葡萄高溫脅迫對水楊酸誘導的蛋白激酶活性的影響.pdf

1、本研究以葡萄品種克瑞森無核（Vitis vinifera L.cv.Crimson Seedless）二年生扦插苗為試材，分三組處理，第一組，在25℃條件下，噴施水楊酸（Salicylic Acid，SA）濃度為150μmol·L-1，30 min后取樣，并以噴施蒸餾水為對照（CK）；第二組，在45℃高溫處理30min，并以25℃為對照；第三組，噴施SA濃度為150μmol·L-1后，在45℃高溫下處理30 min后取樣，并以噴施蒸餾水

2、后45℃處理30 min為對照（CK）。采用體外底物磷酸化方法對三組處理的葡萄葉片中蛋白激酶的活性進行了測定，探討三組處理對葡萄葉片蛋白激酶活性的影響，為進一步研究SA、高溫引起的葡萄植株體內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導提供依據(jù)。 試驗結(jié)果表明，三組處理均激活了葡萄葉片中能將底物MBP磷酸化的蛋白激酶，當MBP（myelin basic protein）濃度為0.5mg·ml-1時，三組處理的蛋白激酶活性達到最大值，而后，隨底物濃度的增加，活性開

3、始出現(xiàn)下降趨勢。該蛋白激酶對底物Histone-Ⅲ的作用很微弱，即使反應體系中有Ca2+存在時，蛋白激酶活性仍然沒有提高，因此可以初步表明此蛋白激酶不是CDPK家族中的成員。在以MBP為底物的反應體系中，ATP濃度為50μmol·L-1時，蛋白激酶活性活性最高，當ATP濃度為70μmol·L-1時，蛋白激酶活性下降到最低點；反應時間以10min為宜，反應10min時，三組處理（水楊酸處理、高溫處理、交叉處理）的蛋白激酶活性分別達到最大值