亞麻核不育組織化學(xué)與相關(guān)基因的表達研究.pdf

1、本研究采用常規(guī)石蠟切片方法和原位雜交技術(shù)，以雄性可育株和雄性不育株亞麻為材料，通過不育株花藥與可育株花藥切片比較，闡明雄性不育亞麻花粉敗育主要時期及花藥發(fā)育過程的細胞學(xué)特點。結(jié)果表明：亞麻雄性不育花藥和花粉在四分體時期開始發(fā)育異常，敗育過程大體劃分為四個階段：初期在四分體期絨氈層與中層分離；中期小孢子形成時期發(fā)育停滯；后期絨氈層與小孢子粘連后逐漸消失；終期花藥干癟，花粉敗育。此研究基礎(chǔ)上利用組織原位雜交技術(shù)在 RNA水平上檢測了 MS2

2、-F基因在亞麻花藥內(nèi)的表達模式。方法：利用T7和SP6引物對體外轉(zhuǎn)錄合成地高辛標(biāo)記的MS2-F基因特異 cRNA探針，并與亞麻花藥切片進行原位雜交，觀察 MS2-F mRNA在亞麻花藥內(nèi)的時空表達信號。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：亞麻 MS2-F在四分體時期和小孢子發(fā)育早期的花藥絨氈層中有雜交信號，而在四分體時期之前的絨氈層細胞中，沒有MS2-F雜交信號。原位雜交結(jié)果表明，該基因從四分體時期開始到形成小孢子早期的絨氈層細胞中表達，進一步證明了該基因在亞麻