肺分枝桿菌感染臨床特征、耐藥模式、預(yù)后研究及肺組織結(jié)核分枝桿菌巢式PCR檢測.pdf

1、目的:建立臨床肺活檢組織結(jié)核分枝桿菌分子快速檢測方法,并評價該方法敏感性、特異性。進一步應(yīng)用該方法研究結(jié)節(jié)病患者肺組織結(jié)核分枝桿菌基因檢出情況,評價該方法對肺結(jié)節(jié)病及肺結(jié)核鑒別診斷價值。
　　 方法:收集北京協(xié)和醫(yī)院2008年至2009年經(jīng)支氣管鏡肺活檢、經(jīng)皮肺穿刺活檢、電視胸腔鏡手術(shù)(Video—assisted thoracoscopic surgery,VATS)或開胸手術(shù)肺活檢組織標(biāo)本,選取診斷明確臨床資料完整者共110

2、例。肺結(jié)核病組47例(抗酸染色和/或分枝桿菌培養(yǎng)陽性20例,組織病理學(xué)診斷21例,臨床診斷6例),對照組63例(肺結(jié)節(jié)病組23例,肺癌組10例,肺真菌組19例,肺細菌組11例)。提取組織DNA,巢式PCR(Nested polymerase chain reaction,nPCR)方法擴增結(jié)核分枝桿菌特異插入序列IS6110基因。同時收集組織細菌、真菌、分枝桿菌涂片和培養(yǎng)等病原學(xué)結(jié)果以及組織病理結(jié)果等臨床資料。
　　 結(jié)果:IS

3、6110—nPCR檢測下限為100fg DNA模板量(約20條結(jié)核分枝桿菌)。36例(76.6％)肺結(jié)核組織擴增陽性,52例(82.5％)非結(jié)核肺組織擴增陰性。肺結(jié)核組nPCR陽性者中具有肉芽腫等典型病理表現(xiàn)比例高于nPCR陰性者,而組織抗酸染色陽性、分枝桿菌培養(yǎng)陽性、經(jīng)皮肺穿刺/TBLB組織、VATS/開胸肺組織、新鮮組織、FFPE組織比例無顯著性差異。11例(23.4％)肺結(jié)核組擴增陰性,11例(17.5％)對照組擴增陽性,其中肺結(jié)

4、節(jié)病組6例,肺真菌組5例。26.1％肺結(jié)節(jié)病患者肺組織可檢出結(jié)核分枝桿菌DNA,極顯著低于肺結(jié)核組(P<0.001)。
　　 結(jié)論:nPCR擴增IS6110基因檢測肺組織標(biāo)本診斷敏感性達76.6％,特異性82.5％,與組織病理論斷方法結(jié)合敏感性進一步提高至87.2％。組織病理具有肉芽腫等典型表現(xiàn)的肺組織檢測敏感性更高,而肺組織抗酸染色、分枝桿菌培養(yǎng)等病原學(xué)結(jié)果、組織來源及組織類型均不影響檢測結(jié)果。該方法診斷肺結(jié)核感染假陽性率17