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1、甜瓜病害鑒定:甜瓜根腐病甜瓜病害鑒定:甜瓜根腐病MelonFusariumrootrot(注:原內(nèi)容本來自,在其管理員的要求下,已刪除)洋香瓜黑點根腐病菌的生態(tài)與防治蔡竹固童伯開陳瑞祥國立嘉義技術(shù)學(xué)院植物保護系前言引起洋香瓜黑點根腐病(Monosprusrootrotvinedecline)的病原是一種子囊菌,學(xué)名為MonospuscannonballusPollack&Uecker。在1970年,Troutman和Matejka從美國
2、亞利桑那州的洋香瓜病株分離到一種未鑒定真菌,能夠造成側(cè)根的腐敗,病根散生許多黑色圓形小點。到了1974年,Pollack和Uecker報告從亞利桑那州Troutman和Matejka所提供分離自洋香瓜的病原菌被鑒定為M.cannonballus,且報告這是一個子囊菌新種,此后文獻乃采用本學(xué)名。在美國、利比亞、以色列、日本、韓國、西班牙等國家,都已報導(dǎo)發(fā)生本病害,本病已是全球瓜類產(chǎn)區(qū)之新興重要病害。1994年蔡及童報告本病在臺灣的洋香瓜田
3、發(fā)生,且鑒定病原為M.cannonballus。19941995年,在臺灣南部瓜田調(diào)查萎凋病發(fā)生情形鹽埔、鹿草、佳里、東山及澎湖等洋香瓜產(chǎn)區(qū),都可采集到黑點根腐病株。觀察其根系呈水浸狀褐變枯死,細根脫落,在枯死的根上散生著許多小黑點(病原菌的子囊殼)。發(fā)病率在27.558%之間,066%的病根上,可觀察到形成子囊殼。在臺灣,其它零星發(fā)生而能夠造成萎凋病征的病原有蔓割病(Fusariumoxyspumf.sp.melonis)、炭腐病(M
4、acrophominaphaseolina)、黑腐病(Lasiodiplodiatheobromae)、細菌性軟腐病(Erwiniacarotovasubsp.carotova)、蔓枯病(Didymellabryoniae)。一些病毒種類也能夠造成洋香瓜的萎凋問題。根據(jù)美國植物病理學(xué)會最近出版的「瓜類作物病害概要」一書,土壤傳播性病原真菌引起的瓜類病害即多達9種??梢娧笙愎现蚧驍√伲且环N多病因的病害。國內(nèi)學(xué)者專家在行政院農(nóng)委會的經(jīng)
5、費補助下,已就此問題做一系列的研究工作,希望能夠找出有效的解決方法。本文僅就洋香瓜黑點根腐病菌的生態(tài)與防治簡要敘述,供瓜類作物產(chǎn)業(yè)之參考。病征及田間診斷本病的地上部病征在果實肥大期從下位葉開始黃化,中午時呈現(xiàn)萎凋。收獲前或收獲期間,性,可抑制莖、根生長,且降低出土率(2)。此外,亦可感染菜豆、玉米、高梁和甜菜,且有3370%的分離率。Monospusspp.也被發(fā)現(xiàn)或分離自非瓜類作物,包括土牛膝(AchyranthesasperaL.)
6、、紫花苜蓿(MedicagosativaL.)、紅三葉草(TrifoliumpratenseL.)、小麥(Triticumsp.)和胡麻(SesamumindicumL.)。接種方法1.接種源的制作:直徑9cm培養(yǎng)皿內(nèi)PDA培養(yǎng)25日菌落已形成了子囊殼,連同培養(yǎng)基將菌落細細切碎?;?qū)⒉≡囵B(yǎng)在砂燕麥麩培養(yǎng)基(soathullmedium)這培養(yǎng)基含有3L砂、275g干燕麥麩和450ml蒸餾水。將其充分混合后裝入滅菌袋中,連續(xù)滅菌3次。
7、每袋中接種10ml的本菌菌絲懸浮液此懸浮液乃以在PDA培養(yǎng)5-10天的菌絲體加入75ml無菌水研磨。經(jīng)過在30℃培養(yǎng)35-40天之后,定量其中的子囊孢子和營養(yǎng)菌絲體cfu(colonyfmingunit)數(shù)量。在本省,以砂米糠培養(yǎng)基(sricebranmedium)或稻殼米糠培養(yǎng)基(ricechaffricebranmedium)培養(yǎng)本菌,也很適合。2.溫室試驗:采3L黑色塑料盆,蒸氣滅菌(steampasteurized)砂和介質(zhì)pe
8、rlite(4:1VV)事先混合,每盆加入25或50cc的接種源,在盆頂下56cm加入接種源,然后再填入45cm的介質(zhì)。對照組和接種組的差別在,加入等量的滅菌燕麥麩。試驗植株每盆加入250ml的營養(yǎng)液,營養(yǎng)液配方為Peters20:20:202g/L,MgSO4?7H2O0.25g/L和Micronutrients(Stem)0.01g/L。蟲害的防治,每57天噴藥一次。89周之后洗去盆土,調(diào)查根系的主根和側(cè)根的罹病度區(qū)分為0(健康)4
9、(嚴重病斑或壞疽)間共有9個等級。接種和對照組的根系,以1020倍解剖顯微鏡調(diào)查子囊殼數(shù)目,調(diào)查每株主蔓長度和根系及頂部(tops)的干重量。3.微區(qū)試驗:微區(qū)(0.61.00.6m)事先熏蒸處理。每區(qū)接種源的加入,先移去35cm表土,撒入300g接種源(=280g干重)和240c.c.的Osmocote14:14:14緩效性肥料,充分混合后,再放回表土。每區(qū)播入510種子,1020天后,留下3株。表面滴灌,按需要噴灑農(nóng)藥。9周后調(diào)查藤
10、枯程度(無、輕微、中度和嚴重)。病害環(huán)尚未有針對本菌的選擇性培養(yǎng)基。所以對于本病害的管理,有待發(fā)展出偵測和定量土壤中接種源的方法。以蔗糖梯度離心分離土壤線蟲的方法,可以用諸于本菌子囊孢子的定量。在實驗室內(nèi),每一土壤樣品先經(jīng)過4mm篩子,取20g土壤混合200ml的自來水,以磁石旋轉(zhuǎn)攪拌810min,再以75和38μm的冶金用篩(metallurgicalsieves)過濾,濾在38μm篩子的物質(zhì)將之洗入50ml離心管,且以2000g離心
11、4min。上層液慢慢倒出,將沈降物再懸浮于50%蔗糖溶液,在2000g下離心2min。將懸浮或漂浮的子囊孢子或其它物質(zhì)倒入一小篩子(直徑8cm,38μm),且洗入一干凈的離心管。將沈降物再第二次蔗糖萃取去收回第一次萃取時漏失的子囊孢子。第二次萃取得到的懸浮液倒入第一次萃取液中,且存放于5℃。以一長方形塑料皿,在解剖顯微鏡2530倍,側(cè)光及底光下計量。筆者將田間洋香瓜黑點根腐病株之根系放置陽臺上,定期采樣做真菌分離時,1.5個月后,無法再
12、分離到黑點根腐病菌。將人工培養(yǎng)病土放置陽臺上,定期采土樣種植洋香瓜香蘭品種之幼苗,再從其根系做真菌分離時,10個月后,無法再分離到黑點根腐病菌。Mertely等人以蔗糖梯度離心分離法定量土壤中接種源,發(fā)現(xiàn)M.cannonballus的子囊孢子主要存在于畦內(nèi),土壤深度10-20cm處;子囊孢子在連作、塑料布畦面覆蓋、點滴灌溉的瓜田之數(shù)量,較輪作、未覆蓋、溝灌的瓜田為少。Stanghellini等人指出M.cannonballus的子囊孢子
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