擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(chóng)三個(gè)差異基因在不同節(jié)片間的表達(dá)規(guī)律及序列分析.pdf

1、擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(chóng)屬于扁形動(dòng)物門(mén)絳蟲(chóng)綱，多節(jié)絳蟲(chóng)亞綱，圓葉目，裸頭科莫尼茨屬，擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(chóng)和貝氏莫尼茨絳蟲(chóng)為常見(jiàn)優(yōu)勢(shì)種，其廣泛分布于國(guó)內(nèi)外養(yǎng)羊區(qū)。擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(chóng)其內(nèi)部器官?gòu)陌l(fā)育、成熟到凋亡呈現(xiàn)出一系列的變化規(guī)律。由于絳蟲(chóng)每個(gè)節(jié)片又都可以看作是一個(gè)個(gè)體，因此，可以將節(jié)片間的比較視作一個(gè)個(gè)體不同后代間的比較，而且這些后代間的個(gè)體間遺傳差異很小，對(duì)于其基因功能的研究十分有利，具有其它模式生物無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì)。本文對(duì)擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(chóng)三個(gè)差異基因全序列

2、進(jìn)行了分析。主要研究?jī)?nèi)容如下： ⑴bZIP是一類堿性亮氨酸拉鏈類型的轉(zhuǎn)錄因子。為了研究擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(chóng)bZIP基因在其頭節(jié)、幼節(jié)、成節(jié)、孕節(jié)生長(zhǎng)過(guò)程中的表達(dá)規(guī)律，我們從擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(chóng)cDNA文庫(kù)克隆得到了擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(chóng)bZIP的cDNA序列，該基因全長(zhǎng)1898bp，包含一個(gè)ORF，編碼574個(gè)氨基酸，屬于bZIP蛋白家族，與果蠅同源性達(dá)53％，命名為kzbZIP，推測(cè)蛋白的理論分子量為62.78KDa，等電點(diǎn)為8.76。Real

3、 Time PCR結(jié)果表明kzbZIP在頭節(jié)呈低豐度表達(dá)，在幼節(jié)也呈低表達(dá)，在成節(jié)表達(dá)量最低，在孕節(jié)則呈高表達(dá)。這表明kzbZIP作為轉(zhuǎn)錄因子，推測(cè)其在孕節(jié)組織中對(duì)某類生成蟲(chóng)卵的基因的表達(dá)調(diào)控起著非常重要的作用。 ⑵RAD51是一種DNA修復(fù)蛋白。我們通過(guò)cDNA文庫(kù)克隆得到了擴(kuò)展莫尼茨絳RAD51的cDNA序列，該基因全長(zhǎng)1615bp，包含一個(gè)ORF，編碼304個(gè)氨基酸，推測(cè)蛋白的理論分子量為33KDa，等電點(diǎn)為4.51，屬

4、于RAD51蛋白家族，與蠑螈氨基酸同源性達(dá)85.56％，命名為kzRAD51。Real Time PCR結(jié)果表明kzRAD51在頭節(jié)呈高豐度表達(dá)，幼節(jié)也呈高表達(dá)，在成節(jié)表達(dá)量最低，在孕節(jié)則呈低表達(dá)。這表明kzRAD51作為DNA修復(fù)基因，推測(cè)其對(duì)成節(jié)和孕節(jié)發(fā)育相關(guān)的某類基因的損傷修復(fù)起著重要的作用。 ⑶PKC是一種信號(hào)分子，廣泛參與細(xì)胞的信息傳遞和腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、增殖等過(guò)程。為了研究擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(chóng)PKC在其頭節(jié)、幼節(jié)、成

5、節(jié)、孕節(jié)生長(zhǎng)過(guò)程中的表達(dá)規(guī)律，我們從cDNA文庫(kù)中克隆得到了擴(kuò)展莫尼茨絳蟲(chóng)PKC的cDNA序列，該基因全長(zhǎng)1356bp，包含一個(gè)ORF，編碼379個(gè)氨基酸，推測(cè)蛋白的理論分子量為40KDa，等電點(diǎn)為9.19，屬于PKC蛋白家族，與水熄蟲(chóng)氨基酸同源性達(dá)57.1％，命名為kzPKC。RealTime PCR結(jié)果表明kzPKC在頭節(jié)呈低表達(dá)，幼節(jié)呈高表達(dá)，在成節(jié)和孕節(jié)上均呈是低表達(dá)。這表明kzPKC做為一種信號(hào)分子，可能影響著成節(jié)和孕節(jié)組織的