分枝桿菌的共同特性

1、掌握：分枝桿菌的共同特性；結(jié)核桿菌細(xì)胞壁脂類含量與其染色性、培養(yǎng)特性、抵抗力和致病性的關(guān)系；結(jié)核桿菌的致病性與免疫性；結(jié)核菌素試驗的原理、結(jié)果意義及應(yīng)用價值；白喉棒狀桿菌的生物學(xué)特點、致病性、特異性防治; 熟悉：結(jié)核桿菌的微生物學(xué)檢查原則及特異性預(yù)防；麻風(fēng)桿菌的致病特點、微生物學(xué)診斷。白喉外毒素的組成及其毒性作用; 了解：麻風(fēng)病防治原則；錫克試驗。,目的要求,呼吸道感染細(xì)菌,概念：經(jīng)呼吸道傳播，主要引起呼吸道器官或呼吸道以外

2、器官病變的一類細(xì)菌。范圍： 1、結(jié)核分枝桿菌 2、白喉棒狀桿菌 3、嗜肺軍團(tuán)菌 4、百日咳鮑特菌 5、流感嗜血桿菌 6、肺炎克雷伯菌,結(jié)核分枝桿菌,M.tuberculosis,EUGONIC GROWTH 14 DAYS,DYSGONIC GROWTH 14 DAYS,Mycobacterium tuberculosis,Mycobacterium bovis,COLONIAL MORPHOLOG

3、Y OF THE TUBERCULOSIS COMPLEX MYCOBACTERIA,是一類細(xì)長略彎曲的桿菌,有分枝生長的趨勢。細(xì)胞壁含有大量的脂質(zhì)，與染色性、抵抗力、致病性等密切相關(guān)?？顾崛旧?）致病性與菌體成分有關(guān)，引起的疾病都呈慢性，并伴有肉芽腫。,分枝桿菌共同特點,分枝桿菌分類,結(jié)核分枝桿菌 人型、牛型結(jié)核分枝桿菌非結(jié)核分枝桿菌 堪薩斯分枝桿菌、海分枝桿菌、 瘰癆分

4、枝桿菌、 鳥-胞內(nèi)分枝桿 菌、蟾分枝桿菌、偶發(fā)分枝桿菌麻風(fēng)分枝桿菌,,,,分 類 對人致病的主要分枝桿菌,形態(tài)：細(xì)長略帶彎曲或直的桿菌，有時有分枝；在不同條件下形態(tài)不盡相同，呈現(xiàn)多形性。大?。?～4×0.4μ m排列：常聚集成團(tuán)染色性：齊-尼抗酸染色陽性（紅色）,,Much顆粒,一、生物學(xué)性狀,,形態(tài)與染色,專性需氧。生長緩慢，約18小時分裂1代，2-4周才見菌落生長。,培養(yǎng)特性,營養(yǎng)要求高，初次分離

5、常用含有蛋黃、甘油、馬鈴薯、無機(jī)鹽和孔雀綠的Lowenstein-Jensen(羅氏）培養(yǎng)基。典型菌落：粗糙型。菌落呈顆粒、結(jié)節(jié)或菜花狀，乳白色或米黃色、粗糙、不透明。,液體培養(yǎng)基：在管底開始生長，最后在表面形成菌膜。結(jié)核桿菌有毒株呈索狀生長，細(xì)菌排列呈索狀。,生化反應(yīng)：不活躍,糖發(fā)酵（-）人型可合成煙酸和還原硝酸鹽，而牛型不能。結(jié)核桿菌觸酶（+）、熱觸酶（-），而非結(jié)核分枝桿菌均為（+）,抵抗力：較強(qiáng),抗干燥，耐酸鹼，對多種染料

6、有抵抗力對紫外線敏感，可用于患者衣物的消毒對鏈霉素、利福平、異煙肼、環(huán)絲氨酸、乙胺丁醇、卡那霉素、對氨水楊酸敏感，但長期用藥易出現(xiàn)耐藥性。,生化反應(yīng),抵抗力,,四抗,,干抗燥,,,,,抗酸堿,抗堿性染料,抗青霉素等,怕癆藥物,,四怕,,,,怕濕熱,怕紫外線,怕酒精,,不發(fā)酵乳糖，觸酶陽性,變 異 性,形態(tài)、菌落變異毒力變異：卡介苗（BCG）——Calmette和Guerin二人將牛型結(jié)核桿菌放在含有甘油、膽汁、馬鈴薯的培養(yǎng)

7、基中經(jīng)13年230次傳代而獲得的減毒活菌苗，用于預(yù)防結(jié)核病。耐藥性的變異,致病物質(zhì),脂質(zhì),分枝桿菌生長素,分枝菌酸,蛋白質(zhì),結(jié)核菌素最重要,磷脂,索狀因子,蠟質(zhì)D,硫酸腦苷脂,,,二、致病性和免疫性,1、脂質(zhì)（1）分枝菌酸：細(xì)胞壁脂質(zhì)中的主要成分，與抗酸性有關(guān)。（2）磷脂：促使單核細(xì)胞增生，引起結(jié)核結(jié)節(jié)形成與干酪樣壞死。（3）索狀因子：能破壞細(xì)胞線粒體膜，抑制白細(xì)胞游走和引起慢性肉芽腫。（4）蠟質(zhì)D：具有佐劑作用，可激

8、發(fā)機(jī)體產(chǎn)生遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。（5）硫酸腦磷脂：抑制吞噬細(xì)胞中吞噬體與溶酶體的結(jié)合，使其能在吞噬細(xì)胞中長期存活。2、蛋白質(zhì)：主要成分是結(jié)核菌素。與蠟質(zhì)D共同作用引起遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。3、分枝桿菌生長素：脂溶性的鐵螯合劑。,致病性,磷脂,分枝菌酸,索狀因子,蠟質(zhì)D,硫酸腦苷脂,脂質(zhì),,,,,,蛋白質(zhì),結(jié)核桿菌細(xì)胞壁上的,致病物質(zhì),肺炎肉芽腫的損害,淋巴和血行傳播,任何部位的肉芽腫,所致疾病:結(jié)核，尤其以肺結(jié)核多見,傳染源：病人,傳播

9、途徑：多途徑,PULMONARY TUBERCULOSIS,,,,Bacteria coughedup in sputum,,,Inhalation of bacteria,Bacteria reach lungs,enter macrophages,Bacteria reproducein macrophages,Lesion begins to form(caseous necrosis),Activatedmacroph

10、ages,Bacteria cease togrow; lesion calcifies,Immunesuppression,Reactivation,Lesionliquefies,Deadphagocytes,necrosis,M. tuberculosis,Phagocytes,T cells, andB cellstrying tokill bacteria,Death,Spread toblood orga

11、ns,,,,,,,,,,,,,,,,,,Steps in the development of tuberculosis,Large caseating tubercle,,Miliary tubercles,,,,HUMAN LUNG,HUMAN LUNG,TUBERCULOSIS,systemic disease (versus pulmonary) greater in AIDS lesions often leproma

12、tous,,,Clinical features with AIDS,胞內(nèi)菌,不完全吞噬,肺結(jié)核的兩種表現(xiàn),原發(fā)感染,原發(fā)后感染,原發(fā)綜合征：原發(fā)灶、淋巴管炎、肺門淋巴結(jié)腫大,病程呈慢性漸進(jìn)性，伴有乏力、體重減輕、咳嗽、盜汗、午后潮熱、胸痛等。病灶多局限呈干酪樣結(jié)節(jié)，若結(jié)節(jié)破潰，則可形成空洞，傳染性強(qiáng)。,致病性,1、細(xì)胞免疫為主,為傳染免疫（infection immuity)/有菌免疫，2、免疫與變態(tài)反應(yīng)共存,傳染免疫（infect

13、ion immuity)/有菌免疫——即只有當(dāng)TB菌在體內(nèi)存在時才有免疫力，一旦體內(nèi)的TB菌被殺滅，免疫也隨之消失。,是應(yīng)用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗來測定機(jī)體對結(jié)核桿菌是否能引起變態(tài)反應(yīng)的一種試驗。原理：遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)試劑：OT（tuberculin)、PPD,,測紅腫硬結(jié)直徑,﹥5mm為“+”,≥15mm為“+++”,結(jié)核菌素試驗,意義：“+”——已感染過結(jié)核桿菌或預(yù)防接種“++++”——可能有活動性感染“-”——未感染過結(jié)核桿

14、菌，但還要考慮是否感染初期、老年人、細(xì)胞免疫功能低下。應(yīng)用：（1）選擇BCG接種對象和免疫效果的測定（2）作為嬰幼兒結(jié)核病診斷的參考（3）測定腫瘤患者的非特異細(xì)胞免疫功能（4）在未接種BCG的人群中調(diào)查結(jié)核病的流行情況。,臨床資料、細(xì)菌學(xué)檢查、放射學(xué)診斷仍是目前肺結(jié)核診斷的主要依據(jù)，其中細(xì)菌學(xué)檢查具有確診意義。,直接涂片鏡檢：抗酸染色,分離培養(yǎng),動物試驗,標(biāo)本采集和集菌,檢測鑒定新技術(shù)：PCR、核酸探針、DNA RFLP、色譜分析技

15、術(shù)、Bactec TB-460系統(tǒng)等,L型培養(yǎng),三、微生物學(xué)檢查,預(yù)防（1）加強(qiáng)衛(wèi)生管理，改善營養(yǎng)條件。（2）早期發(fā)現(xiàn)和治療病人（3）接種卡介苗治療 鏈霉素、利福平、異煙肼、對氨水楊酸為第一線藥物, 強(qiáng)調(diào)聯(lián)合用藥、足療程，防止耐藥性、減少毒性。,四、防 治 原 則,麻風(fēng)分枝桿菌M.leprae,是引起慢性傳染病麻風(fēng)的病原體。,Mycobacterium leprae,麻風(fēng)桿菌形態(tài)、染色與結(jié)核桿菌相似，常在細(xì)胞內(nèi)呈束狀或

16、團(tuán)狀排列，外觀似松葉或煙絲撒落在紙上為其特點。含菌的細(xì)胞漿呈泡沫狀，稱麻風(fēng)細(xì)胞。 典型胞內(nèi)菌,動物感染模型：小鼠足墊模型、犰酴模型,一、生物學(xué)性狀,人工體外培養(yǎng)迄今尚未成功。,傳播途徑：呼吸道、接觸傳播,傳染源：瘤型麻風(fēng)病人為主要傳染源,以細(xì)胞免疫為主,肉芽腫損害色素減退感覺缺失,二、致病性與免疫性,標(biāo)本采集：鼻粘膜或皮損涂片染色鏡檢病理組織切片檢查麻風(fēng)菌素試驗：不能用于診斷，但可用于分型及了解麻風(fēng)患者及接觸者的預(yù)后。,

17、三、微 生 物 學(xué) 檢 查,目前尚無特異性預(yù)防方法普查、定期檢查，早期發(fā)現(xiàn)，早期隔離BCG預(yù)防有一定效果,防,治,藥物治療：氨苯砜、氯法齊明、利福平和氟喹諾酮類制劑為麻風(fēng)聯(lián)合化療主要的配伍藥物。,四、防 治 原 則,白喉棒狀桿菌,C.diphtheriae,棒狀桿菌特 點,革蘭陽性,菌體一端或兩端膨大呈棒狀。菌體染色不均勻，出現(xiàn)節(jié)段染色或異染顆粒；排列常呈柵欄狀或Y、V等形狀。主要菌種：白喉棒狀桿菌、假白喉棒狀桿菌、干燥棒狀桿

18、菌等。引起人類致病的主要是白喉棒狀桿菌。,形態(tài)：菌體細(xì)長微彎，一端 或兩端膨大呈棒狀；排列：不規(guī)則，常成V、L 及柵欄狀。染色性：G+美藍(lán)染色：菌體著色不均， 有濃染顆粒。Neisser /Albert染色：有異染顆粒。,形態(tài)與染色,白喉棒狀桿菌,一、生物學(xué)性狀,培 養(yǎng) 特 性,Loffler（呂氏）血清斜面上生長迅速，12～18小時生成細(xì)小、灰白色、濕潤、圓形凸起的菌落。鑒別培養(yǎng)基：亞碲酸鉀血瓊脂平板上，菌落呈黑色。,抵

19、抗 力,對濕熱抵抗力不強(qiáng)，但對寒冷和干燥抵抗力強(qiáng)。對青霉素、氯霉素、紅霉素敏感。,白喉棒狀桿菌,二、致病性與免疫性,致病性,致病物質(zhì)：白喉外毒素,Electron micrograph of corynebacteriophage ß, which carries tox,受體結(jié)合功能區(qū)B片段,催化功能區(qū),穿膜功能區(qū),A片段,,,白喉外毒素,Diphtheria Toxin (DT),Cleaved to yield A/

20、B fragment, joined by S-S bond- A (catalytic domain) - B (transmembrane and receptor binding domains),Pathogenesis,A片段,B片段,A片段滅活延長因子,白喉外毒素作用機(jī)制,細(xì)菌局部繁殖部位，形成灰白色的假膜。,所致疾?。喊缀?外毒素入血造成毒血癥并到達(dá)易感細(xì)胞——神經(jīng)系統(tǒng)、心臟、腎臟等。,Thick gr

21、ey ‘pseudomembrane’ composed of fibrin, epithelial cells, bacteria and polymorph neutrophilsPseudomembrane may cause blockage, suffocation,,The cervical lymph nodes enlarge causing oedema of the neck (a classica

22、l condition of ‘bullneck’),傳染源：患者和帶菌者,傳播途徑：飛沫、接觸被污染的物品,咽白喉咽炎假膜阻塞性缺氧發(fā)熱淋巴結(jié)炎,皮膚白喉,循環(huán)并發(fā)癥：毒性外周神經(jīng)病、毒性心肌炎和充血性心衰,致病性,Elek immunodiffusion test.,免 疫 性,病后可產(chǎn)生牢固的免疫，抗毒素是保護(hù)性抗體。,Schick test結(jié)果分析,試驗側(cè) 對照側(cè)

23、 本質(zhì)陰性反應(yīng) – – 有免疫力陽性反應(yīng) 24～48h , 4 ～ 7d達(dá)峰 – 無免疫力假陽性反應(yīng) 6～18h紅腫,1～2d消退 同前 有免疫力，超敏反應(yīng)混合反應(yīng) 6～18h紅腫, 6～18h紅腫 免疫力，超敏

24、反應(yīng) 4～7d達(dá)峰 3～4d反應(yīng)消退,,,,原理：毒素抗毒素的中和作用原理,三、微生物學(xué)檢查法,標(biāo)本直接涂片鏡檢:可作初步診斷分離培養(yǎng)毒力試驗： 1、體外法：SPA協(xié)同凝集反應(yīng) 2、體內(nèi)法：動物（豚鼠）試驗,白喉棒狀桿菌,試驗,,,對照,試驗前腹腔注射白喉抗毒素250-500U,皮下注射待檢菌的48h培養(yǎng)液,白喉棒狀桿菌,四、防 治 原 則,人工主

25、動免疫人工被動免疫藥物預(yù)防：青霉素、紅霉素、氯霉素抗毒素治療,白喉棒狀桿菌,Legionella pneumophila,嗜肺軍團(tuán)菌,嗜肺軍團(tuán)菌,1976年新發(fā)現(xiàn)的菌屬。各種天然水源及冷、熱水管道系統(tǒng)（如自來水、空調(diào)系統(tǒng)、冷卻水塔）是本菌的儲存場所。,生物學(xué)性狀G--桿形菌，有菌毛和單端鞭毛。用Dieterle鍍銀法（黑褐色）或Giemsa法染色（紅色）需氧菌，營養(yǎng)要求較苛刻，且生長緩慢,嗜肺軍團(tuán)菌,致病性與免疫性,所致疾病

26、：軍團(tuán)病。有流感型、肺炎型和肺外型3種類型主要通過呼吸道吸入帶菌飛沫而感染。多流行于夏秋季。主要癥狀：發(fā)熱、寒顫、咳嗽、咳痰、胸痛、呼吸困難及腹瀉等。 。軍團(tuán)菌是胞內(nèi)寄生菌，細(xì)胞免疫為主。,嗜肺軍團(tuán)菌,Legionnaire's disease pneumonia fatal if not treated erythromycin,Pontiac fever flu-like milder self-lim

27、iting myalgia (muscle pain) no pneumonia,Legionella pneumophila,流感嗜血桿菌（H.influenzae）是一類革蘭陰性小桿菌,常呈多形態(tài)性在人工培養(yǎng)時需新鮮血液才能生長(生長需要X和V因子)巧克力色平板上生長較佳。當(dāng)流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同孵育時，出現(xiàn)衛(wèi)星現(xiàn)象。,流感嗜血桿菌（H.influenzae）,,,,當(dāng)流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平