bcl┐6表達(dá)對(duì)生發(fā)中心形成及淋巴瘤發(fā)生的作用

1、<p>　　BCL┐6表達(dá)對(duì)生發(fā)中心形成及淋巴瘤發(fā)生的作用</p><p>　　作者：張永清　黃高升　王哲　閆慶國(guó)　郭英 </p><p>　　【關(guān)鍵詞】 淋巴瘤 </p><p>　　關(guān)鍵詞: BCL-6;原癌基因淋巴結(jié);增生;淋巴瘤;免疫組織化學(xué) </p><p>　　摘 要:目的 探討B(tài)CL-6在正常淋巴組織和一組淋巴瘤

2、中的表達(dá)與生發(fā)中心形成及不同類型淋巴瘤發(fā)生的關(guān)系. 方法 形態(tài)學(xué)及免疫組織化學(xué)方法對(duì)17例反應(yīng)性增生淋巴組織（RLH）及74例不同類型淋巴瘤進(jìn)行檢測(cè)并分類，免疫組化法檢測(cè)各組織石蠟標(biāo)本中BCL-6表達(dá)情況. 結(jié)果 17例RLH生發(fā)中心細(xì)胞、10例濾泡性淋巴瘤（FL）及4例彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）中等強(qiáng)度表達(dá)BCL-6;3例FL及21例DL-BCL BCL-6表達(dá)為強(qiáng)陽(yáng)性（72%），高于其他各組（P&lt;0.01）

3、.17例RLH生發(fā)中心外細(xì)胞，4例DLBCL，14例小淋巴細(xì)胞淋巴瘤（SLL）、4例套細(xì)胞淋巴瘤（MCL）及14例經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤（HD）BCL-6陰性. 結(jié)論 BCL-6表達(dá)與生發(fā)中心形成密切相關(guān).少數(shù)FL和大部分DLBCL中BCL-6過(guò)表達(dá)，可能與這些淋巴瘤發(fā)病機(jī)制有關(guān).檢測(cè)BCL-6有助于FL與SLL，MCL間及RLH與HD間的鑒別診斷. </p><p>　　Keywords:BCL-6;proto-

4、oncogenes lymph nodes;hyperplsi-a;lymphoma;immunohistochemistry </p><p>　　Abstract:AIM To study the effects of bcl-6expression on the formation of lymphoid germinal center and the pathogene-sis of different

5、types of lymphomas.METHODS Histomor-phology and immunophenotype of17cases of lymph node re-active hyperplsia（RLH）and74cases of lymphoma were de-tected and classified.BCL-6was detected in both paraffin sections of RLH and

6、 lymphoma with immunohistochemistry.RESULTS BCL-6was expressed moderately in cells within the germinal center of the17cases of RLH，in10cases of fol</p><p><b>　　0 引言 </b></p><p>　　BCL

7、-6是位于3q27原癌基因bcl-6編碼，具有鋅指結(jié)構(gòu)的核內(nèi)轉(zhuǎn)錄抑制因子［1］ .BCL-6與部分白血病細(xì)胞凋亡［2］ 及B淋巴細(xì)胞分化關(guān)系密切［3］ ，bcl-6基因缺失，小鼠不能形成生發(fā)中心［4］ ，其基因5’端調(diào)控區(qū)的突變或易位而導(dǎo)致的BCL-6表達(dá)異常，推測(cè)是某些淋巴瘤發(fā)生的基礎(chǔ)［5］ .為進(jìn)一步闡明BCL-6表達(dá)與生發(fā)中心形成及淋巴瘤發(fā)生的關(guān)系，我們對(duì)17例反應(yīng)性增生淋巴組織及74例不同類型的淋巴瘤組織中BCL-6表達(dá)情況進(jìn)行

8、了檢測(cè). </p><p><b>　　1 材料和方法 </b></p><p>　　1.1 材料 1980/1999西京醫(yī)院病理科反應(yīng)性增生淋巴結(jié)（RLH）活檢標(biāo)本17例及不同類型淋巴瘤活檢標(biāo)本74例，標(biāo)本用10g L-1 中性多聚甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，3μm厚連續(xù)切片.所有標(biāo)本經(jīng)組織形態(tài)學(xué)及CD20，CD45RO和CD30（CD20，CD30單克隆抗體均購(gòu)自丹

9、麥Dako公司，工作濃度1 100;CD45ROmAb購(gòu)自Sigma公司，工作濃度1 800）相關(guān)免疫學(xué)標(biāo)記檢測(cè)（用Dako EnVision+兩步法）后，按1997年WHO淋巴瘤分類草案［6］ 進(jìn)行分類，RLH17例，F(xiàn)L13例，DLBCL29例，SLL14例，MCL（Men-tle細(xì)胞淋巴瘤）4例，HD（霍奇金淋巴瘤）14例.BCL-6mAb購(gòu)自英國(guó)Novocastra公司，Evision+及DAB試劑購(gòu)自Dako公司. </

10、p><p>　　1.1 方法 石蠟切片用EDTA修復(fù)液配合高壓修復(fù)［7，8］ ，免疫組化采用Dako Evision+兩步法（按說(shuō)明操作），扁桃體炎標(biāo)本作陽(yáng)性對(duì)照，TBS代替一抗作陰性對(duì)照.采用半定量方法評(píng)價(jià)結(jié)果:陰性（-）不著色，陽(yáng)性為棕黃色胞核，散在棕黃色顆粒為中等強(qiáng)度陽(yáng)性（+），棕黃色團(tuán)塊為強(qiáng)陽(yáng)性（）. </p><p>　　統(tǒng)計(jì)學(xué)方法:采用χ2 檢驗(yàn). </p><

11、;p><b>　　2 結(jié)果 </b></p><p>　　2.1 BCL┐6表達(dá) 除RLH為CD20及CD45RO雙陽(yáng)性標(biāo)記外，所有淋巴瘤標(biāo)本為CD20（+），CD45RO（-）表型，CD30是HD較特異標(biāo)記（Fig1）.17例RLH及13例FL均表達(dá)BCL-6，RLH表達(dá)部位為生發(fā)中心內(nèi)細(xì)胞，生發(fā)中心外細(xì)胞不表達(dá)BCL-6（Fig2）.FL均表達(dá)BCL-6，絕大部分DLBCL表達(dá)B

12、CL-6（陽(yáng)性率為86%）.SLL，MCL及HD均未見(jiàn)BCL-6表達(dá)（Tab1）. </p><p>　　表1 RLH及淋巴瘤組織免疫標(biāo)記及BCL-6表達(dá)　略 </p><p>　　2.2 BCL┐6表達(dá)強(qiáng)度 RLH組BCL-6表達(dá)為中等陽(yáng)性強(qiáng)度（Fig2）.FL組大部分BCL-6亦為中等陽(yáng)性強(qiáng)度（Fig3），少數(shù)（3/13）為強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)（Fig4）.29例DLBCL中，72%為強(qiáng)陽(yáng)性表

13、達(dá)（Fig5），BCL-6表 達(dá)陽(yáng)性強(qiáng)度顯著高于以上兩組（P&lt;0.01，Tab2）. </p><p>　　表2 BCL-6在RLH，F(xiàn)L及DLBCL中表達(dá)陽(yáng)性強(qiáng)度情況　略 </p><p><b>　　3 討論 </b></p><p>　　經(jīng)免疫學(xué)標(biāo)記檢測(cè)進(jìn)一步證實(shí)，F(xiàn)L，DLBCL，SLL，MCL及HD主要為B淋巴細(xì)胞起源，

14、CD30為霍奇金淋巴瘤的特征性標(biāo)記之一，本研究中14例HD CD30均為陽(yáng)性，提示分類可靠.Allman等［3］ 研究發(fā)現(xiàn)，BCL-6在多種細(xì)胞增殖時(shí)表達(dá)水平下降，而在細(xì)胞分化時(shí)表達(dá)水平上調(diào).在增殖非?；钴S的生發(fā)中心B淋巴細(xì)胞中，BCL-6mRNA水平與生發(fā)中心外靜止?fàn)顟B(tài)的B細(xì)胞水平相當(dāng)，但BCL-6蛋白水平卻可高出外周B細(xì)胞30余倍.提示BCL-6蛋白在翻譯及翻譯后水平受到嚴(yán)格調(diào)控.Dent等［4］ 證實(shí)BCL-6基因缺陷鼠其淋巴組織

15、不能形成生發(fā)中心.本研究用組化方法證實(shí)，BCL-6主要表達(dá)于正常淋巴組織生發(fā)中心，表達(dá)水平為中等陽(yáng)性強(qiáng)度，生發(fā)中心以外淋巴細(xì)胞不表達(dá)BCL-6，與Flenghi等［9］ 的報(bào)道一致，進(jìn)一步證實(shí)BCL-6持續(xù)表達(dá)與生發(fā)中心形成密切相關(guān).生發(fā)中心這一特殊環(huán)境可能提供給B細(xì)胞某種刺激信號(hào)，使得BCL-6處于持續(xù)表達(dá)狀態(tài)，BCL-6表達(dá)又是生發(fā)中心形成不可缺少的條件.13例濾泡性淋巴瘤均表達(dá)BCL-6，大部分表達(dá)水平與正常淋巴組織生發(fā)中心相似，

16、僅少部分呈強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá).而29例D</p><p>　　FL的發(fā)生一直認(rèn)為主要與14q32染色體易位有關(guān)，與BCL-6關(guān)系不大［10］ .Capello等［11］ 最近研究發(fā)現(xiàn)，部分FL同樣存在bcl-6調(diào)控區(qū)基因突變，當(dāng)基因突變至一定程度時(shí)，可使惡性程度較低的FL轉(zhuǎn)化為惡性程度較高DLBCL.本研究發(fā)現(xiàn)少數(shù)FL患者BCL-6異常表達(dá)，是否因其調(diào)控區(qū)基因突變引起，而異常表達(dá)的BCL-6是否能促使FL向DLBCL轉(zhuǎn)化

17、，此問(wèn)題值得進(jìn)一步研究.研究中還發(fā)現(xiàn)，并非所有DLBCL均強(qiáng)表達(dá)BCL-6，檢測(cè)BCL-6表達(dá)對(duì)進(jìn)一步研究DLBLC的起源及發(fā)病機(jī)制有重要意義，BCL-6表達(dá)陽(yáng)性的DLBCL可能起源于生發(fā)中心B淋巴細(xì)胞.14例SLL，4例MCL及14例典型HD患者均不表達(dá)BCL-6，與Raible等［12］ 報(bào)道結(jié)果相似.提示以上淋巴瘤可能起源于非生發(fā)中心B淋巴細(xì)胞，且這些類型淋巴瘤發(fā)病機(jī)制可能與BCL-6關(guān)系不大.但檢測(cè)BCL-6有一定的鑒別診斷價(jià)值

18、.①FL與SLL及MCL的鑒別，三者為中低度惡性淋巴瘤，瘤細(xì)胞與正常淋巴濾泡的帽帶細(xì)胞相似，時(shí)常彌漫一致，難以區(qū)別，可借助BCL-6鑒別診斷;②RLH與HD的鑒別:部分淋巴結(jié)持續(xù)炎性病變亦可致淋巴結(jié)</p><p>　　圖1 － 圖5 略 </p><p><b>　　參考文獻(xiàn): </b></p><p>　?。?］Chang CC，Ye B

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