水稻?；D(zhuǎn)移酶基因的克隆、功能分析及轉(zhuǎn)AtMYB12基因番茄的獲得.pdf

1、酰基轉(zhuǎn)移酶是一個(gè)多功能蛋白質(zhì)大家族,其功能具有多樣性。其中一個(gè)主要功能就是催化蛋白質(zhì)的?；腿ヵ；?N-乙?；D(zhuǎn)移酶(N-acetyltransferase,NAT)可催化乙酰基從乙酰CoA上轉(zhuǎn)移到異煙肼的氮原子上;組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶(HAT)和組蛋白脫乙?；?histone deacetylase,HDAC)分別催化組蛋白N-端殘基上的乙?；腿ヒ阴；?而?；腿ヵ；质钦婧松锏鞍踪|(zhì)翻譯后修飾中最普遍的方式,所以在某種意義上

2、講,?；D(zhuǎn)移酶又有調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)生物活性、基因表達(dá)等多種功能。但是在機(jī)體內(nèi),有著多種?；D(zhuǎn)移酶,除了催化蛋白質(zhì)的酰基化和去?；?還發(fā)揮著其他重要的功能,例如脂酰輔酶A:膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(ACAT)所催化的膽固醇的酯化反應(yīng)無論在細(xì)胞還是個(gè)體水平的膽固醇代謝平衡中都發(fā)揮了極其重要的作用。
　　 本研究的目的是分離克隆通過同源序列法鑒定的水稻中的BAHD?；D(zhuǎn)移酶基因,并運(yùn)用超量表達(dá)技術(shù),RNA干涉(RNAi)技術(shù),研究這些基因在水稻

3、次生代謝、生物脅迫和非生物脅迫中的功能,對(duì)涉及到這些基因參與的水稻抗病抗逆機(jī)理進(jìn)行初步探索。
　　 具體結(jié)果如下:
　　 1.分別克隆了Os02g39850全長cDNA、Os04g42250全長cDNA、Os06g08640全長cDNA、Os09g25460全長cDNA和Os10g3950全長cDNA。構(gòu)建了植物表達(dá)載體ds1301:Os02g39850、pU1301:Os04g42250、ds1301:Os04g422

4、50和ds1301:Os06g08640。將所構(gòu)建的重組植物表達(dá)載體利用凍融法直接導(dǎo)入農(nóng)桿菌EHA105。
　　 2.用農(nóng)桿菌侵染的方法,將植物表達(dá)載體ds1301:Os02g39850、pU1301:Os04g42250、ds1301:Os04g42250和ds1301:Os06g08640轉(zhuǎn)入水稻中。目前獲得Os04g42250超量表達(dá)植株6株,Os04g42250抑制表達(dá)植株17株,超量表達(dá)載體轉(zhuǎn)化水稻陽性率為75％,抑制

5、表達(dá)載體轉(zhuǎn)化水稻陽性率為44.7％。
　　 3.Os04g42250超量表達(dá)植株和抑制表達(dá)植株接種白葉枯病菌PX099,10天后,觀察癥狀。其中7株抑制表達(dá)載體轉(zhuǎn)基因植株的平均病斑長度為9.0±1.2 cm,而對(duì)照野生型中花11的平均病斑長度為5.0±0.6cm,4株超量表達(dá)載體轉(zhuǎn)基因植株的平均病斑長度為1.3±0.3cm。這些結(jié)果說明,Os04g42250基因沉默后,植株更容易感病,發(fā)病癥狀更加明顯,而Os04g42250基因

6、在水稻中超量表達(dá)后,提高了植株的抗性。
　　 生物類黃酮具有多種生物活性,可用于延緩衰老,治療和預(yù)防癌癥、心血管病等疾病,具有很大的開發(fā)應(yīng)用價(jià)值。當(dāng)前滿足市場需求的途徑主要是通過化學(xué)方法從天然材料如銀杏、水果中提取,其成本高,含量少。本研究擬通過。AtMYB12基因,果實(shí)特異性表達(dá)啟動(dòng)子E8和無選擇標(biāo)記載體PX6-GFP,構(gòu)建植物表達(dá)載體pX6-AtMYB12-E8,來對(duì)小果型番茄進(jìn)行基因工程改造,特異性調(diào)控表達(dá)基因AtMYB1