大豆根腐病生防菌的鑒定及發(fā)酵條件的優(yōu)化.pdf

1、為明確HNDF2菌的分類地位并研究其對大豆根腐病的防治效果，對HNDF2菌進行了分類鑒定、發(fā)酵條件優(yōu)化及室內(nèi)抑菌效果檢測等試驗。
　　 利用側(cè)孢芽孢桿菌BL-21發(fā)酵液、HNDF2菌株發(fā)酵液及兩菌1∶1混合發(fā)酵液對引起大豆根腐病的4種病原真菌進行了生防效果的比較，結(jié)果表明三種發(fā)酵液對大豆根腐病病菌均有生防效果。其中HNDF2菌株在雙對峙平板培養(yǎng)試驗中顯示對尖孢鐮刀菌、立枯絲核菌、禾谷鐮刀菌和串珠鐮刀菌的拮抗作用效果明顯，分別為6

2、0.61％、27.5％、91.20％和54.67％；HNDF2菌株發(fā)酵液對4種病原真菌的菌絲體生長抑制率分別為26.23％、23.86％、53.82％和67.62％。
　　 大豆萌發(fā)及試管苗促生作用結(jié)果顯示：BL-21、HNDF2、及兩菌1∶1混合發(fā)酵液均能有效地促進大豆幼苗的生長。其中，HNDF2菌發(fā)酵液對株高的增高率為21.49％，對根長的增長率為18.27％。溫室盆栽試驗結(jié)果表明：三種發(fā)酵液處理都能降低大豆根腐病的發(fā)病程度

3、，病情指數(shù)分別為65.56、68.89和69.17，顯著低于對照組91.67，防效分別為28.48％、24.85％、24.54％。經(jīng)過HNDF2菌株發(fā)酵液處理的植株，根長、根干重、根瘤數(shù)、結(jié)莢數(shù)和百粒重等有明顯提高。
　　 通過對HNDF2菌株的形態(tài)特征、培養(yǎng)特征和生理生化特征分析，并結(jié)合16SrDNA序列的分子鑒定結(jié)果，表明HNDF2菌株為枯草芽孢桿菌。
　　 通過單因素試驗和響應(yīng)面優(yōu)化法對枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)基配方進行

4、了優(yōu)化。單因素試驗結(jié)果表明以葡萄糖為碳源，蛋白胨為氮源，加入Mn2+、Ca2+和廣能提高HNDF2發(fā)酵液的抑菌效果。通過響應(yīng)面優(yōu)化法確定了最佳培養(yǎng)基配方為：葡萄糖9.64g/L、蛋白胨12.15g/L、碳酸鈣2.44g/L、NaCl4g/L、KH2PO40.2g/L、MnSO40.5g/L。采用優(yōu)化的培養(yǎng)基制備的發(fā)酵液進行抑菌試驗，病原菌菌落直徑為17.43mm，與預(yù)測值接近，說明優(yōu)化模型可靠。通過單因素試驗優(yōu)化的發(fā)酵條件為34℃，pH