不同溫度干燥處理下的降香黃檀木材DNA提取方法的研究.pdf

1、傳統(tǒng)的木材識別技術(shù)主要是通過比較不同木材間的解剖特征和化學(xué)組分的差異將木材識別到屬。但近緣物種之間的木材解剖學(xué)特征差異性較小，采用傳統(tǒng)的木材識別方法難以科學(xué)、快速地鑒定木材。
　　隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，很多領(lǐng)域的科研工作者已將分子生物學(xué)技術(shù)大量應(yīng)用到自己的研究工作中，期望獲得更深層次的突破。分子生物學(xué)技術(shù)在法醫(yī)學(xué)和考古學(xué)研究鄰域的成功應(yīng)用，為科學(xué)準(zhǔn)確地識別木材提供了新的方法和手段。
　　從木材中提取出足夠質(zhì)量和數(shù)量的

2、DNA是應(yīng)用DNA技術(shù)識別木材的前提條件。相比較那些新鮮、幼嫩且具有分生能力的植物組織而言，從木材組織中提取和擴增DNA要困難的多。特別是在木材制品生產(chǎn)和加工過程中，需要對木材進(jìn)行高溫干燥處理，進(jìn)一步加劇木材DNA的降解增加木材DNA提取難度。因此，本研究以不同干燥溫度（25℃、40℃、60℃、80℃和105℃）處理的降香黃檀心、邊材為研究對象，采用改良的SDS法、CTAB法和PTB法提取不同干燥溫度處理的降香黃檀不同部位木材DNA，并

3、擴增其葉綠體（rbcL和trnH-psbA）和ITS2核基因DNA條形碼序列。比較采用三種DNA提取方法對不同干燥溫度處理對降香黃檀木材不同部位DNA提取質(zhì)量的差異，分析不同干燥溫度處理對降香黃檀木材DNA提取的影響，以期為高溫干燥木材DNA提取探尋最適的DNA提取方法。研究結(jié)果如下：
　　1.分別用改良的SDS法、CTAB法和PTB法提取1g未經(jīng)干燥處理的降香黃檀心、邊材DNA，經(jīng)純化后檢測DNA濃度和純度。分析不同DNA提取方

4、法對DNA濃度、純度以及不同部位的影響，試驗結(jié)果表明：改良的SDS法和CTAB法提取的邊材DNA濃度分別為88.4 ng/μL和208.6 ng/μL，A260/A280的值分別為1.96和2.00；心材DNA平均濃度分別為5.5 ng/μL和5.9 ng/μL，A260/A280的值分別為1.85和1.58。PTB法提取邊材和心材的濃度分別為58.5 ng/μL和14.8 ng/μL，A260/A280的值分別為2.80和2.82。因

5、此，改良的SDS法和CTAB法提取的DNA質(zhì)量要優(yōu)于PTB法；三種DNA提取方法提取的邊材的DNA濃度和純度均高于心材。
　　2.對降香黃檀木材進(jìn)行不同干燥溫度處理24h后，分別采用改良的SDS法、CTAB法和PTB法提取心、邊材DNA，分析不同干燥溫度對木材DNA濃度和純度的影響。試驗結(jié)果表明：隨著干燥溫度的升高，邊材 DNA濃度逐漸降低，105℃處理后的邊材DNA濃度最低。心材DNA濃度增加不明顯，且純度比邊材差，改良的SDS