不同環(huán)境對(duì)褐飛虱翅型分化影響及褐飛虱成蟲(chóng)全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)構(gòu)建.pdf

1、褐飛虱（Nilaparvata lugens Stal．L）屬同翅目飛虱科，是亞洲重要的水稻害蟲(chóng)。本研究采用標(biāo)準(zhǔn)苗期集團(tuán)篩選法（SSST）對(duì)供試褐飛虱生物型進(jìn)行鑒定，并分別在室內(nèi)和室外研究了褐飛虱翅型分化所受光照、蟲(chóng)口密度、施肥及抗性水稻品種的影響，為有效防治褐飛虱提供依據(jù)；同時(shí)構(gòu)建了褐飛虱長(zhǎng)翅型成蟲(chóng)均一化cDNA文庫(kù)，為研究褐飛虱翅型分化的分子機(jī)理奠定基礎(chǔ)。本研究獲得的主要結(jié)果如下：
　　 1．采用SSST法對(duì)供試的褐飛虱生物

2、型進(jìn)行鑒定，發(fā)現(xiàn)TN1、IR26、ASD7對(duì)武昌地區(qū)褐飛虱表現(xiàn)為敏感，RH、Ptb33對(duì)武昌地區(qū)褐飛虱具有抗性。按照國(guó)際水稻研究所褐飛虱生物型的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，可知武昌地區(qū)褐飛虱生物型優(yōu)勢(shì)種群已由生物型Ⅱ轉(zhuǎn)變?yōu)槊霞永?，是一種致害力較強(qiáng)的生物型。
　　 2．在室內(nèi)條件下，研究不同光照及褐飛虱若蟲(chóng)密度對(duì)褐飛虱翅型分化的影響，發(fā)現(xiàn)在L：D=14：10、T=28±1℃、H=80％，若蟲(chóng)密度在20頭/株以下時(shí)，褐飛虱雌成蟲(chóng)短翅率在87.22％

3、以上，有利于褐飛虱短翅型雌成蟲(chóng)形成；在L：D=16：8、T=28±1℃、H=80％，若蟲(chóng)密度在10頭/株以上時(shí)，褐飛虱雌成蟲(chóng)短翅率在46.67％以下，有利于褐飛虱長(zhǎng)翅型雌成蟲(chóng)形成。
　　 可見(jiàn)，蟲(chóng)口密度、光照條件對(duì)褐飛虱翅型分化有影響，隨蟲(chóng)口密度增大，褐飛虱短翅型雌成蟲(chóng)減少，而短光照有利于褐飛虱短翅型雌成蟲(chóng)形成。
　　 3．在室外條件下，研究不同施肥條件對(duì)褐飛虱翅型分化影響。當(dāng)施氮肥尿素量為75kg/h㎡時(shí)，褐飛虱雌成蟲(chóng)

4、短翅型比率最高，但施氮肥尿素量達(dá)到150kg/h㎡時(shí)，褐飛虱雌成蟲(chóng)短翅率大大降低，可能存在施氮肥反應(yīng)閾值。
　　 4．在室外條件下，研究不同抗性水稻品種對(duì)褐飛虱翅型分化的影響，發(fā)現(xiàn)在供試水稻品種上，褐飛虱雄成蟲(chóng)短翅率均很低。雌成蟲(chóng)短翅率僅在兩優(yōu)培九及TN1兩個(gè)感蟲(chóng)品種上高于73％，且在不同水稻品種上存在差異。感蟲(chóng)品種上雌成蟲(chóng)短翅率較高，有利于褐飛虱雌成蟲(chóng)短翅型的形成。
　　 5．在不同供試實(shí)驗(yàn)條件下，褐飛虱雄成蟲(chóng)的短翅率

5、都較低，僅在室外條件下，施氮肥尿素量為75kg/h㎡時(shí)，雄蟲(chóng)短翅率達(dá)到71.82％，可以看出外界環(huán)境條件對(duì)褐飛虱短翅型雌成蟲(chóng)的誘導(dǎo)作用遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于對(duì)短翅型雄成蟲(chóng)的誘導(dǎo)作用。
　　 6．本文根據(jù)Creator Smart技術(shù)原理合成雙鏈cDNA，采用雙鏈特異核酸酶進(jìn)行cDNA的均一化，構(gòu)建了褐飛虱長(zhǎng)翅型成蟲(chóng)的均一化全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)。經(jīng)鑒定文庫(kù)的庫(kù)容為4.48x105，通過(guò)隨機(jī)挑選30個(gè)大腸桿菌單菌落進(jìn)行PCR檢測(cè)插入片段大小，發(fā)現(xiàn)插入