紫蘇高產(chǎn)迷迭香酸懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)條件優(yōu)化.pdf

1、本實驗以紫蘇外植體作為研究材料，以建立并且優(yōu)化高產(chǎn)迷迭香酸的紫蘇細(xì)胞懸浮體系為目的，分別從紫蘇外植體的消毒，愈傷組織的誘導(dǎo)，細(xì)胞懸浮體系的建立以及懸浮培養(yǎng)條件的優(yōu)化等方面進(jìn)行了研究。其研究結(jié)果如下：
　　 ⑴分別以紫蘇葉片、莖段、子葉為外植體，采用0.1％升汞溶液和2％次氯酸鈉溶液以不同處理時間對外植體進(jìn)行消毒，探討不同處理條件對外植體污染率和誘導(dǎo)率的影響。結(jié)果表明，綜合考慮紫蘇葉片，莖段，子葉的污染率與誘導(dǎo)率，選取紫蘇的葉片進(jìn)

2、行愈傷組織的誘導(dǎo)，先用75％乙醇處理30S，再用0.1％升汞溶液處理7min，此時污染率為5％，誘導(dǎo)率為80.7％。
　　 ⑵分別向B5、MS兩種基本培養(yǎng)基中添加不同濃度的激素組合，通過正交實驗，研究不同培養(yǎng)基以及激素濃度對紫蘇葉片愈傷組織誘導(dǎo)率的影響。綜合考慮愈傷組織的誘導(dǎo)率以及愈傷組織的生長狀況，可以得出，紫蘇的葉片誘導(dǎo)愈傷組織的最優(yōu)培養(yǎng)基為B5培養(yǎng)基，添加激素為2，4-D1.0mg/L，KT0.4mg/L，6-BA1.0m

3、g/L,NAA1.5mg/L。
　　 ⑶以懸浮細(xì)胞中迷迭香酸含量為最終考察目標(biāo)，通過單因素實驗以及正交實驗表明，紫蘇懸浮細(xì)胞較好培養(yǎng)體系為B5液體培養(yǎng)基，pH6.0，蔗糖濃度4.0％，肌醇濃度150mg/L,6-BA2.0 mg/L,2,4-D2.0 mg/L,KT0.4 mg/L,NAA1.5 mg/L。
　　 ⑷通過高效液相色譜測定紫蘇外植體，愈傷組織以及懸浮細(xì)胞中迷迭香酸的含量，可以得出葉片中含量為0.25％，莖中