雞貧血病毒(CAV)vp1基因克隆與表達的研究.pdf_第1頁
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1、山東師范大學碩士學位論文雞貧血病毒(CAV)vp1基因克隆與表達的研究姓名:張剛申請學位級別:碩士專業(yè):動物學指導教師:李云龍2001.4.30雞貧血病毒vpI爺因克隆i.j表達的研究雞貧血病毒(CAV)vpl基因克隆與表達的研究摘要雞貧血病毒(chickenanemiavirusCAV)是雞傳染性貧血病(chickeninfectiousanemiaVIA)的病原,屬圓環(huán)病毒科(Circoviridae)o(CAV基因組編碼三種蛋白:

2、VP1(51.6KD)VP2(24.OKD)VP3(13.6KD),其中VPl是CAV的唯一衣殼蛋白,是CAV的保護性抗原,與VP2共同誘導雞產(chǎn)生免疫保護作用。尹本研究根據(jù)CAVvpl的基因序列設計合成一對引物,通過PCR方法對vpl基因進行擴增,并把vpl基因連接到克隆載體PUC18上,在大腸桿菌DI15a中進行克隆。用末端雙脫氧終止法測定vpl基因的序列,證明vpl基因共含1347bpoDNABlast分析表明,該基因與GeneBa

3、nk中已發(fā)表的vpl基因序列的一致性為95%左右,具有較大差異。這些差異導致vpl基因編碼蛋白的氨基酸發(fā)生改變。把克隆的vpl基因亞克隆到表達載體pET30(b)上,并在大腸桿菌DE3中用IPTG誘導表達。SDSPAGE電泳鑒定證明VPl蛋白成功表達,其分子量為51.6KDovpl基因的成功克隆與表達,為VPl蛋白的免疫學研究和CAV基因工程疫苗的研制奠定了基礎。關鍵詞:雞貧血病顴CAV)(PCR),基因克隆丫vpl,八合酶鏈式反了表達

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