香菇單核菌絲誘變雜交及多糖高產(chǎn)菌株的篩選.pdf

1、針對(duì)目前香菇多糖生產(chǎn)成本高、產(chǎn)量小、價(jià)格昂貴的生產(chǎn)現(xiàn)狀，本研究采用紫外線輻射誘變與雜交育種相結(jié)合的育種手段選育香菇多糖高產(chǎn)菌株，利用拮抗試驗(yàn)、酯酶同工酶電泳試驗(yàn)篩選出發(fā)生突變的香菇單核體雜交組合，并探討了這些方法在香菇育種領(lǐng)域中的應(yīng)用。
　　 1.選取國(guó)內(nèi)不同地域香菇主栽品種9個(gè)，測(cè)定各品種的菌絲多糖含量，確定Cr-04，L-26為出發(fā)菌株，通過(guò)單孢分離、紫外線誘變、單孢雜交，共獲得204個(gè)具有鎖狀聯(lián)合的雜交菌株。
　　

2、 2.淘汰菌絲生長(zhǎng)過(guò)慢或菌絲微弱的雜交組合，將其它組合與其本進(jìn)行拮抗試驗(yàn)，其中有50個(gè)雜交菌株與其親本菌絲融合生長(zhǎng)，沒(méi)有產(chǎn)生拮抗線；另有56個(gè)菌株只與親本產(chǎn)生微弱拮抗；98個(gè)雜交菌株菌絲與其親本有明顯的拮抗線，說(shuō)明不是同種菌絲，獲得的是雜交新組合。
　　 3.通過(guò)對(duì)98個(gè)雜交菌株進(jìn)行菌絲生長(zhǎng)狀況比較分析，獲得X19，X29，X37，X42，X48，X51，X77，X86，X92，X98，X116，X134，X153，X159，X

3、167，X175，X185，X189，X239，X246，X259，X280，X301，X345，X350，X357，X356，X368，X382，X386，X432，X470，X480，X487，X525，X541，X583等37個(gè)菌絲表現(xiàn)為潔白濃密，菌絲生長(zhǎng)旺盛并菌落邊緣整齊的雜交菌株。
　　 4.通過(guò)對(duì)雜交菌株菌絲多糖含量的比較及多糖含量穩(wěn)定性分析，獲得X19，X29，X42，X77，X185，X246，X525等7個(gè)多糖

4、含量明顯高于親本Cr-04，L-26的富多糖雜交菌株。分別在培養(yǎng)9，10，11，12，13天時(shí)測(cè)定7個(gè)雜交組合的多糖含量，獲得多糖產(chǎn)量高峰期為第11天。采用垂直板聚丙烯酰胺凝膠不連續(xù)電泳方法，對(duì)雜交親本與7個(gè)富多糖雜交組合一同進(jìn)行酯酶同工酶分析，結(jié)果表明雜交新菌株具有“雜種新酶帶”和“互補(bǔ)型酶帶”，進(jìn)一步驗(yàn)證此7個(gè)菌株為優(yōu)良變異菌株。
　　 5.通過(guò)碳源、氮源及不同碳、氮濃度對(duì)香菇菌絲生物量及多糖產(chǎn)量影響的研究，香菇產(chǎn)多糖最佳碳