乏癥。 抵抗力、生活力較強(qiáng)，易于飼養(yǎng)管理。,無菌動(dòng)物和悉生動(dòng)物的應(yīng)用 1、病因?qū)W的研究如：貓瘟、齲齒的形成 2、微生物學(xué)中的研究 (1)微生物間的拮抗作用 (2)微生物和宿主之間關(guān)系 (3)病毒學(xué)研究,3、免疫學(xué)研究中的應(yīng)用 無菌動(dòng)物體內(nèi)既無抗原也無特異性抗體，處于一種“原

11、始狀態(tài)”，很適合用于各種免疫功能的研究。 如，無菌動(dòng)物暴露于微生物，先產(chǎn)生α球蛋白，再產(chǎn)生β球蛋白，最后產(chǎn)生γ球蛋白。 制備高效價(jià)，無交叉反應(yīng)的特異性抗體,,4、腫瘤學(xué)研究 如，制備人體腫瘤模型需要免疫抑制動(dòng)物，而普通動(dòng)物給予免疫抑制劑后常繼發(fā)感染死亡，所以可以應(yīng)用無菌動(dòng)物。 研究垂直傳染的致癌病原，如白血病病毒。 某些微生物的代謝產(chǎn)物可以降解無害的蘇鐵素，使其致癌。,5、老年病學(xué)研究

12、 無菌動(dòng)物普遍壽命比普通動(dòng)物長，說明微生物和機(jī)體老化有關(guān)。 普通大鼠壽命2年，而無菌大鼠壽命3—4年。,,6、營養(yǎng)學(xué)的研究 無菌動(dòng)物是研究營養(yǎng)的良好模型，很多營養(yǎng)成分是靠細(xì)菌產(chǎn)生的。如VB和VK是靠腸道細(xì)菌合成的，無菌動(dòng)物體內(nèi)不能合成VB和VK，所以可以用來研究哪些細(xì)菌合成了哪些維生素。,,7、放射醫(yī)學(xué)研究 無菌動(dòng)物可以耐受大劑量的放射線照射。可用區(qū)別放射引起的癥狀和繼發(fā)感染的癥狀。8、毒

13、理學(xué)研究 如：研究發(fā)現(xiàn)青霉素過敏是因?yàn)槟c道菌代謝引起，而非青霉素本身。豆類中毒也是由腸道細(xì)菌的代謝活動(dòng)引起的。,,9、心血管病研究 實(shí)驗(yàn)證實(shí)腸道微生物可以分解膽汁酸，降低血液中膽固醇水平。10、宇航中應(yīng)用 可以用來攜帶地外微生物。,第三節(jié) 無特定病原體動(dòng)物（Specific pathogen free animal，簡稱SPF動(dòng)物)定義：指不攜帶特定病原體（細(xì)菌、病毒、寄生蟲），但帶有未知的微生物

14、群的動(dòng)物。飼養(yǎng)條件：屏障系統(tǒng)內(nèi)大規(guī)模生產(chǎn)/隔離器內(nèi)保種最初來源：將無菌動(dòng)物/悉生動(dòng)物轉(zhuǎn)移到屏障系統(tǒng)中飼養(yǎng)繁殖,SPF動(dòng)物特點(diǎn)：,1、微生物特點(diǎn) SPF動(dòng)物除一、二級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原體外，不攜帶主要潛在感染或條件致病和對(duì)研究實(shí)驗(yàn)干擾大的病原。2、來源 SPF動(dòng)物來源于無菌動(dòng)物或剖腹產(chǎn)動(dòng)物。,,3.飼養(yǎng)管理 SPF動(dòng)物必須飼養(yǎng)在溫濕度恒定的萬級(jí)空氣凈化的屏障系統(tǒng)中，實(shí)行嚴(yán)格的微生物控制。,SP

15、F動(dòng)物的應(yīng)用：,目前國際上公認(rèn)SPF動(dòng)物適用于所有科研實(shí)驗(yàn)，是國際標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。它的應(yīng)用價(jià)值在于它無人畜共患病，無主要傳染病，無對(duì)實(shí)驗(yàn)研究可能產(chǎn)生干擾的微生物。各種疫苗生產(chǎn)所采用的動(dòng)物應(yīng)為SPF動(dòng)物。,第四節(jié) 清潔動(dòng)物（Clean animal，簡稱CL動(dòng)物）定義：微生物控制級(jí)別介于SPF動(dòng)物和普通動(dòng)物之間的動(dòng)物飼養(yǎng)條件：屏障系統(tǒng)大規(guī)模生產(chǎn)來源：SPF動(dòng)物擴(kuò)群應(yīng)用：各種科研、教學(xué)用大小鼠,清潔級(jí)動(dòng)物特點(diǎn)：,1、微生物特點(diǎn)

16、 清潔級(jí)動(dòng)物比普通級(jí)動(dòng)物要求排除的微生物和寄生蟲多，但比SPF動(dòng)物少。清潔級(jí)動(dòng)物除肉眼觀察無病外，尸體解剖時(shí)，主要臟器、組織無論是肉眼觀看還是病理組織切片均應(yīng)無病變。,,2、來源 清潔動(dòng)物來源于SPF動(dòng)物、無菌動(dòng)物、悉生動(dòng)物或剖腹產(chǎn)動(dòng)物。,,3、飼養(yǎng)管理 清潔級(jí)動(dòng)物飼養(yǎng)于溫濕度恒定的萬級(jí)空氣凈化的屏障系統(tǒng)中。 其所用的飼料、墊料、飲用水、籠器具等都經(jīng)過消毒滅菌處理。 工作人員需

17、換滅菌工作服、鞋、帽、口罩等進(jìn)入動(dòng)物室進(jìn)行操作。,清潔級(jí)動(dòng)物的應(yīng)用：,清潔級(jí)動(dòng)物是根據(jù)我國國情而設(shè)立的等級(jí)動(dòng)物。 它較普通級(jí)動(dòng)物健康，又較SPF級(jí)動(dòng)物易達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中可免受動(dòng)物疾病的干擾，其敏感性與重復(fù)性亦較好。 目前在我國已成為適用于科研的標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別的實(shí)驗(yàn)物。,第五節(jié) 普通動(dòng)物（Conventional animal，簡稱CV動(dòng)物）定義：不帶有嚴(yán)重危害動(dòng)物自身健康和人獸共患病病原體的動(dòng)物。飼養(yǎng)條

18、件：普通開放環(huán)境來源：經(jīng)微生物學(xué)檢查不帶有上述病原體的動(dòng)物，或SPF動(dòng)物降級(jí)。應(yīng)用：豚鼠、兔、犬、猴等大動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)研究。,普通動(dòng)物特點(diǎn)：,1、微生物學(xué)特點(diǎn) 要求不攜帶所規(guī)定的人獸共患病病原和動(dòng)物烈性傳染病的病原。2、飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)于開放系統(tǒng)。但仍然對(duì)溫度，濕度，飼料，墊料，飲水，衛(wèi)生等有一定控制。3、生理學(xué)特點(diǎn) 外觀健康，飲食排泄正常，無異常分泌物，無臨床癥狀，臟器無眼觀病灶。,普通動(dòng)物的應(yīng)

19、用：,僅可作為生物醫(yī)學(xué)中教學(xué)示教之用，或作為某些科學(xué)研究為探索方法而從事的予試驗(yàn)之用，不可供科研、生產(chǎn)和檢定之用，由于普通級(jí)動(dòng)物繁殖力強(qiáng)，生產(chǎn)量大，生產(chǎn)成本低，適宜作一般性的教學(xué)實(shí)驗(yàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)用。,第六節(jié) 潔凈動(dòng)物與普通動(dòng)物的比較,潔凈動(dòng)物通常是指來源于剖腹產(chǎn)、實(shí)行嚴(yán)格的微生物控制、飼養(yǎng)于空氣凈化系統(tǒng)設(shè)施內(nèi)的動(dòng)物，包括清潔動(dòng)物、SPF動(dòng)物、悉生動(dòng)物和無菌動(dòng)物。潔凈動(dòng)物與普通動(dòng)物相比，在很多方面均存在一定差異。,一、微生物控制比較

20、種 類 飼育環(huán)境 說 明無菌動(dòng)物 隔離系統(tǒng) 無法檢出任何生命體悉生動(dòng)物 隔離系統(tǒng) 確知帶有的微生物SPF動(dòng)物 屏障系統(tǒng) 確知不帶有的微生物清潔動(dòng)物 屏障系統(tǒng) 確知不帶有的微生物普通動(dòng)物 開放系統(tǒng) 微生物情況不明確,二、對(duì)科研實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響的比較 GF SPF CL

21、 CV傳染病 無 無 無 未知寄生蟲 無 無 無 未知試驗(yàn)結(jié)果 明確 明確 明確 有疑問用動(dòng)物數(shù) 少 少 較少 多或大量統(tǒng)計(jì)價(jià)值 很好 可能好 較好 不準(zhǔn)確長

22、期實(shí)驗(yàn) 好 好 可能好 困難死亡率 很少 少 較少 高長期實(shí)驗(yàn)成活率100% 90% 80% 40%實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì) 可能 可能 可能 不可能結(jié)果討論價(jià)值 很高 高 較高 有疑問,總之，使用無菌動(dòng)物、悉生動(dòng)物、及SPF動(dòng)物和

23、清潔級(jí)動(dòng)物，由于有明確的微生物背景和可控的飼育環(huán)境，可大大提高動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和準(zhǔn)確性，因而得到廣泛的應(yīng)用。,三、生物學(xué)特性的比較 潔凈動(dòng)物與普通動(dòng)物相比，在血液學(xué)、血液生化指標(biāo)及主要臟器系數(shù)方面均產(chǎn)生一定變化。 如清潔級(jí)大鼠與普通大鼠相比，白細(xì)胞較少，其中中性粒細(xì)胞少，淋巴細(xì)胞相對(duì)增加；血清堿性磷酸酶、膽紅素、膽固醇值較高；尿素氮、肌酐值比較低；空腸淋巴結(jié)、脾臟較輕；肺、腎組織形態(tài)比普通大鼠健康。,第七節(jié)

24、潔凈動(dòng)物的培育,一、無菌動(dòng)物的培育 無菌動(dòng)物的理論基礎(chǔ)和實(shí)踐依據(jù)：胎盤屏障和屏障觀念。,,1、無菌手術(shù)小哺乳動(dòng)物動(dòng)物：子宮切除術(shù)（剖腹產(chǎn)）大哺乳動(dòng)物動(dòng)物：子宮切開術(shù)（剖腹產(chǎn)）鳥類：消毒卵,,2、哺乳人工哺乳代乳,注意：供胎動(dòng)物：不攜帶垂直傳播的微生物手術(shù)時(shí)間的選擇手術(shù)速度無菌操作環(huán)境溫度防止羊水嗆入呼吸道手術(shù)后微生物的檢查代乳動(dòng)物的準(zhǔn)備,,3.放入隔離器進(jìn)行飼養(yǎng),,二、悉生動(dòng)物的培育程序（1

25、）獲取無菌動(dòng)物（2）準(zhǔn)備好特定的微生物材料（3）把上述材料轉(zhuǎn)入無菌飼育隔離器（4）在隔離器內(nèi)給無菌動(dòng)物授入微生物,,三、SPF動(dòng)物和清潔動(dòng)物 將無菌動(dòng)物或悉生動(dòng)物飼養(yǎng)于屏障系統(tǒng)使其自然感染特定微生物以外的微生物，但應(yīng)嚴(yán)格防范特定病原體的污染，并需要定期檢查。,第八節(jié) 衛(wèi)生防疫一、傳染病流行環(huán)節(jié)1、傳染源： 有癥狀或無癥狀的病原攜帶者2、傳播途徑：3、易感動(dòng)物傳播途徑：水或食物傳播空氣飛沫傳播

26、蟲媒傳播接觸傳播：直接或間接垂直傳播,,二、防疫與隔離措施1、小型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一旦染病，不可用藥治療和疫苗接種原因：干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果成為潛在感染源經(jīng)濟(jì)上不合算,2、應(yīng)采取嚴(yán)格的飼養(yǎng)管理和衛(wèi)生防疫制度,預(yù)防和控制措施預(yù)防措施1）從有資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供應(yīng)商處采購動(dòng)物2）制定科學(xué)的飼養(yǎng)管理和操作規(guī)程,嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行飼養(yǎng)管理和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)3）定期進(jìn)行微生物學(xué)監(jiān)測4）徹底消滅飼養(yǎng)室內(nèi)外的野鼠5）大動(dòng)物接種疫苗2. 控制措施

27、1）重要傳染病感染要及時(shí)捕殺、消毒、隔離2）大動(dòng)物隔離治療3）不明死亡原因要剖檢明確診斷,傳染性疾病對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的影響引起動(dòng)物死亡和質(zhì)量下降（鼠痘、仙臺(tái)病毒感染、兔瘟、犬出血性腸炎等）人獸共患?。馨图?xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒感染、流行性出血熱、B病毒感染,第九節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常見的傳染性疾病,易污染實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組織培養(yǎng)的病毒,一、常見人畜共患病毒性疾病,1. 流行性出血熱病毒感染（Epidemic hemorrhagic

28、fever virus infection）病原：流行性出血熱病毒（Bunyaviridae, Hantavirus)流行病學(xué)： 傳染源：帶毒野鼠和實(shí)驗(yàn)大鼠 傳播途徑：咬傷接觸傳播，氣溶膠吸入 易感動(dòng)物：大小鼠及其它嚙齒類動(dòng)物臨床癥狀：大小鼠無臨床癥狀，人感染后得流行性出血熱，典型表現(xiàn)有發(fā)熱、出血和腎臟損害三類主要癥狀,診斷：血清學(xué)檢查，病毒分離預(yù)防和控制： 預(yù)防：飼養(yǎng)區(qū)內(nèi)外捕殺野鼠，不從無生產(chǎn)許

29、可證單位購買動(dòng)物。 控制：捕殺血清學(xué)檢查陽性大小鼠鼠，消毒、隔離,,2. 淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒感染（Lymphocytic choriomeningitis virus infection)病原：LCMV（Arenaviridae, Lymphocytic choriomeningitis virus）流行病學(xué)： 傳染源:感染LCMV的野小鼠或?qū)嶒?yàn)小鼠 傳播途徑：接觸傳播，垂直傳播 易感動(dòng)物：小鼠、

30、倉鼠、人臨床癥狀：小鼠無癥狀，人流感樣、腦膜炎,,LCMV is transmitted by the common house mouse, Mus musculus, which sheds the virus in its urine.  Humans become infected by inhaling aerosolized particles of rodent excrement, by ingesting

31、food contaminated with the virus or by direct contact of mucus membranes with infected fluids (lab and pets).,,Lymphocytic choriomeningitis (LCM) virus, a rodent-borne arenavirus, can infect humans throughout temperate r

32、egions of Europe and North America ，Moreover, clinicians may confuse congenital LCM virus infections of infancy with other congenital infections, especially CMV or toxoplasmosis, because of their clinical similarities.,W

33、right, R. et al. Pediatrics 1997;100:e9,,診斷：血清學(xué)檢查，樣品腦內(nèi)注射預(yù)防和控制：徹底消滅飼養(yǎng)室周圍的野鼠和家鼠，避免鼠類的排泄物污染的飲食，避免吸入被污染的塵埃。,,3. 猴皰疹病毒感染（B-Virusinfection)病原：Cercopithecine Herpesvirus Type 1流行病學(xué)：傳染源:感染B病毒的非人靈長類動(dòng)物 傳播途徑：接觸傳播（咬傷、抓傷

34、） 易感動(dòng)物：猴、人臨床癥狀：發(fā)熱、頭痛、器官壞死、出血性休克、嚴(yán)重致死,,診斷：血清學(xué)檢查預(yù)防和控制：對(duì)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的猴做徹底的檢疫，避免接觸野生猴類,4. 狂犬?。≧abies)病原：Rhabdovirus流行病學(xué)：傳染源:感染Rhabdovirus的犬、貓、狼和蝙蝠等 傳播途徑：接觸傳播（唾液） 易感動(dòng)物：所有哺乳動(dòng)物 臨床癥狀：潛伏期、前驅(qū)期、急性神經(jīng)癥狀期和麻痹

35、期即昏迷死亡期,,電鏡下的狂犬病病毒,狂犬病病毒的結(jié)構(gòu)模式圖,,診斷：1. 狂犬病特異性抗原 2. 在腦組織中存在Negri體（狂犬病病毒包涵體）3. 在腦組織或唾液中用細(xì)胞培養(yǎng)分離到病毒預(yù)防和控制：禁止野犬進(jìn)入動(dòng)物房周圍，對(duì)實(shí)驗(yàn)犬和實(shí)驗(yàn)人員接種狂犬病疫苗,二. 立克次體疾病,立克次體是介于細(xì)胞與病毒之間的微生物，具有以下特點(diǎn)： 　?、傩柙诨罴?xì)胞內(nèi)生長，在代謝衰退的細(xì)胞內(nèi)生長旺盛； 　?、诰叩?/p>

36、型的細(xì)胞壁、有DNA和RNA，呈短小、多形性球桿狀，染色后光學(xué)顯微鏡可以查見 ③對(duì)抗生素敏感,人畜共患的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物立克次體疾病,三. 人畜共患常見細(xì)菌性疾病,1. 沙門氏菌?。⊿almonella）病原：沙門氏菌流行病學(xué)： 傳染源：患病動(dòng)物和無癥狀帶菌動(dòng)物 傳播途徑：消化道 易感動(dòng)物：嚙齒類、兔臨床癥狀：突然死亡，腹瀉診斷：臨床癥狀，病原菌分離,,Salmonella species are

37、 Gram-negative, flagellated facultatively anaerobic bacilli characterized by O, H, and Vi antigens. There are over 1800 known serovars which current classification considers to be separate species.,豚鼠的脾臟病變,小鼠肝臟病變,,預(yù)防和控制：

38、對(duì)動(dòng)物的食物和飲水進(jìn)行嚴(yán)格消毒，一旦發(fā)現(xiàn)有動(dòng)物染病，立即撲殺并對(duì)環(huán)境徹底消毒。,1. 布氏桿菌病（Brucellosis）病原：Brucella suis流行病學(xué)： 傳染源：患病犬、牛、豬、羊 傳播途徑：接觸感染（口、皮膚、黏膜） 易感動(dòng)物：犬、牛、豬、羊臨床癥狀：體重減輕、睪丸炎、不育診斷：臨床癥狀，病原菌分離,四. 常見的影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)的疾病,1. 鼠痘（Mouse pox, Infectious

39、 ectromelia）病原學(xué)：鼠痘病毒（Poxviridae, mouse poxvirus）流行病學(xué)： 傳染源：病鼠，野生小鼠很少發(fā)生 傳播途徑：接觸傳播、消化道傳播 易感動(dòng)物：小鼠（某些品系易感，某些品系抵抗）臨床癥狀：痘斑、脫腳、斷尾,診斷：流行病學(xué)，臨床癥狀，病毒分離，實(shí)驗(yàn)室檢查預(yù)防和控制： 預(yù)防：嚴(yán)格執(zhí)行規(guī)章制度，不從無生產(chǎn)許可證單位購買動(dòng)物。 控制：捕殺病鼠，消毒飼養(yǎng)室,,2. 仙

40、臺(tái)病毒感染（Sendai virus infection）病原學(xué)：仙臺(tái)病毒（Paramyxoviridae, Sendai virus）流行病學(xué)： 傳染源：病鼠 傳播途徑：呼吸道 易感動(dòng)物：所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物臨床癥狀：肺炎,Sendai virus is a member of the paramyxoviridae. It is a single-stranded RNA virus which is abl

41、e to transfect both dividing and non-dividing cells. Its method of entering cells involves sialic acid and cholesterol which are common to many cell types. Sendai viral gene expression and replication are localized in th

42、e cytoplasm in contrast to most viruses that need to enter the nucleus. Sendai virus is non-integrating so gene expression following gene transfer is short-lived.,仙臺(tái)病毒感染肺病變,對(duì)麻醉實(shí)驗(yàn)和吸入毒理學(xué)研究等產(chǎn)生嚴(yán)重干擾,,診斷:流行病學(xué)，臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查預(yù)防和控制：

43、引進(jìn)動(dòng)物時(shí)執(zhí)行嚴(yán)格的檢疫制度，發(fā)現(xiàn)感染鼠后及時(shí)撲殺，剖腹產(chǎn)重建鼠群,,3. 鼠肝炎（Mouse hepatitis）病原：鼠肝炎病毒（Coronaviridae, Mouse hepatitis virus）流行病學(xué)： 傳染源：隱性感染鼠、病鼠 傳播途徑：消化道，接觸傳播 易感動(dòng)物：小鼠臨床癥狀：乳鼠死亡，裸鼠“waste syndrome”,感染鼠肝炎的裸鼠waste syndrome,裸鼠的肝臟病變,

44、診斷:流行病學(xué)，臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查預(yù)防和控制：引進(jìn)動(dòng)物時(shí)執(zhí)行嚴(yán)格的檢疫制度，發(fā)現(xiàn)感染鼠后及時(shí)撲殺，剖腹產(chǎn)重建鼠群,,4. 犬細(xì)小病毒病（Canine Parvovirus disease）病原：犬細(xì)小病毒（ Canine Parvovirus ）流行病學(xué)： 傳染源：病犬 傳播途徑：消化道 易感動(dòng)物：犬臨床癥狀：糞便呈咖啡色或番茄醬色樣的血便，嚴(yán)重者機(jī)體休克、昏迷死亡或呈心肌炎型,,診斷:流行病學(xué)，臨床

45、癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查預(yù)防和控制：禁止野犬進(jìn)入動(dòng)物房周圍，飼養(yǎng)人員不得與寵物狗或其它草狗接觸，一旦發(fā)現(xiàn)感染，則對(duì)其隔離或撲殺，并對(duì)環(huán)境做徹底消毒。,5. 犬瘟熱（Canine Distemper) 病原：犬瘟熱病毒（ Canine Distemper Virus） 流行病學(xué)： 傳染源：病犬或海豹等野生動(dòng)物 傳播途徑：消化道 易感動(dòng)物：犬 臨床癥狀：鼻眼流漿液性分泌物 ，發(fā)熱，食欲廢絕、鼻鏡干裂，或出現(xiàn)急

46、性腸胃炎和神經(jīng)癥狀,犬瘟熱典型癥狀,診斷:流行病學(xué)，臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查預(yù)防和控制：禁止野犬進(jìn)入動(dòng)物房周圍，飼養(yǎng)人員不得與寵物狗或其它草狗接觸，一旦發(fā)現(xiàn)感染，則對(duì)其隔離或撲殺，并對(duì)環(huán)境做徹底消毒。,五. 常見的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物寄生蟲病,1. 體外寄生蟲（節(jié)肢動(dòng)物）病原：Ectoparasites（虱子、螨）流行病學(xué)： 傳染源：帶蟲動(dòng)物 傳播途徑：接觸傳播 宿主：各種動(dòng)物臨床癥狀：,,診斷:臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查預(yù)

47、防和控制：籠具和墊料要徹底消毒，一旦診斷出有外寄生蟲病，應(yīng)剖腹產(chǎn)重建動(dòng)物群或重新引種，有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的大動(dòng)物可用殺蟲劑治療。,2. 弓形蟲病病原：Toxoplasma gondii生活史：,滋養(yǎng)體，假包囊，包囊寄生在人的除紅細(xì)胞以外的有核細(xì)胞內(nèi)。,人、小鼠、家鼠,1.寄生部位：,2.終宿主：,3.中間宿主：,4.感染階段：,貓和貓科動(dòng)物。,其它哺乳類，鳥類，爬行類等,成熟卵囊，假包囊，包囊。,經(jīng)口感染。,經(jīng)損傷的皮膚或粘膜感染。,經(jīng)眼結(jié)

48、膜感染。,經(jīng)接觸被卵囊污染的土壤，水源感染。,經(jīng)輸血，器官移植感染。,經(jīng)節(jié)肢動(dòng)物攜帶感染。,經(jīng)貓，狗唾液感染。,感染途徑：,感染弓形蟲多數(shù)為隱性感染。主要危害眼和N系統(tǒng),孕婦常有流產(chǎn)，早產(chǎn)，死產(chǎn)。死胎或畸胎。,幼齡大鼠常導(dǎo)致致死性肺炎,,預(yù)防和控制：禁止貓進(jìn)入動(dòng)物房周圍，一旦感染撲殺整個(gè)感染群,第十節(jié) 微生物和寄生蟲監(jiān)測,一、監(jiān)測意義1、保護(hù)人員健康2、保證動(dòng)物質(zhì)量3、確保動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠二、微生物、寄生蟲監(jiān)測等級(jí)國家標(biāo)準(zhǔn)

49、 級(jí)別越高的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，監(jiān)測的微生物和寄生蟲的種類就越多。,三、監(jiān)測程序,我勸一個(gè)草率結(jié)婚的朋友離婚。她平靜的告訴我，如果說當(dāng)初魯莽結(jié)婚是個(gè)錯(cuò)誤。那么，現(xiàn)在草率離婚是一錯(cuò)再錯(cuò)。這位朋友后來還是離婚了，大家一致認(rèn)為她的行為很理性。同樣的故事正在互聯(lián)網(wǎng)搜索巨頭谷歌身上發(fā)生，但是谷歌選擇了草率“離婚”。飲鴆止渴由于急于抑制蘋果iphone手機(jī)翻天覆地的產(chǎn)業(yè)沖擊，谷歌采取急功近利的粗糙型開放策略。飲鴆止渴的策略一時(shí)取得了成

50、果。市場研究公司尼爾森最近公布的數(shù)據(jù)顯示，在通過Verizon Wireless、AT&T和Sprint Nextel三大運(yùn)營商經(jīng)銷后，谷歌Android手機(jī)在美國市場上的銷售量已經(jīng)超過iPhone。另一家市場研究公司iSuppli甚至認(rèn)為，全球范圍內(nèi)使用Android操作系統(tǒng)的手機(jī)數(shù)量將在 2012年超過蘋果iPhone。 表面繁華的背后，是Android生態(tài)系統(tǒng)的一團(tuán)糟，谷歌正在為自己的粗放型開放策略買單。用戶對(duì)谷歌

51、手機(jī)的態(tài)度從開始的好奇、后來的猶豫，變成強(qiáng)烈的批評(píng)?！按蠖郃ndroid手機(jī)程序都是垃圾，亂七八糟的”，一位手機(jī)發(fā)燒友迅速投奔了iphone的陣營：“同樣的植物人大戰(zhàn)僵尸游戲，在谷歌手機(jī)和iphone手機(jī)上的體驗(yàn)簡直沒法比”混亂，還是混亂。一切一切的亂象，折射出谷歌已經(jīng)失去對(duì)Android生態(tài)系統(tǒng)的控制。這一切的根源，我的判斷是開放策略初期過于寬松，導(dǎo)致失去控制權(quán)?；靵y的生態(tài)系統(tǒng)表現(xiàn)在用戶手機(jī)上，就是應(yīng)用程序的混亂和粗燥。一錯(cuò)再

52、錯(cuò)為此，谷歌開始采取對(duì)策。最近，有國內(nèi)廠商稱新的Android3.0開始關(guān)閉應(yīng)用程序的API(應(yīng)用程序編程接口)，統(tǒng)一Android界面。這意味著，谷歌將放棄其初始開放策略，開始封閉管理。粗看之下，谷歌認(rèn)識(shí)到自己的錯(cuò)誤。既然是過度開放導(dǎo)致的錯(cuò)誤，那么收緊開放尺度是很自然的邏輯，無懈可擊。但我認(rèn)為，谷歌倉促收緊開放策略仍然是個(gè)錯(cuò)誤。打個(gè)比喻。如果過度開放的政策是草率結(jié)婚，那么草率的封閉就是草率離婚。這么判斷的原因很簡單，谷歌把An

53、droid開放出去的那一天，Android已經(jīng)不屬于谷歌。谷歌沒有認(rèn)識(shí)到這一點(diǎn)，還以為Android只是自己的。合作伙伴對(duì)谷歌封閉政策的反應(yīng)加強(qiáng)了我的判斷結(jié)論。經(jīng)濟(jì)觀察報(bào)報(bào)道，國內(nèi)第一家生產(chǎn)基于Android平臺(tái)手機(jī)的設(shè)計(jì)公司創(chuàng)楊通信，近日已經(jīng)被迫出售。創(chuàng)楊通信負(fù)責(zé)人給出的出售理由是，“因?yàn)椴辉敢飧十?dāng)炮灰而選擇放棄?！卑凑漳壳癆ndroid3.0將統(tǒng)一界面的想法，未來的手機(jī)市場將出現(xiàn)毫無差異化的產(chǎn)品。這對(duì)于企業(yè)來說，幾乎意味著不

54、可避免的價(jià)格戰(zhàn)。利潤空間的微薄，導(dǎo)致合作伙伴生存環(huán)境惡劣。于是大量退出幾乎是一種必然。除了為合作伙伴找到新的利益空間，谷歌還將面臨開放陣營精神層面的聲討，這對(duì)谷歌的挑戰(zhàn)會(huì)更大。如果說谷歌為了自己競爭的私利利用了開放，贏得了名聲。那么，谷歌不能一腳把開放踢開，他現(xiàn)在還需要為這種名聲買單。如果只顧自己收網(wǎng)，谷歌會(huì)被面臨鋪天蓋地的道德譴責(zé)。谷歌，希望你準(zhǔn)備好了，三思而行。木桶效應(yīng)就是指一個(gè)水桶無論有多高，它盛水的高度取決于其中最低的

55、那塊木板。這在選購手機(jī)的時(shí)候也同樣適用。尤其是很多用戶在購買手機(jī)的時(shí)候， 都會(huì)專注于某一個(gè)參數(shù)，比如要求處理器主頻要高達(dá)1GHz，但一部手機(jī)的整機(jī)表現(xiàn)是由多個(gè)因素組成，所以在購買手機(jī)的時(shí)候一定要從整體的角度上來看一部手 機(jī)的性除了處理器主頻以外，其實(shí)還有很多影響整機(jī)表現(xiàn)的元素，比如運(yùn)行內(nèi)存(RAM)、機(jī)身內(nèi)存(ROM)、操作系統(tǒng)、廠商對(duì)系統(tǒng)的優(yōu)化都會(huì)有所影 響。不過在很多用戶眼中，這幾項(xiàng)卻遠(yuǎn)沒有處理器主頻重要。而如果忽略這幾項(xiàng)的話，可能

56、買到一個(gè)主頻很高，但整機(jī)性能卻仍然不令人滿意的機(jī)型?！　∮脩粼谶x機(jī)過程中切勿只關(guān)注一個(gè)硬件參數(shù)，這樣很可能并不能買到一款理想的機(jī)型，就算買的手機(jī)主頻再高，運(yùn)行內(nèi)存低的話仍然無法同時(shí)運(yùn)行數(shù)個(gè)程 序、機(jī)身內(nèi)存小的話則無法把太多的軟件安裝到機(jī)器上，這對(duì)整機(jī)耗電和運(yùn)行速度方面都有所影響、而廠商優(yōu)化更是決定著一部手機(jī)的穩(wěn)定性和部分運(yùn)行速度。綜上 所述，大家在選購手機(jī)的時(shí)候一定要綜合考慮一款手機(jī)的硬件規(guī)格。除此之外，也不要把硬件看的太過重要，就

57、比如蘋果iPhone 3GS在硬件配置上并不出眾，但卻在操控手感以及軟件資源上目前難有機(jī)型企及。更高分辨率能獲得更為逼真細(xì)膩的顯示效果，所以對(duì)于屏幕的分辨率絕大多數(shù)人都會(huì)偏向于分辨率更高的機(jī)型。但對(duì)于筆者 所說的高分辨率未必是好事會(huì)有所懷疑。其實(shí)這里說的高分辨率“不好”更多是指采用非主流的高分辨率機(jī)型。在此前，就有幾款“悲情”機(jī)型在分辨率上吃了不小 的虧。　　大名鼎鼎的HTC Diamond就是一款頗具代表意義的機(jī)型，Diamond

58、上市的手機(jī)市場還處于QVGA時(shí)代、只有少數(shù)旗艦機(jī)皇采用WVGA這樣級(jí)別的屏幕，由于HTC Diamond卻采用了VGA這一過渡型的分辨率，而也正是因?yàn)檫@一點(diǎn)，Diamond很多軟件都未有支持或無法完美運(yùn)行，可謂是一個(gè)不小的遺憾。除此之 外，曾經(jīng)非常經(jīng)典的,,附贈(zèng)人生心語人生太短，聰明太晚人生太短，聰明太晚(1)我們都老得太快 卻聰明得太遲把錢省下來，等待退休后再去享受結(jié)果退休后，因?yàn)槟昙o(jì)大，身體差，行動(dòng)不方便，哪

59、里也去不成。錢存下來等養(yǎng)老，結(jié)果孩子長大了，要出國留學(xué)，要?jiǎng)?chuàng)業(yè)做生意，要花錢娶老婆，自己的退休金都被拗走了。人生太短，聰明太晚(2)當(dāng)自己有足夠的能力善待自己時(shí)，就立刻去做，老年人有時(shí)候是無法做中年人或是青少年人可以做的事，年紀(jì)和健康就是一大因素。小孩子從小就告訴他，養(yǎng)你到高中，大學(xué)以后就要自立更生，要留學(xué)，創(chuàng)業(yè)，娶老婆，自己想辦法，自己要留多一點(diǎn)錢，不要為了小孩子而活我們都老得太快卻聰明得太遲，我的學(xué)長去年喪妻。這突如其來的事

60、故，實(shí)在叫人難以接受，但是死亡的到來不總是如此。學(xué)長說他太太最希望他能送鮮花給他，但是他覺得太浪費(fèi)，總推說等到下次再買，結(jié)果卻是在她死后，用鮮花布置她的靈堂。這不是太蠢愚了嗎？！等到......、等到.....，似乎我們所有的生命，都用在等待。人生太短，聰明太晚(3)「等到我大學(xué)畢業(yè)以后，我就會(huì)如何如何」我們對(duì)自己說「等到我買房子以后！」「等我最小的孩子結(jié)婚之后！」「等我把這筆生意談成之后！」「等到我死了以后」人人都

61、很愿意犧牲當(dāng)下，去換取未知的等待；犧牲今生今世的辛苦錢，去購買后世的安逸在臺(tái)灣只要往有山的道路上走一走，就隨處都可看到「農(nóng)舍」變「精舍」，山坡地變靈塔，無非也是為了等到死后，能圖個(gè)保障，不必再受苦。許多人認(rèn)為必須等到某時(shí)或某事完成之后再采取行動(dòng)。明天我就開始運(yùn)動(dòng)，明天我就會(huì)對(duì)他好一點(diǎn)，下星期我們就找時(shí)間出去走走；退休后，我們就要好好享受一下。人生太短，聰明太晚(4)然而，生活總是一直變動(dòng)，環(huán)境總是不可預(yù)知，現(xiàn)實(shí)生活中，各種突發(fā)

62、狀況總是層出不窮。身為一個(gè)醫(yī)生，我所見過的死人，比一般人要來得多。這些人早上醒來時(shí)，原本預(yù)期過的是另一個(gè)平凡無奇的日子，沒想到一個(gè)意料之外的事；交通意外、腦溢血、心臟病發(fā)作等等。剎那間生命的巨輪傾覆離軌，突然闖進(jìn)一片黑暗之中。那么我們要如何面對(duì)生命呢？我們毋需等到生活完美無瑕，也毋需等到一切都平穩(wěn)，想做什么，現(xiàn)在就可以開始做起。 一個(gè)人永遠(yuǎn)也無法預(yù)料未來，所以不要延緩想過的生活，不要吝于表達(dá)心中的話， 因?yàn)樯辉?/p>

63、一瞬間。人生太短，聰明太晚(5)記?。〗o活人送一朵鮮花，強(qiáng)過給死人送貴重的花圈，每個(gè)人的生命都有盡頭，許多人經(jīng)常在生命即將結(jié)束時(shí)，才發(fā)現(xiàn)自己還有很多事沒有做，有許多話來不及說，這實(shí)在是人生最大的遺憾。別讓自己徒留「為時(shí)已晚」的空余恨。逝者不可追，來者猶未卜，最珍貴、最需要實(shí)時(shí)掌握的「當(dāng)下」，往往在這兩者蹉跎間，轉(zhuǎn)眼錯(cuò)失。人生太短，聰明太晚(6)人生短暫飄忽，包得有一首小詩這樣寫：高天與原地，悠悠人生路；行行向何方

64、，轉(zhuǎn)眼即長暮。正是道盡了人生如寄，轉(zhuǎn)眼即逝的惶恐。有許多事，在你還不懂得珍惜之前已成舊事；有許多人，在你還來不及用心之前  已成舊人。 遺憾的事一再發(fā)生，但過后再追悔「早知道如何如何」是沒有用的，「那時(shí)候」已經(jīng)過去，你追念的人也已走過了你。人生太短，聰明太晚(7)一句瑞典格言說：「我們老得太快，卻聰明得太遲?！?不管你是否察覺，生命都一直在前進(jìn)。人生并未售來回票，失去的便永遠(yuǎn)不再得到。將希

65、望寄予「等到方便的時(shí)間才享受」人生太短，聰明太晚(8)我們不知失去了多少可能的幸福不要再等待有一天你「可以松口氣」，或是「麻煩都過去了」。生命中大部分的美好事物都是短暫易逝的，享受它們、品嘗它們，  善待你周圍的每一個(gè)人，別把時(shí)間浪費(fèi)在等待所有難題的「完滿結(jié)局」上。­找回迷失的生命­死亡也許是免費(fèi)的 ─ 但是，卻要付出生命的代價(jià)。­勸大家一句話：把握當(dāng)下，莫等待。

66、成功人生的十堂課人生成功第1課 做一個(gè)終生學(xué)習(xí)的人，離開學(xué)校并不意味著學(xué)習(xí)就結(jié)束了?！　W(xué)習(xí)可以成為一種生活方式，幫助你發(fā)揮最大的潛能。　　我們從未停止學(xué)習(xí)，總會(huì)有新的，有趣的東西等待我們?nèi)グl(fā)現(xiàn)。　　學(xué)習(xí)新的技能可能讓人感到有一點(diǎn)恐懼，但每當(dāng)我們在個(gè)人學(xué)習(xí)上停滯不前時(shí)，我們都需要去學(xué)習(xí)新的東西?！　》e極地尋求支援和建議，突破停滯期。,【大學(xué)課件】出品版權(quán)歸原作者所有!,參加一些培訓(xùn)，進(jìn)修，夜校

67、－任何新的興趣都將會(huì)有助于發(fā)展你的優(yōu)勢。　　多看，多聽，讓你的頭腦保持活躍?；畹嚼希瑢W(xué)到老。 人生成功第2課 令自己感到沮喪的秘訣就是用空閑時(shí)間去煩惱自己是否快樂。所以不要費(fèi)事去想它！摩拳擦掌干起來吧。你將熱血沸騰，你會(huì)頭腦清醒。很快，在你身體中的這種高漲的積極人生觀將把煩惱從你的頭腦中趕出去?！　⌒袆?dòng)起來，忙碌起來。這是世界上最便宜的一種藥，也是最好的一種。人生成功第3課 在困境中尋

68、找成功的希望　　　逆境是一所最好的學(xué)校。每一次失敗，每一次打擊，每一次損失，都蘊(yùn)育著成功的萌芽，都教會(huì)我在下一次有更出色的表現(xiàn)。我再也不會(huì)逃避現(xiàn)實(shí)，也不會(huì)拒絕從以往的錯(cuò)誤中獲取經(jīng)驗(yàn)，我不再因此而促成自己的失敗。因?yàn)槲抑?，寶玉不?jīng)磨礪就不能發(fā)光，沒有，我也不能完善自我?！　‖F(xiàn)在我知道，靈魂倍受煎熬的時(shí)刻，也正是生命中最多選擇與機(jī)會(huì)的時(shí)刻。任何事情的成敗取決于我在尋求幫助時(shí)是抬起頭還是低下頭。無論何時(shí)，當(dāng)我被可怕的失敗擊倒，在最初

69、的陣痛過去之后，我都要想方設(shè)法將苦難變成好事。偉大的機(jī)遇就在這一刻閃現(xiàn)－這苦澀的根必將迎來滿園芬芳！ 我將一直在困境中尋找成功的希望。 人生成功第4課 沒有人可以使你感到自卑　　我選擇自我感覺良好，這樣我能更加開放地學(xué)習(xí)。如果人們給我負(fù)面的回應(yīng)或是批評(píng)我做的事情，我不會(huì)認(rèn)為他們所說的就表明我是一個(gè)“差勁的”人。我堅(jiān)信自尊由我掌控，這讓我毫無戒心地去聽取別人的反饋，想看看是否有我可以學(xué)習(xí)的東西。

70、　　我們每天都有兩種選擇。我們可以感到自己很棒，也可以感到自己很差勁。難道有人會(huì)選擇后者嗎？人生成功第5課　　緊緊抓住夢想　　我們每個(gè)人都有夢想。我們每個(gè)人都希望能發(fā)自內(nèi)心地相信自已有一種特殊的天賦，相信自己能發(fā)揮重要的作用，相信自己能以一種特殊的方式感動(dòng)他人，相信自己能夠把世界變得更加美好?！　≡谝簧校覀兌荚?jīng)對(duì)自己渴望并追求的生活品質(zhì)抱有憧憬。然而，對(duì)我們大多數(shù)人來說，這些憧憬在日常生活的成規(guī)和挫敗中已經(jīng)變得

71、如此渺茫，以到于我們甚至不再努力去實(shí)現(xiàn)它們。對(duì)太多人來說，夢想已經(jīng)遠(yuǎn)離，隨之遠(yuǎn)離的還有塑造我們命運(yùn)的意愿。很多人已經(jīng)推動(dòng)了堅(jiān)定的信念，而正是堅(jiān)定的信念為勝利者創(chuàng)造了優(yōu)勢。　　我們所要做的就是重拴夢想，并實(shí)現(xiàn)夢想，讓我們每個(gè)人都記住，并去運(yùn)用深藏在自己身上的無限潛能。人生成功第6課 毅力無法替代　　世界上沒有任何東西可以替代毅力。才干不可以，無所作為的能人十分普遍；天分不可以，碌碌無為的天才盡人皆知;教育

72、不可以，受過良好教育的沒落者更是隨處可見。只要有毅力和決心，就是無所不能的。　　毅力并不總是意味著永遠(yuǎn)堅(jiān)持做同一件事。它意味著無論你做任何事情，你都要立刻全心投入，竭盡全力；它意味著先做艱苦的工作，再去期待隨之而來的滿足和回報(bào)。它意味著開心地工作，渴望更多的知識(shí)和進(jìn)步。它意味著多打幾個(gè)電話，多夏裝幾里路，多除草，早起床，意味著總是尋求更好的方式去做你在做的事情。毅力就是經(jīng)歷考驗(yàn)和過失的成功。 人生成功第7課　　駐足片刻聞花香

73、　　在現(xiàn)代生活的忙忙碌碌中，人們很少會(huì)停下來欣賞自然的美?！　枂栕约海阌卸嗌俅蝺A聽過鳥兒的歌唱。你最近一次抬頭仰望閃耀的星空又是在什么時(shí)候？　　時(shí)光飛逝，人生苦短。不要忘記駐足聞聞花香。我們在急于謀生的過程中，往往忽視了我們生活的品質(zhì)。多少次，你聽見人們?yōu)檫@為那說“我忙死了?！倍嗫上О?！有一天，當(dāng)他們真的找到時(shí)間能夠駐足片刻聞花香時(shí)，可能已經(jīng)太遲了。 人生成功第8課　　加入到微笑者和贊美者的行列來　　當(dāng)你對(duì)別

74、人，別人也會(huì)對(duì)你報(bào)以，你自然會(huì)感覺很棒。即使他有對(duì)你報(bào)以，你也會(huì)感覺很棒，因?yàn)槟阏J(rèn)識(shí)到世界上最貧窮的人就是從不微笑的人，當(dāng)你對(duì)那個(gè)人微笑，你立刻變得更加富有。　　贊美也是這個(gè)道理。當(dāng)你真誠地毛病抑或恭維一個(gè)人時(shí)，他將立刻受益，更喜歡自己。當(dāng)你讓別人感覺更好時(shí)，你自己也會(huì)感覺更好。人生成功第9課 　　讓自己快樂?！　≌{(diào)查表明，我們當(dāng)中70%的人在生活中時(shí)間有臨床性的抑郁現(xiàn)象。　　如今我們有這么多的機(jī)遇，為什么我們還這么不快

75、樂呢？　　人們嘗試各種東西：金錢，權(quán)利，事業(yè)，婚姻，離婚，酒精，搖滾甚至毒品，但我們大多數(shù)人只是想要得到一樣?xùn)|西－快樂。　　快樂是人的一種自然的身心狀態(tài)；我們只要去相信快樂，讓自己感受快樂。　　要宣稱：我應(yīng)當(dāng)?shù)玫娇鞓贰?　　說出來，唱出來，喊出來。　　優(yōu)先考慮快樂，讓快樂成為你最重要的事情?！　?duì)你所擁有的一切抱以感激之情吧。 人生成功第10課 　　我擁有無與倫比的想象力　　　　　現(xiàn)在我將通過這種神奇的力量

76、得到我想要的。 　　如果我害怕發(fā)表演講，我就想象自己在公眾場合無所畏懼，充滿信心；　　如果我在病魔的煎熬，我就想象我以前健康的樣子；　　如果我感到貧窮，我就想象我將要富有。  現(xiàn)在我明白了：　　人類惟一的限制就是想象力。我之所以沒有成功，原因就在于我不知道如何使用我的想象力?，F(xiàn)在，我精通這個(gè)技巧，我將從中受益。最大的回報(bào)將是成功和愈加快樂。你會(huì)管理時(shí)間嗎?如何讓自己一天的時(shí)間不止24小時(shí)呢?

77、這里有一些總結(jié):你會(huì)管理時(shí)間嗎?（1）1.對(duì)目標(biāo)、任務(wù)、會(huì)議等事件分別按優(yōu)先級(jí)進(jìn)行排序；2.從優(yōu)先級(jí)最高的事物著手；3.和拖延做斗爭，如果事情重要，從現(xiàn)在開始做；4.把大的、艱難的任務(wù)細(xì)分為小的、容易的部分；5.為自己創(chuàng)造一小時(shí)的寧靜，哪怕這需要很強(qiáng)的意志力，或者有時(shí)不起作用；你會(huì)管理時(shí)間嗎?（2）6.找到一個(gè)隱蔽的地方，如圖書館或空閑的辦公室；7.當(dāng)你有重要的事情要處理時(shí)，學(xué)會(huì)對(duì)別人說“不”；8.學(xué)會(huì)委派別人做

78、事；9.歸納相似的事情，把它們放在一起處理；10.減少例行事務(wù)：它們不值得花費(fèi)過多時(shí)間?？s短低價(jià)值的事件。拋開沒有價(jià)值的信件和文書工作。委派別人完成、減少或推遲優(yōu)先級(jí)很低的任務(wù)；你會(huì)管理時(shí)間嗎?（3）11.避免完美主義。記住80/20定律；12.避免做出過多許諾。對(duì)你在有限時(shí)間內(nèi)能完成的工作持現(xiàn)實(shí)態(tài)度；13.不要把時(shí)間表排得滿滿的，為自己留下一定機(jī)動(dòng)時(shí)間應(yīng)付突發(fā)事件；14.設(shè)置時(shí)間限制。例如，做某些決定時(shí)，不應(yīng)超過3分鐘

79、；15.聚精會(huì)神地做手頭的事情；你會(huì)管理時(shí)間嗎?（4）16.處理重要事情時(shí)，使用大塊的時(shí)間；17.迅速處理困難的事情，等待和拖延不會(huì)使它們變?nèi)菀祝?8.文書工作爭取只處理一次；19.在行動(dòng)以前，徹底地思索整件工作；20.第一次就做好。成功是一種習(xí)慣，習(xí)慣是需要培養(yǎng)的成功是一種習(xí)慣，習(xí)慣是需要培養(yǎng)的（1）  1：找方法，不找借口?！　?：遇到挫折時(shí)，對(duì)自己說“太棒了”?！　?：不說消極的話

80、，不落入消極的情緒，一旦出現(xiàn)立即正面處理?！　?：隨時(shí)用零碎時(shí)間做零碎的事。　　5：寫下來，不要太依靠腦袋記憶?！　?：隨時(shí)記錄靈感?！　?：守時(shí)　　8：把重要的觀念方法寫下來，并隨時(shí)提醒自己。　　9：走路時(shí)，比平時(shí)快30%，肢體語言要健康，有力，不懶惰，不萎靡?！　?0：每天自我反省一次?！　?1：每天堅(jiān)持一次運(yùn)動(dòng)。　　12：開會(huì)坐在前排?！　?3：微笑?！　?4：說話時(shí)，聲音有力?！　?5：說話之前，先考慮對(duì)