血塞通及L-NNA對(duì)家兔腦紋狀體出血后NOS的影響及其對(duì)腦神經(jīng)元的保護(hù)作用.pdf

1、本試驗(yàn)用兔作為試驗(yàn)動(dòng)物成功制備了腦出血(ICH)模型，然后分別用血塞通和NOS抑制劑L-NNA對(duì)成功模型兔進(jìn)行比較治療。通過(guò)測(cè)定各組兔血清和紋狀體內(nèi)NO含量、NOS活性以及各腦組織內(nèi)NOS陽(yáng)性神經(jīng)元的表達(dá)的變化來(lái)探討ICH發(fā)病機(jī)理與NO的關(guān)系，NOS抑制劑(L-NNA)和血塞通對(duì)其主要病變部位NO、NOS神經(jīng)元的影響。
　　 運(yùn)用腦立體定位及微量注射技術(shù)將自體動(dòng)脈血注射入右側(cè)紋狀體靶點(diǎn)內(nèi)，制備腦出血兔模型，并通過(guò)行為學(xué)及免疫組織

2、化學(xué)方法對(duì)模型進(jìn)行檢測(cè)。行為學(xué)檢測(cè)結(jié)果及HE染色鏡檢顯示，本試驗(yàn)制備的兔模型達(dá)到成功模型標(biāo)準(zhǔn)。
　　 利用硝酸還原酶法和生物化學(xué)檢測(cè)方法分別檢測(cè)各組兔血清及紋狀體內(nèi)的NO含量及各腦組織內(nèi)NOS的活性變化。結(jié)果顯示：模型對(duì)照組的血清NO濃度和各腦紋狀體內(nèi)NO含量都顯著高于假手術(shù)對(duì)照組和兩個(gè)治療組；血塞通組及L-NNA組上述指標(biāo)與模型組顯著性差異(P<0.05)。NOS活性檢測(cè)結(jié)果顯示，各組對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)內(nèi)TNOS活性強(qiáng)弱順序均為：模型

3、組>血塞通組>L-NNA組>正常及假手術(shù)對(duì)照組。iNOS活性變化表現(xiàn)為：模型組前期(1d以前)iNOS活性升高不顯著(P>0.05)，中后期活性顯著升高(P<0.05)；兩治療組iNOS活性變化規(guī)律表現(xiàn)為前期與模型組基本一致，1d-7d其活性顯著低于模型組(P<0.05)，但較假手術(shù)對(duì)照組仍有升高，9d時(shí)基本恢復(fù)至正常組水平，兩治療組之間比較前期(1d以前)L-NNA降低iNOS活性的效果好于血塞通治療組，后期差異不顯著(P>0.05)

4、。
　　 利用SABC免疫組織化學(xué)法，在光鏡下對(duì)各組兔術(shù)后不同時(shí)間內(nèi)腦紋狀體nNOS、iNOS陽(yáng)性神經(jīng)元的形態(tài)結(jié)構(gòu)及分布進(jìn)行觀測(cè)。結(jié)果顯示：模型組nNOS陽(yáng)性神經(jīng)元表達(dá)與假手術(shù)組比較在3d以前表現(xiàn)為神經(jīng)元密度逐漸升高，胞體截面積減小，突起長(zhǎng)度縮短和第一級(jí)突起數(shù)量減少，在術(shù)后3d達(dá)到最低點(diǎn)；隨后神經(jīng)元密度逐漸降低，截面積變大，突起數(shù)量增多等。模型組與假手術(shù)組比較各項(xiàng)指標(biāo)在各時(shí)間段差異顯著(P<0.05)；L-NNA治療組和血塞通治

5、療組與模型組比較nNOS陽(yáng)性神經(jīng)元密度在1d和3d兩個(gè)時(shí)間段顯著性降低(P<0.05)，胞體截面積顯著增大(P<0.05)，最長(zhǎng)突起長(zhǎng)度和第一級(jí)突起數(shù)量增加。兩治療組之間各項(xiàng)指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。iNOS陽(yáng)性神經(jīng)元的表達(dá)與nNOS的表達(dá)基本一致，iNOS在前期表達(dá)痕量，在腦出血損傷后表達(dá)急劇上升，表現(xiàn)為模型組比假手術(shù)組iNOS密度的快速升高上；兩治療組與模型組比較iNOS陽(yáng)性神經(jīng)元密度在3d、5d較模型組顯著降低(P<0.05

6、)，9d時(shí)差異不顯著(P>0.05)。
　　 結(jié)果表明：模型組腦紋狀體內(nèi)內(nèi)NO及血清NO含量隨著時(shí)間的延續(xù)，含量持續(xù)的增加，到達(dá)3d時(shí)達(dá)到巔峰隨后逐漸降低，且在9d左右基本恢復(fù)到正常水平。而通過(guò)L-NNA和血塞通治療的家兔腦紋狀體NO含量及血清NO含量在各時(shí)間段顯著低于模型組，且通過(guò)檢測(cè)腦紋狀體NOS活性與NO的變化呈正相關(guān)。血塞通及L-NNA治療組6h、1d、3d兔腦組織陽(yáng)性神經(jīng)元的數(shù)量、胞體截面積及最長(zhǎng)突起長(zhǎng)度變化顯著，神經(jīng)