普通小麥中春化基因VRN1及甲基轉(zhuǎn)移酶基因的克隆及表達(dá).pdf

1、通過PCR特異擴(kuò)增技術(shù)克隆了春化基因VRNl,分析了其組成和表達(dá)特性。利用4個具有不同顯性春化基因型的小麥品種與4個隱形基因型品種進(jìn)行了雜交實驗,并分析了F1代植株與親本的表型特性。克隆了5個小麥甲基轉(zhuǎn)移酶基因,分析了它們在遼春10號和京841中的表達(dá)特性。論文的主要結(jié)果如下:
　　 1.通過RT-PCR技術(shù)克隆了普通小麥中春化基因VRNl,分析了三個等位基因VRN-A、VRN-B,和VRN-D1,依據(jù)它們的序列特性設(shè)計特異性引

2、物,并通過半定量RT-PCR方法分析了3個等位基因在不同春化處理條件下小麥不同葉齡的葉片中的表達(dá)特性。結(jié)果表明:在強(qiáng)春性品種新春10號中,其Vrn-Al、Vrn-B1和Vrn-D1在各個時期均表達(dá)。在春化處理0d和春化處理20d中,表達(dá)量逐漸遞增。在春化處理30d時,Vrn-Al、Vrn-B1和Vrn-D1在各個時期表達(dá)量無明顯差異,春化處理對表達(dá)量的影響不大。在冬麥京841中,春化處理促進(jìn)了京841葉片中vrn1的表達(dá),其影響強(qiáng)度具有

3、vrn-A1>vrn-B1>vrn-D1的趨勢。
　　 2.用4個含顯性春化基因VRN1的小麥品種遼春10號、新春2號、鄭麥9023、豫麥18與4個含隱性春化基因VRN1的小麥品種周麥18、豫麥49-198、京841、新冬22進(jìn)行正反交試驗,將顯性春化基因VRN1導(dǎo)入冬小麥中。結(jié)果顯示,顯性春化基因VRN1已經(jīng)導(dǎo)入到各雜交F1代植株中,且其苗穗期受顯性春化基因的控制而有效縮短:在農(nóng)藝形狀方面,8個品種間的正反交在株高、穗長、穗粒

4、數(shù)、千粒重上,相對于親本具有優(yōu)勢,表現(xiàn)出明顯的雜種優(yōu)勢。特別是新冬22與豫麥18的雜交F1代雜種優(yōu)勢較強(qiáng),研究結(jié)果為進(jìn)一步開展春化發(fā)育特性遺傳改良及雜交育種提供了重要資料。
　　 從穗形來看,京841與四個春性品種之間的雜交組合存在較大的差異,且在正反交F1代之間也存在顯著差異；例如,在雜交F1代中,春性親本的長芒特性消失,推斷麥穗的長芒特性受隱性基因調(diào)控,進(jìn)一步證實需要看其后代的分離情況。
　　 3.通過對擬南芥等其它

5、植物的甲基轉(zhuǎn)移酶基因信息,結(jié)合生物信息學(xué)分析技術(shù)設(shè)計了針對小麥甲基轉(zhuǎn)移酶基因的特異引物,并利用RT-PCR技術(shù)克隆了小麥的5個甲基轉(zhuǎn)移酶基因TaCMT、TaMET2、TaMET3、TaMET5和TaMET4。通過與擬南芥中的甲基轉(zhuǎn)移酶的比較分析表明:TaCMT與擬南芥中的AtCMT3同源關(guān)系最近；TaMET2與擬南芥中AtDNMT2同源關(guān)系最近；TaMET3、TaMET5與擬南芥中.AtDRM1的親緣關(guān)系近；TaMET4與擬南芥中AtD