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文檔簡介
1、本研究以雞IGF-I基因作為影響雞生長性能和產(chǎn)蛋性能的候選基因,采用測序、PCR-SSCP和PCR-RFLP技術(shù)分析了該基因5'UTR核苷酸序列的變異,并研究IGF-Ⅰ基因?qū)┖|S雞的生長性狀的影響;對所發(fā)現(xiàn)的基因在京海黃雞連續(xù)3個世代的遺傳特性進行了研究,探討多態(tài)性與生長性狀的關(guān)系,挖掘新的有利于經(jīng)濟性狀的基因座位,以及選育過程對IGF-Ⅰ基因在世代間傳遞的影響。利用優(yōu)良基因,最終通過標(biāo)記輔助選擇可以加速經(jīng)濟性狀的改良速度和新品種的培
2、育進程,從而為我國雞的標(biāo)記輔助選擇提供新的有效的分子標(biāo)記,積累有價值的參考資料。本論文得到的結(jié)論如下:
利用測序、PCR-SSCP和PCR-RFLP技術(shù)分析了該基因5'UTR核苷酸序列的變異,共發(fā)現(xiàn)8個多態(tài)位點,其中7個SNP多態(tài)位點,一個小片段GAAAA的插入。7個SNP中5個為GA突變,一個CT突變,均為轉(zhuǎn)換,一個AC突變屬于顛換。按其所在DNA序列位置將突變位點命名分別為:G49754A、G49778A、G49824
3、A、A49944C、G49961A、G50034A、DelGAAAA50077以及C50180T。
G49754A、G49778A和G50034A位置突變分別導(dǎo)致Tru1I和TaiI和PstI酶切位點發(fā)生改變,并發(fā)現(xiàn)PstI酶切位點與Nagaraja等發(fā)現(xiàn)的PstI酶切位點為同一酶切位點。
Tru1I和TaiI酶切結(jié)果及SSCP結(jié)果均顯示G49754A和G49778A位點完全連鎖,實驗中將G49754A和G4
4、9778A位點看做一個位點記為G49754A/G49778A位點。
PstI酶切時發(fā)現(xiàn)DelGAAAA50077位點的N等位基因總是與G50034A位點A等位基因同時出現(xiàn),說明在京海黃雞中G50034A位點的A等位基因和DelGAAAA50077位點的N等位基因可能為連鎖。
本文研究了京海黃雞、尤溪麻雞以及AA雞中G49754A/G49778A、G50034A和DelGAAAA50077位點的基因型,表明外來
5、雞種AA雞未檢測到突變;G49754A/G49778A和G50034A位點在京海黃雞和尤溪麻雞中均以雜合型居多;DelGAAAA50077位點只有京海黃雞中檢測到。
連鎖不平衡分析結(jié)果顯示京海黃雞中G49754A與G49778A為完美連鎖不平衡,G50034A與DelGAAAA50077位點間具有很強連鎖不平衡,G49754A/G49778A與G50034A位點間達到了較強的連鎖不平衡關(guān)系;G49754A/G49778A和
6、DelGAAAA50077位點之間連鎖不平衡則較弱。
京海黃雞中G49754A/G49778A、G50034A和DelGAAAA50077位點理論上應(yīng)有8種單倍型組合,實際檢測出有效單倍型(P>0.03)只有4種,其中又以AAGN、GGAN單倍型組合為主。
通過IGF-Ⅰ基因G49754A/G49778A、G50034A和DelGAAAA50077位點各基因型與產(chǎn)蛋性狀的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),3個多態(tài)位點與300日
7、齡產(chǎn)蛋數(shù)和平均蛋重均無顯著影響(P>0.05)。
與生長性狀的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),G49754A/G49778A位點對初生重有顯著差異外,對4、8周齡體重均無影響,12、16周齡以及300日齡體重中AA/AA基因型均大于其他基因型,可以推斷在12周齡之后增重中A/A等位基因為優(yōu)勢基因。G50034A位點對初生重、4、8周齡體重均無影響,12、16周齡以及300日齡體重中GG型均大于其他基因型,可以推斷在12周齡之后增重中G等位
8、基因為優(yōu)勢基因。DelGAAAA50077位點對初生重、4、8、12、16周齡以及300日齡體重中DD型均小于NN型和ND型,且NN型16周齡體重顯著大于DD型。
本文研究了G49754A/G49778A、G50034A、DelGAAAA50077、InsAA56493和G95852A位點(后2個位點為實驗室之前發(fā)現(xiàn)的突變位點)連續(xù)3個世代的遺傳規(guī)律,結(jié)果表明G49754A/G49778A、G50034A和G95852A位
9、點基因型頻率呈規(guī)律性變化。G49754A/G49778A位點AA/AA型頻率由7世代0.234到9世代0.393,AA等位基因由7世代0.493增加到9世代0.628;G50034A位點的AA基因型頻率由7世代0.291增加到9世代0.325,A等位基因在7世代的0.541增加到9世代0.573;G95852A位點GG型頻率由7世代的0.110到9世代的0.308,G等位基因頻率隨著世代的增加由7世代0.344增加到9世代0.547。<
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