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1、本研究旨在進(jìn)一步優(yōu)化和拓寬櫻桃不同基因型組織培養(yǎng)和快速繁殖體系,以離體葉片、離體葉柄、節(jié)間、根等多種外植體為試材,探討并豐富櫻桃遺傳轉(zhuǎn)化體系的再生系統(tǒng)。
以櫻桃雜種優(yōu)系‘F8’(Prunus.avium L.×Prunus . Pseudocerasus L.)、‘F10’(Prunus.avium L.×Prunus. Pseudocerasus L.)、‘H8’(Prunus. Cerasus L ×Prunus.ps
2、eudocerasus L.)和‘H10’(Prunus. Cerasus L ×Prunus.pseudocerasus L.)的莖尖為材料,MS和F14為基本培養(yǎng)基,通過(guò)添加不同濃度的6-芐基氨基腺嘌呤(6-BA)、3-吲哚丁酸(IBA)、赤霉素(GA3)進(jìn)行雜種櫻桃再生體系的構(gòu)建研究,結(jié)果表明:F14+6-BA (0.3~0.5)mg/L+GA30.1 mg/L適合各個(gè)雜種優(yōu)系初代培養(yǎng)誘導(dǎo)出植株,F(xiàn)14+6-BA (0.5~1.0
3、)mg/L+IBA(0.1~0.3)mg/L +GA30.1mg/L能夠很好的促進(jìn)各個(gè)雜種優(yōu)系分化不定芽,1/2MS+IBA0.5mg/L(或NAA 0.8mg/L)是各個(gè)雜種優(yōu)系的最佳生根培養(yǎng)基。
以甜櫻桃(Prunus avium L.)品種‘meizao’和‘Summit’、雜種優(yōu)系‘F8’、‘F10’、‘H8’和‘H10’等不同基因型的試管苗為材料,進(jìn)行櫻桃離體葉片、葉柄、子葉、節(jié)間、根再生試驗(yàn)。結(jié)果表明:甜櫻桃品
4、種‘meizao’的離體葉片在WPM+6-BA 2.0mg/L +IAA 2.0mg/L +GA30.1mg/L培養(yǎng)基上,不定芽再生率可達(dá)到90%,‘H10’、‘Summit’、‘F10’、‘F8’在6-BA2~2.5mg/L、IAA 1.0~2.0mg/L的激素配比范圍內(nèi),也獲得了76.0%、86.0%、80.0%、64.0% 的再生率。離體葉片接種后暗培養(yǎng)1周、遠(yuǎn)軸面向下接種和選擇試管苗上部的幼嫩葉片,均有利于葉片再生。優(yōu)系‘H10
5、’葉柄接種于改良MS+6-BA2.0 mg/L+IBA0.1mg/L +2,4-D0.5mg/L的培養(yǎng)基,可獲得40.0%的再生率,其他品種僅有H8的葉柄獲得了少量的再生植株。選擇帶一小塊葉片的葉柄和5mg/L的硝酸銀處理有利于葉柄再生;優(yōu)系‘F10’的幼嫩節(jié)間接種于LS+6-BA1.0mg/L+NAA2.0 mg/L+CH100mg/L培養(yǎng)基,最高再生率為40.0%,在6-BA1~2mg/L和NAA1~2mg/L的激素配比范圍內(nèi),‘H
6、8’、‘H10’的離體節(jié)間再生率最高分別為25.0%和30.0%。選擇試管苗黃化處理的節(jié)間,再生率要低于未經(jīng)過(guò)黃化處理的節(jié)間;優(yōu)系‘H8’整體根在MS+6-BA1.0mg/L +2,4-D2.0mg/L + IBA0.05mg/L + NAA 0.05mg/L的培養(yǎng)基上,達(dá)到了96.7%的再生率,在6-BA 0.5~2mg/L和2,4-D 0.5~2.0mg/L的激素配比范圍內(nèi),‘H10’、‘F8’、‘F10’離體根再生率分別為93.3
7、%、96.7%和93.3%。另外,根切段接種沒(méi)有整體根再生頻率高。
以櫻桃雜種優(yōu)系‘H8’試管苗的離體節(jié)間和中國(guó)櫻桃‘對(duì)櫻’的試管苗離體葉片為材料,MS為基本培養(yǎng)基,通過(guò)調(diào)整植物激素種類和濃度,篩選適合‘H8’試管苗離體節(jié)間和‘對(duì)櫻’離體葉片再生不定根的培養(yǎng)基配方,結(jié)果表明:‘H8’離體節(jié)間和‘對(duì)櫻’離體葉片,均在培養(yǎng)基MS+NAA1.0mg/L上獲得了最大的不定根再生率64.0%和80.0%,NAA濃度過(guò)大或過(guò)低均不利于
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