煙草灰霉病復(fù)合生防細(xì)菌的篩選及其防治效果測(cè)定.pdf

1、煙草灰霉病是近年來(lái)廣西煙草病害調(diào)查中當(dāng)?shù)匦掳l(fā)現(xiàn)的病害。目前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上防治灰霉病主要依靠化學(xué)藥劑，而化學(xué)藥劑容易造成病菌產(chǎn)生耐藥性、環(huán)境污染等問(wèn)題。隨著越來(lái)越多的拮抗微生物陸續(xù)被發(fā)現(xiàn)，利用微生物防治煙草灰霉病具有廣闊的發(fā)展前景。本研究在對(duì)煙草灰霉病菌內(nèi)生拮抗細(xì)菌篩選的基礎(chǔ)上，構(gòu)建復(fù)合微生物并測(cè)定其對(duì)煙草灰霉病的防治效果，另對(duì)拮抗細(xì)菌的生防機(jī)制進(jìn)行探討，獲得的研究結(jié)果如下：
　　 ⑴采用菌絲生長(zhǎng)速率法從470株煙草內(nèi)生細(xì)菌中獲得對(duì)煙

2、草灰霉病菌有拮抗作用的菌株70株，對(duì)該病菌有營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)作用的菌株32株;另以孢子萌發(fā)法獲得對(duì)病菌孢子萌發(fā)抑制率較高的菌株72株;從中選擇抑菌效果較好的27株生防菌，采取煙葉組織法進(jìn)行復(fù)篩，有12株菌株的防治效果超過(guò)50％。對(duì)其中7株進(jìn)行生防菌之間親和性的測(cè)試，除菌株Y98外，其他菌株之間均表現(xiàn)親和。
　　 ⑵根據(jù)生防菌株之間的親和性及抑菌效果，選擇5株生防菌株，結(jié)合其形態(tài)特征、生理生化性狀、16S rDNA和gyrB基因序列分析，

3、將菌株G59、G81和Y11鑒定為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)，菌株Y88和Y141屬于假單胞菌屬（Pseudomonas）產(chǎn)熒光假單胞菌類(lèi)群。
　　 ⑶對(duì)以上5株生防菌進(jìn)行組合，有兩株菌株組合、三株菌株組合和四株菌株組合3種不同的組合方式。在所有生防菌組合中，Y11+Y141菌株組合的防治效果最高為72.02％，Y11+Y88+Y141+G59菌株組合的防治效果最差，為42.41％。為

4、了提高Y11+Y141菌株組合的防治效果，對(duì)它們的混配比例進(jìn)行優(yōu)化。試驗(yàn)結(jié)果顯示，比例為2∶1的防治效果比各單菌株以及其他混配比例處理的防治效果都高，為75.68％。
　　 ⑷選擇Y11∶Y141(2∶1)的組合進(jìn)行溫室盆栽試驗(yàn)防治效果測(cè)定。從試驗(yàn)結(jié)果看，各處理的保護(hù)效果均比治療效果高。Y11+Y141(2∶1)、Y11、Y141和300mg/L的異菌脲各處理的保護(hù)效果分別為65.81％、57.91％、42.09％和94.66％

5、;其治療效果分別為59.51％、42.19％、34.50％和85.78％，復(fù)合菌株的防治效果高于單菌株。
　　 ⑸Y11和Y141兩株生防菌的胞外代謝產(chǎn)物對(duì)供試的12種植物病原真菌均有不同程度的抑制作用，抑菌譜較廣。它們的胞外代謝產(chǎn)物對(duì)煙草灰霉病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用要強(qiáng)于揮發(fā)性代謝產(chǎn)物。通過(guò)光學(xué)顯微鏡觀察，Y11和Y141兩株生防菌的胞外代謝產(chǎn)物均能使灰霉病病菌菌絲形態(tài)發(fā)生顯著變化，菌絲粗短畸形，部分原生質(zhì)滲漏，細(xì)胞壁出現(xiàn)褶皺。